一种新的抗人IL-23单克隆抗体、包含其的试剂盒及其检测方法技术

本申请公开了一种人IL

【技术实现步骤摘要】
一种新的抗人IL
‑
23单克隆抗体、包含其的试剂盒及其检测方法


[0001]本申请属于免疫分析
，涉及一种定量检测人IL
‑
23的ELISA试剂盒，利用该试剂盒进行定量检测的方法。

技术介绍

[0002]白细胞介素(IL)是一组具有重要作用的细胞因子，由免疫细胞或非免疫细胞产生，随着分子生物学和细胞生物学技术的迅速发展，目前至少发现了38个白细胞介素，分别命名为IL
‑
1～IL
‑
38，功能复杂，成网络，复杂重叠；在免疫细胞的成熟、活化、增殖和免疫调节等一系列过程中均发挥重要作用，此外它们还参与机体的多种生理及病理反应。IL
‑
23是2000年发现的一种白细胞介素，目前已发现其具有多种生物学功能，并在多种疾病中发挥作用。
[0003]IL
‑
23主要由活化的树突状细胞、巨噬细胞及单核细胞等产生，是IL
‑
12异源二聚体细胞因子家族中新的一员，主要由IL
‑
23p19和IL
‑
12/IL
‑
23p40两个亚基组成，其中IL
‑
12/IL
‑
23p40是其与IL
‑
12共同含有的亚基。IL
‑
23p19与IL
‑
12/IL
‑
23p40两个亚基单独存在时，不具由生物学功能，只有二者相互连接形成同源二聚体，才能发挥生物学功能。
[0004]IL
‑
23主要通过与其受体相互作用，激活下游信号通路发挥生物学功能。IL
‑
23主要作用于Th17细胞，在Th17细胞的增殖与稳定中发挥重要作用，并能促进Th17细胞产生IL
‑
23、IL
‑
17F及IL
‑
22等细胞因子，这些炎症因子作用于角质形成细胞，导致角质形成细胞活化和过度增殖。活化的角质形成细胞又通过产生大量细胞因子、趋化因子和抗菌肽等，募集并激活T细胞等免疫细胞，形成免疫应答的级联效应，引起银屑病损害的发生。IL
‑
23在关节自身免疫炎症中，也是一个促进因子，如在风湿性关节炎中，IL
‑
23促进IL
‑
17的分泌，从而导致了关节的破坏。
[0005]目前市场上测定IL
‑
23含量的试剂盒产品类型少，且价格昂贵。本申请中的ELISA试剂盒可定量检测细胞培养基中IL
‑
23的含量，操作简单方便，灵敏度高，且具有良好的特异性，对IL
‑
23相关的自身免疫性疾病的发病机制以及药物模型等的研究具有重要的意义。

