一种从食用油脂中分离多种合成抗氧化剂的方法技术

本发明专利技术涉及检测技术领域，特别是一种从食用油脂中分离多种合成抗氧化剂的方法。本发明专利技术提供的从食用油脂中分离多种合成抗氧化剂的方法，采用有固相支持的、高表面积双液层渗透萃取技术，快速、高效地将食用油脂中多合成抗氧化剂分离提取并净化，得到含有多种合成抗氧化剂的溶液，可通过浓缩或不浓缩处理后，用于多种化学分析技术检测这些合成抗氧化剂的含量，也可经过用水稀释后用于免疫学分析技术检测这些合成抗氧化剂，操作简单，效率高，可同时对多个样品进行预处理，所使用的有机溶剂少，安全环保，回收率高，各种合成抗氧化剂回收率一般在80％～100％之间，稳定性好，各种合成抗氧化剂各自回收率的重复性RSD<5％。氧化剂各自回收率的重复性RSD<5％。氧化剂各自回收率的重复性RSD<5％。

【技术实现步骤摘要】
一种从食用油脂中分离多种合成抗氧化剂的方法


[0001]本专利技术涉及检测
，特别是一种从食用油脂中分离多种合成抗氧化剂的方法。

技术介绍

[0002]合成抗氧化剂是一类由人工化学合成或半合成的、具有抗氧化作用的化合物，并表现出较好的延缓各类食用油脂(包括含油食品中的油脂)氧化变质速度的作用，所以主要添加于各类食用动植物油脂、油脂制品(如人造奶油、起酥油等)和含油食品(如坚果与籽类制品、油炸面制品、方便米面制品、月饼、饼干、焙烧食品、腌腊肉制品、水产干制品、膨化食品等)，以延长这些种类食品的保质期。目前国内外常见的用于食品的合成抗氧化剂主要有叔丁基对羟基苯二酚(TBHQ)、没食子酸丙酯(PG)、没食子酸辛酯(OG)、没食子酸十二酯(DG)、2,6
‑
二叔丁基
‑4‑
羟甲基苯酚(Ionox
‑
100)、4
‑
己基间苯二酚(4
‑
HR)、没食子酸戊酯(IAG)、2,4,5
‑
三羟基苯丁酮(THBP)、去甲二氢愈创木酸(NDGA)、叔丁基对羟基茴香醚(BHA)、2,6
‑
二叔丁基对甲基苯酚(BHT)、乙氧喹啉(EQ)等。按照《食品安全国家标准食品添加剂使用标准》(GB 2760
‑
2014)中的相关规定，以上这些食品中各类抗氧化剂添加限量是“以油脂计“的，即除了各类食用动植物油脂外，油脂制品和各种含油食品，必须首先提取其中的油脂成分，再以提取的纯油脂为检测对象，测定其中合成抗氧化剂的含量是否超标，所以无论何种食品进行的检测，最终都是食用油脂中酚类合成抗氧化剂含量的测定。
[0003]目前我国各类食品中酚类合成抗氧化剂的检测主要是依据现行的《食品安全国家标准食品中9种抗氧化剂的测定》(GB 5009.32
‑
2016)、《出口油脂中抗氧化剂的测定高效液相色谱法》(SN/T 1050
‑
2014)和出口食品中多种抗氧化剂的测定(SN/T 3849
‑
