一种尿嘧啶核苷、制备方法以及应用技术

本发明专利技术涉及一种尿嘧啶核苷、制备方法以及应用，尿嘧啶核苷的分子式为C9H

【技术实现步骤摘要】
一种尿嘧啶核苷、制备方法以及应用


[0001]本专利技术一种尿嘧啶核苷、制备方法以及应用。

技术介绍

[0002]大型真菌不但种类繁多，而且是“创造系数”很高的生物类群。大型真菌中发现的天然产物结构多样，并且具有抗细菌、促进神经生长因子合成、酶抑制剂、抗真菌、细胞毒、受体拮抗剂和抗氧化等多种生物活性。
[0003]银耳是我国传统名贵食用菌，有较高的营养价值，其子实体和其它食用菇类一样，含有丰富的碳水化合物、蛋白质、维生素和矿物质，且味美可口，是深受喜爱的滋补食品。
[0004]目前，为了提高银耳产品的价值，银耳的各种深加工产品也陆续被开发出来，如银耳饮料、银耳羹、银耳酒、银耳化妆品、银耳酸奶、即食银耳等等产品。但这些产品的开发主要是基于银耳的营养价值，产品的价值较低，对提升整个银耳产业发展的支撑力度有限。银耳还有较高的药用价值，在中医药典籍中均有记载银耳的功效。银耳性平、味甘，归肺、胃、肾经，有利五脏、补气血的功效，适用于五脏虚弱、气血不足、面色无华、毛发不泽，有“强精、补肾、润肺、生津、止咳、清热、养胃、补气和血、强心、壮身、补脑、提神”之功，在《神农本草经》、《名医别录》、《本草经集注》、《新修本草》和《本草品汇精要》及《中华本草》里均有记载。
[0005]但目前对银耳功效作用的物质基础，还未明析，主要集中在粗多糖或总糖的含量测定上，较少关注银耳的小分子化学成分，导致银耳产品深加工方向和形式缺乏目标，制约了具有高附加值银耳功效产品的开发。

