分子改造的嘌呤核苷磷酸化酶及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种分子改造的嘌呤核苷磷酸化酶及其制备方法。采用ＰＣＲ技术从嗜热乳链球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ　ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）中扩增嘌呤核苷磷酸化酶（ＰＮＰ）全长片段，用ｐＥＴ－４３．１ｂ（＋）质粒载体构成ｐＥＴ－４３．１ｂ（＋）－ＰＮＰ重组载体，用定点突变的方法将片段第２３０位半胱氨酸突变为丙氨酸，用Ｅ．ｃｏｌｉ　ＢＬ２１（ＤＥ３）转化为工程菌。将工程菌发酵培养、诱导原核细胞表达，亲和层析纯化重组嘌呤核苷磷酸化酶。采用本发明专利技术得到的酶，热稳定性得到改良，并且可以提高产率，还可以缩短生产周期、降低成本。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种分子改造的嘌呤核苷磷酸化酶，其特征在于是嘌呤核苷磷酸化酶突变体ＤＮＡ序列的表达产物；突变体氨基酸序列是通过使ＳＥＱ　ＩＤ　Ｎ０．１所示的序列中２３０位半胱氨酸突变替换为丙氨酸，得到具有ＳＥＱ　ＩＤ　Ｎ０．２的氨基酸序列的嘌呤核苷磷酸化酶。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：朱永良，闻树群，
申请(专利权)人：杭州利安生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：86[中国|杭州]