2014)等检测技术标准进行的。这些标准主要是采用高效液相色谱技术(HPLC)，来同时分离测定食品中多种的合成抗氧化剂。并且都是反相高效液相色谱技术，即采用非极性的反相C18液相色谱柱为固定相，以极性的溶剂，如甲醇、乙腈等，与水组成不同比例的混合溶液为流动相，同时运用梯度洗脱技术，实现对多种合成抗氧化剂进行分离测定。该检测技术有个关键的前提，即必须首先通过适当的样品预处理技术，将这各种合成抗氧化剂从油脂中分离提取出来，并使提取物得到充分的净化，以尽可能降低其中的油脂残留量。这是因为各类天然食用油脂的主要成分——甘油脂肪酸酯类物质，在反相液相色谱技术的条件下，对C18液相色谱柱有极强的吸附污染作用，不仅会堵塞色谱柱，大大缩短C18液相色谱柱的使用寿命，而且对高效液相色谱仪的使用寿命也会造成极其不利的影响。
[0004]传统的从食用油脂中分离提取并净化多种合成抗氧化剂的主要技术有以下的3类：一)多次液
‑
液萃取技术：采用甲醇、乙醇等极性溶剂为萃取剂，从油脂的正己烷溶液(非极性溶液)通过多次的手工液
‑
液萃取操作，不断萃取其中的合成抗氧化剂，并合并每次液
‑
液萃取获得的极性萃取剂为提取液，最后浓缩蒸干提取液的溶剂后，进行HPLC检测。本技术主要有以下缺陷：纯手工操作烦琐，费时费力；受手工操作的影响，回收率波动范围较大，导致检测结果重复性和再现性差；有大量的油脂类成分杂质共萃取，净化效果差，对C18液相
色谱柱仍有较强的污染作用；有机溶剂消耗量大，不经济，不环保；需要对较大量的有机溶剂进行浓缩蒸发，安全性差。二)多次液
‑
液萃取+C18固相萃取净化技术：在多次液
‑
液萃取后，将全部提取液全部过C18固相萃取小柱，并进一步用萃取剂淋洗C18固相萃取小柱，合并所有的过柱流出液，浓缩蒸干其中的溶剂后，进行HPLC检测。本技术虽然能解决多次液
‑
液萃取有大量的油脂类成分杂质共萃取，而污染C18液相色谱柱的问题，但人工操作却更加复杂烦琐，费时费力，且机溶剂消耗量进一步加大，浓缩蒸发有机溶剂量也随之增大。三)制备型凝胶渗透色谱(GPC)：通过制备型凝胶渗透色谱柱的分子量分子筛作用，即利用合成抗氧化剂与油脂之间分子量的明显差异，通过凝胶渗透色谱的分离，将合成抗氧化剂从油脂中提取分离，该技术虽然可实现合成抗氧化剂与油脂的完全分离提取，并通过全自动或半自动的制备型凝胶渗透色谱仪器来完成相关的操作，从而大大降低了工人操作，但仍存在以下的技术不足：需要昂贵的专用仪器——制备型凝胶渗透色谱仪；成本高：需要昂贵的专用耗材——制备型凝胶渗透色谱柱，且该色谱柱的使用寿命很短，仅仅2
‑
3个月就会报废；预处理效率低：每次样品预处理操作仅能处理1个样品，虽然实现了仪器的全自动或半自动操作，但每预处理1个样品需要1个小时左右，效率极低；预处理时有机溶剂消耗量很大，单次预处理一般要消耗100mL以上的有机溶剂；仍需要对较大量的有机溶剂进行浓缩蒸发，安全性差。