技术实现思路

[0006]为了解决上述问题，本专利技术的目的在于提供一种尿嘧啶核苷、制备方法以及应用。
[0007]为实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案：
[0008]作为本专利技术的一个方面，提供了一种核苷类化合物，所述核苷类化合物为尿嘧啶核苷，分子式为C9H
12
N2O6，结构式如式Ⅰ所示：
[0009][0010]作为本专利技术的另外一个方面，提供了一种尿嘧啶核苷的制备方法，所述制备方法包括：
[0011]步骤1、将银耳样品，用有机溶剂浸提得到有机提取物，将获得的有机提取物用正丁醇萃取，减压浓缩得到正丁醇萃取物；
[0012]步骤2、将步骤1获得的正丁醇萃取物进行反相柱层析，分别用甲醇水或丙酮水梯
度洗脱，分部收集，离心浓缩除去洗脱剂后，加入甲醇溶解，进行薄层层析分析，依据薄层层析显色结果进行合并，获得含目标化合物的组分A；
[0013]步骤3、接着采用凝胶柱层析对步骤2获得含目标化合物的组分A进一步分离纯化，以甲醇或丙酮为洗脱剂，分部收集，根据薄层层析显色结果进行合并，得到含目标化合物的组分B；
[0014]步骤4、最后将步骤3获得的含目标化合物的组分B进行正相硅胶柱层析，以氯仿和二氯甲烷任选一种，和乙酸乙酯、丙酮和甲醇任选一种组成洗脱剂组合进行洗脱，获得目标化合物尿嘧啶核苷。
[0015]其中，所述银耳样品为银耳鲜品或者银耳干品。
[0016]其中，步骤1中的有机溶剂为甲醇或者乙醇。
[0017]其中，步骤1中正丁醇：水按照1:1的比例萃取2～5次。
[0018]其中，步骤2中的反相硅胶柱层析，用不同梯度甲醇水或丙酮水梯度洗脱，其中甲醇或丙酮为30％、50％、70％和100％四个浓度。
[0019]其中，步骤3中进行凝胶柱层析，其中丙酮或甲醇洗脱剂浓度为50～100％。
[0020]其中，步骤4中氯仿和二氯甲烷任选一种，和乙酸乙酯、丙酮和甲醇任选一种的体积比为100：1～20。
[0021]作为本专利技术的第三个方面，所述尿嘧啶核苷在银耳功能性保健食品上的应用。
附图说明
[0022]图1为本专利技术的实施例一获得的化合物尿嘧啶核苷的氢谱图；
[0023]图2为本专利技术的实施例一获得的的化合物尿嘧啶核苷的碳谱图；
[0024]图3为本专利技术的化合物尿嘧啶核苷的化学结构式。
具体实施方式
[0025]以下结合附图和具体实施例对本专利技术做进一步详细说明：
[0026]实施例一、
[0027]一种尿嘧啶核苷的制备方法，包括如下方法步骤：
[0028]步骤1、将银耳鲜品于60℃烘箱中烘干粉碎后用4L甲醇浸提，超声30min，室温静置过夜，共浸提三次，得到甲醇浸提物；再将甲醇浸提物按照乙酸乙酯：水＝300：300萃取3次，除去乙酸乙酯相，余下水相用正丁醇萃取3次，减压浓缩得到正丁醇萃取物。
[0029]步骤2、对步骤1获得的正丁醇萃取物进行反相柱层析，作进一步分离纯化，用纯水和4个不同浓度的甲醇水溶液，即采用30％甲醇、50％甲醇、70％甲醇和100％甲醇为洗脱剂，每个梯度分别洗脱1.5L，分瓶收集，每瓶收集150mL，每瓶取5mL，离心浓缩除去洗脱剂后，加入0.5mL甲醇溶解，进行薄层层析分析，根据薄层层析显色结果，合并获得含目标化合物的组分A。
[0030]步骤3、将步骤2获得的含目标化合物的组分A进行凝胶柱层析，用浓度为50％的甲醇为洗脱剂，分管收集，每1h收1管5mL，根据薄层层析分析，合并获得含目标化合物的组分B。
[0031]步骤4、将步骤3获得含目标化合物的组分B采用正相硅胶柱层析进行分离纯化，在
洗脱剂为二氯甲烷与甲醇体积比为20：1时，获得目标化合物。
[0032]将步骤4获得的化合物，进行核磁共振氢谱(1H NMR)和碳谱(13CNMR)测定，化合物的氢谱参见图1，化合物的碳谱参见图2。
[0033]获得的化合物为白色物质，可溶于甲醇和水。
[0034]化合物的1H NMR(600MHz,Methanol
‑
d4)δ：8.01(d,J＝8.1Hz,1H),5.90(d,J＝4.7Hz,1H),5.70(d,J＝8.1Hz,1H),4.18(t,J＝5.0Hz,1H),4.16
–
4.12(m,1H),4.05
–
3.98(m,1H),3.84(dd,J＝12.2,2.7Hz,1H),3.73(dd,J＝12.2,3.1Hz,1H)。化合物的
13
C NMR(151MHz,Methanol
‑
d4)δ：62.26,71.30,75.73,86.35,90.68,102.63,142.74,152.46,166.21。
[0035]根据化合物的氢谱和碳谱将化合物解析为尿苷，化学结构参见图3。
[0036]实施例二、
[0037]一种尿嘧啶核苷的制备方法，包括如下方法步骤：
[0038]步骤1、将银耳鲜品于60℃烘箱中烘干粉碎后用4L乙醇浸提，超声30min，室温静置过夜，共浸提三次，得到乙醇浸提物；再将乙醇浸提物按照乙酸乙酯：水＝300：300萃取3次，除去乙酸乙酯相，余下水相用正丁醇萃取2次，减压浓缩得到正丁醇萃取物。
[0039]步骤2、对步骤1获得的正丁醇萃取物进行反相柱层析，作进一步分本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种尿嘧啶核苷，其特征在于，分子式为C9H
12
N2O6，结构式如式Ⅰ所示：2.根据权利要求1所述的尿嘧啶核苷的制备方法，其特征在于，包括如下方法步骤：步骤1、将银耳样品，用有机溶剂浸提得到有机提取物，将获得的有机提取物用正丁醇萃取，减压浓缩得到正丁醇萃取物；步骤2、将步骤1获得的正丁醇萃取物进行反相柱层析，分别用甲醇水或丙酮水梯度洗脱，分部收集，离心浓缩除去洗脱剂后，加入甲醇溶解，进行薄层层析分析，依据薄层层析显色结果进行合并，获得含目标化合物的组分A；步骤3、接着采用凝胶柱层析对步骤2获得含目标化合物的组分A进一步分离纯化，以甲醇或丙酮为洗脱剂，分部收集，根据薄层层析显色结果进行合并，得到含目标化合物的组分B；步骤4、最后将步骤3获得的含目标化合物的组分B进行正相硅胶柱层析，以氯仿和二氯甲烷任选一种，和乙酸乙酯、丙酮和甲醇任选一种组成洗脱剂组合进行洗脱，获得目标化合物尿嘧啶核苷。...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑永标，陈清华，林衍佺，马璐，
申请(专利权)人：福建古田康亿达生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：