一种神经修复蛋白组合物及其制备方法和其应用技术

本发明专利技术涉及一种神经修复蛋白组合物，其制备包括如下步骤：在细胞蛋白提取物中加入20U/mL

【技术实现步骤摘要】
一种神经修复蛋白组合物及其制备方法和其应用


[0001]本专利技术属于生物医药
，具体涉及一种神经修复蛋白组合物及其制备方法和其应用。

技术介绍

[0002]细胞是生命活动的基本单位和机体健康的基础。当机体的氧化还原平衡遭到破坏时，会引起氧化还原信号和控制的中断，引发氧化应激损伤而引发多种疾病。脑部缺血缺氧(如脑卒中、脑溢血、长期高原作业、颈内动脉及椎动脉闭塞和/或狭窄等)及氧化应激损伤等，可引发多种因神经元或胶质细胞的丢失而导致的神经退行性疾病，包括记忆力减退、阿尔兹海默症、帕金森症、老年痴呆、多发性硬化症、共济失调、亨廷顿病、肌萎缩侧索硬化症等。目前，我国帕金森患者超过300万，渐冻症患者超过20万，老年痴呆患者超过千万，且随着全球人口老年化的加剧而存在高发病率等特点。及时修复损伤细胞可以显著改善、治疗相关病变。
[0003]脑卒中(脑供血动脉狭窄或闭塞导致血液不能流入大脑)及脑溢血(脑部血管突然破裂)为常见的中枢神经系统疾病，因脑供血不足所致脑组织缺血缺氧性损伤，并表现出相应神经功能缺损症状，包括平衡问题、偏瘫、感觉和振动感本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种神经修复蛋白组合物，其制备包括下述步骤：(1)在本发明的细胞蛋白提取物中加入20U/mL
‑
35U/mL的核酸酶或全能核酸酶的任一种或其组合，将其置于37℃
±
1℃条件下酶解15min
‑
40min，制得酶解液；(2)在2℃
‑
8℃条件下，将步骤(1)制得的酶解液用洗脱溶剂配置成5
‑
15mg/ml后，过色谱柱，洗脱流速为0.1
‑
1ml/min，监测并收集紫外波长为280nm的洗脱馏分，即得，其中，洗脱溶剂由50mmo l/L磷酸盐缓冲液(pH6.8)中含300mmol/L氯化钠组成。2.如权利要求1所述的蛋白组合物，所述蛋白提取物的制备包括如下步骤：S
‑
1:将密度为5.0
×
106个/mL
‑
1.0
×
107个/mL的间充质传代干细胞置于含有DMEM/F12 40
‑
50％、RPMI 1640 40
‑
50％、牛血清蛋白(BSA)0.1
‑
2％、表皮细胞生长因子(EGF)1
‑
15ug/mL、成纤维细胞生长因子(FGF)1
‑
15ug/mL、胰岛素转铁蛋白1
‑
15ug/mL、复方氨基酸(18AA)0.01
‑
0.1％和2
‑
10μmol/L应激物的培养基中，再将其置于37.0℃
±
0.5℃、5％
±
1.0％CO2条件下培养2h
‑
6h后，分离，洗涤，收集细胞，其中，所述的应激物选自化合物1
‑
16的任一种或其组合，
S
‑
2:将收集细胞按照密度为5.0
×
106个/mL
‑
5.0
×
107个/mL分散于溶剂中，再将其置于2℃
‑
8℃条件下超声处理，制得细胞裂解液，其中，所述溶剂选自选自生理盐水、5％葡萄糖溶液、磷酸盐缓冲液(PBS)、TBPS缓冲液、TBST缓冲液、Tr i s缓冲液的任一种或其组合；S
‑
3:将步骤S
‑
2制得的细胞裂解液分离后，所得的分离液依次经...

【专利技术属性】
技术研发人员：王宇，高文勇，陈琳，李建军，
申请(专利权)人：北京达尔文细胞生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：