技术实现思路

[0005]鉴于以上所述现有技术的缺点，本专利技术的目的在于提供一种从食用油脂中分离多种合成抗氧化剂的方法，采用有固相支持的、高表面积双液层渗透萃取技术，快速、高效地将食用油脂中多合成抗氧化剂分离提取并净化，得到含有多种被提取的合成抗氧化剂的溶液，可通过浓缩或不浓缩处理后，用于多种化学分析技术(如高效液相色谱、气相色谱、高效液相色谱联用质谱、气相色谱联用质谱等)检测这些合成抗氧化剂的含量，也可经过用水稀释后用于免疫学分析技术(如ELSA、胶体金免疫层析等)检测这些合成抗氧化剂。
[0006]为达到此目的，本专利技术采用以下技术方案：
[0007]本专利技术的第一方面提供一种从食用油脂中分离多种合成抗氧化剂的方法，具体技术方案如下：
[0008]本专利技术第一方面提供一种从食用油脂中分离多种合成抗氧化剂的方法，包括以下步骤：
[0009]步骤一、将油脂试样用油脂试样溶解液溶解并稀释为油脂试样溶液；
[0010]步骤二、将步骤一所得油脂试样溶液与固体提取吸附剂混合，然后加入提取液进行混合提取，得反应混合物；
[0011]步骤三、离心，反应混合物分为三层，取最上层溶液，加入含有净化吸附剂的QuEChERS(基质分散固相萃取)净化管净化处理，即得含有多种合成抗氧化剂的溶液；
[0012]所述油脂试样溶解液包括溶剂A和溶剂B；所述溶剂A为有机溶剂，与所述提取液互溶，且溶剂A中油脂试样的溶解度≥2.0g/100g溶剂A；所述溶剂B为有机溶剂，与所述提取液、溶剂A互溶，溶剂B中合成抗氧化剂的溶解度≥0.10g/100g溶剂B，且对于常温下呈液态的油脂试样，所述溶剂B与油脂试样不互溶，对于常温下呈固态的油脂试样，所述溶剂B与油脂试样互溶或不互溶均可；所述提取液中合成抗氧化剂的溶解度≥0.10g/100g提取本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种从食用油脂中分离多种合成抗氧化剂的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、将油脂试样用油脂试样溶解液溶解并稀释为油脂试样溶液；步骤二、将步骤一所得油脂试样溶液与固体提取吸附剂混合，然后加入提取液进行混合提取，得反应混合物；步骤三、离心，反应混合物分为三层，取最上层溶液，加入含有净化吸附剂的QuEChERS净化管净化处理，即得含有多种合成抗氧化剂的溶液；所述油脂试样溶解液包括溶剂A和溶剂B；所述溶剂A为有机溶剂，与所述提取液互溶，且溶剂A中油脂试样的溶解度≥2.0g/100g溶剂A；所述溶剂B为有机溶剂，与所述提取液、溶剂A互溶，溶剂B中合成抗氧化剂的溶解度≥0.10g/100g溶剂B，且对于常温下呈液态的油脂试样，所述溶剂B与油脂试样不互溶，对于常温下呈固态的油脂试样，所述溶剂B与油脂试样互溶或不互溶均可；所述提取液中合成抗氧化剂的溶解度≥0.10g/100g提取液，油脂试样的溶解度≤1.0g/100g提取液。2.如权利要求1所述的从食用油脂中分离多种合成抗氧化剂的方法，其特征在于，对于常温下呈液态的油脂试样，溶剂B的体积在油脂试样溶解液总体积中所占的比例为20％～50％，优选为30％～40％；对于常温下呈固态的油脂试样，溶剂B的体积在油脂试样溶解液总体积中所占的比例为30％～70％，优选为40％～60％。3.如权利要求1所述的从食用油脂中分离多种合成抗氧化剂的方法，其特征在于，包括以下特征中一项或几项：(1)所述油脂试样溶解液与油脂试样的体积比为2～20:1；(2)所述提取液与油脂试样的体积比为2～10:1；(3)所述固体吸附剂为二氧化硅颗粒，其中二氧化硅的含量大于99.5％；优选地，所述二氧化硅颗粒为天然的、表面粗糙的细砂；优选地，所述二氧化硅颗粒的目数为20～160；(4)所述净化吸附剂为C18封端吸附剂。4.如权利要求1所述的从食用油脂中分离多种合成抗氧化剂的方法，其特征在于，包括以下特征中的一项或几项：
ⅰ
)步骤二中为了保证油脂试样溶液充分分散涂布于固体提取吸附剂的固相颗粒表面，需要满足两个条件：1)每10g所述固体提取吸附剂中，加入的油脂试样溶液的体积为1.0～4.0mL；2)将油脂试样溶液加入所述固体提取吸附剂后，在室温下静置，静置时间大于等于3min；
ⅱ
)步骤二中所述混合提取采用旋涡振荡的方式，具体为以2000～3500rpm旋涡振荡充分混合反应30～120s；
ⅲ
)步骤三中所述离心为高速离心，转速为4000～10000rpm；
ⅳ
)步骤三中所述净化处理采用旋涡振荡的方式，具体为以2000～3000rpm旋涡振荡充分混合反应1～5min。5.如权利要求1所述的从食用油脂中分离多种合成抗氧化剂的方法，其特征在于，所述油脂试样溶解液与所述提取液之间满足如下关系：以溶剂的体积百分比计，单次提取所使用的油脂试样溶解液中溶剂A的体积在所使用的油脂试样溶解液和提取液的总体积中所占比例范围为...

【专利技术属性】
技术研发人员：薛斌，朱蕊，夏红霞，任兴发，屠炳芳，
申请(专利权)人：月旭科技上海股份有限公司，
类型：发明
国别省市：