技术实现思路

[0006]要解决的技术问题：基于上述现有技术中存在的问题，本申请提供了一种基于改良双抗体夹心ELISA方法研制的人IL
‑
23ELISA试剂盒，并利用该试剂盒成功完成了人IL
‑
23的定量检测，其技术方案如下：
[0007]1.一种抗人IL
‑
23P19单克隆抗体，其特征在于，所述抗体包含：
[0008]a)抗体重链互补决定区，其包含：CDR
‑
H1、CDR
‑
H2、CDR
‑
H3，其中：
[0009]CDR
‑
H1具有序列SEQ ID NO 1：TYNYMC的氨基酸序列，
[0010]CDR
‑
H2具有序列SEQ ID NO 2：CIYTTKTNTWYASWAKG的氨基酸序列，
[0011]CDR
‑
H3具有序列SEQ ID NO 3：GGWDNLSL的氨基酸序列；
[0012]b)抗体轻链互补决定区，其包含：CDR
‑
L1、CDR
‑
L2、CDR
‑
L3，其中：
[0013]CDR
‑
L1具有序列SEQ ID NO 4：QSSQSVYSNNYLA的氨基酸序列，CDR
‑
L2具有序列SEQ ID NO 5：AASTLAS的氨基酸序列，
[0014]CDR
‑
L3具有序列SEQ ID NO 6：LGGYDDDAV的氨基酸序列。
[0015]2.根据项1所述的抗人IL
‑
23P19单克隆抗体，其特征在于，所述抗体包含抗体重链可变区HCVR和抗体轻链可变区LCVR，其中：
[0016]HCVR具有序列SEQ ID NO 7：
[0017]QEQLEESGGGLVKPGGTLTLTCKASGFDFTTYNYMCWVRQAPGKGLEWI
[0018]ACIYTTKTNTWYASWAKGRFTISKTSSTTVTLQMTSLTAADTATYFCARG GWDNLSLWGPGTLVTVSS的氨基酸序列；
[0019]LCVR具有序列SEQ ID NO 8：
[0020]AALTQTPASVSAAVGGTVTIKCQSSQSVYSNNYLAWYQQKPGQPPKVLIY
[0021]AASTLASGVPSRFSGSGSGTQFTLTISGVQCDDAATYYCLGGYDDDAVFG GGTEVVVK的氨基酸序列。
[0022]3.根据项1所述的抗人IL
‑
23P19单克隆抗体，其特征在于，所述抗体包含重链和轻链，其中：
[0023]所述重链氨基酸序列是SEQ ID NO 9：
[0024]QEQLEESGGGLVKPGGTLTLTCKASGFDFTTYNYMCWVRQAPGKGLEWIACIYTTKTNTWYASWAKGRFTISKTSSTTVTLQMTSLTAADTATYFCARGGWDNLSLWGPGTLVTVSSGQPKAPSVFPLAPCCGDTPSSTVTLGCLVKGYLPEPVTVTWNSGTLTNGVRTFPSVRQSSGLYSLSSVVSVTSSSQPVTCNVAHPATNTKVDKTVAPSTCSKPMCPPPELLGGPSVFIFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQDDPEVQFTWYINNEQVRTARPPLREQQFNSTIRVVSTLPIAHQDWLRGKEFKCKVHNKALPAPIEKTISKARGQPLEPKVYTMGPPREELSSRSVSLTCMINGFYPSDISVEWEKNGKAEDNYKTTPTVLDSDGSYFLYSKLSVPTSEWQRGDVFTCSVMHEALHNHYTQKSISRSPGK的氨基酸序列；
[0025]所述轻链的氨基酸序列是SEQ ID NO 10：
[0026]AALTQTPASVSAAVGGTVTIKCQSSQSVYSNNYLAWYQQKPGQP本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗人IL
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23P19单克隆抗体，其特征在于，所述抗体包含：a)抗体重链互补决定区，其包含：CDR
‑
H1、CDR
‑
H2、CDR
‑
H3，其中：CDR
‑
H1具有序列SEQ ID NO 1：TYNYMC的氨基酸序列，CDR
‑
H2具有序列SEQ ID NO 2：CIYTTKTNTWYASWAKG的氨基酸序列，CDR
‑
H3具有序列SEQ ID NO 3：GGWDNLSL的氨基酸序列；b)抗体轻链互补决定区，其包含：CDR
‑
L1、CDR
‑
L2、CDR
‑
L3，其中：CDR
‑
L1具有序列SEQ ID NO 4：QSSQSVYSNNYLA的氨基酸序列，CDR
‑
L2具有序列SEQ ID NO 5：AASTLAS的氨基酸序列，CDR
‑
L3具有序列SEQ ID NO 6：LGGYDDDAV的氨基酸序列。2.根据权利要求1所述的抗人IL
‑
23P19单克隆抗体，其特征在于，所述抗体包含抗体重链可变区HCVR和抗体轻链可变区LCVR，其中：HCVR具有序列SEQ ID NO 7：QEQLEESGGGLVKPGGTLTLTCKASGFDFTTYNYMCWVRQAPGKGL EWIACIYTTKTNTWYASWAKGRFTISKTSSTTVTLQMTSLTAADTATYFCA RGGWDNLSLWGPGTLVTVSS的氨基酸序列；LCVR具有序列SEQ ID NO 8：AALTQTPASVSAAVGGTVTIKCQSSQSVYSNNYLAWYQQKPGQPPK VLIYAASTLASGVPSRFSGSGSGTQFTLTISGVQCDDAATYYCLGGYDDDA VFGGGTEVVVK的氨基酸序列。3.根据权利要求1所述的抗人IL
‑
23P19单克隆抗体，其特征在于，所述抗体包含重链和轻链，其中：所述重链氨基酸序列是SEQ ID NO 9：QEQLEESGGGLVKPGGTLTLTCKASGFDFTTYNYMCWVRQAPGKGLEWIACIYTTKTNTWYASWAKGRFTISKTSSTTVTLQMTSLTAADTATYFCARGGWDNLSLWGPGTLVTVSSGQPKAPSVFPLAPCCGDTPSSTVTLGCLVKGYLPEPVTVTWNSGTLTNGVRTFPSVRQSSGLYSLSSVVSVTSSSQPVTCNVAHPATNTKVDKTVAPSTCSKPMCPPPELLGGPSVFIFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQDDPEVQFTWYINNEQVRTARPPLREQQFNSTIRVVSTLPIAHQDWLRGKEFKCKVHNKALPAPIEKTISKARGQPLEPKVYTMGPPREELSSRSVSLTCMINGFYPSDISVEWEKNGKAEDNYKTTPTVLDSDGSYFLYSKLSVPTSEWQRGDVFTCSVMHEALHNHYTQKSISRSPGK的氨基酸序列；所述轻链氨基酸序列是SEQ ID NO 10：AALTQTPASVSAAVGGTVTIKCQSSQSVYSNNYLAWYQQKPG...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐蕾，陈涛，孙秋萍，钱伟伦，鞠康琴，孔永，
申请(专利权)人：江苏荃信生物医药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：