【技术实现步骤摘要】
一种细胞修复蛋白提取物及其制备方法和其应用
[0001]本专利技术属于生物医药
,具体涉及一种细胞修复蛋白提取物及其制备方法和其应用。
技术介绍
[0002]细胞是生命活动的基本单位和机体健康的基础。当机体的氧化还原平衡遭到破坏时,会引起氧化还原信号和控制的中断,引发氧化应激损伤而引发多种疾病。及时修复损伤细胞可以显著改善、治疗相关病变。
[0003]细胞及微生物受到外界刺激及外源应激物(包括冷、热、酸、碱、电流、辐射、化学物质等)应激诱导时会因应激反应而诱导细胞及微生物产生应激蛋白。文献1(New limonophyllines A
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C from the stem of Atalantia monophylla and cytotoxicity against cholangiocarcinoma and HepG2 cell lines,Arch.Pharm.Res.(2018)41:431
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437)公开了从芸香科植物(Atalantia monophylla)提取制
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种具有细胞修复功效的细胞蛋白提取物,其制备包括如下步骤:(1)将密度为1.0
×
106个/mL
‑
5.0
×
107个/mL的间充质传代细胞置于含有DMEM/F12 40
‑
50%、RPMI 1640 40
‑
50%、牛血清蛋白(BSA)0.1
‑
2%、表皮细胞生长因子(EGF)1
‑
15ug/mL、成纤维细胞生长因子(FGF)1
‑
15ug/mL、胰岛素转铁蛋白1
‑
15ug/mL、复方氨基酸(18AA)0.01
‑
0.1%和2
‑
10μmo l/L应激物的培养基中,再将其置于37.0℃
±
0.5℃、5%
±
1.0%CO2条件下培养10min
‑
14h后,分离,洗涤,收集细胞,其中,所述的应激物选自化合物1
‑
16的任一种或其组合,
(2)将收集细胞按照密度为5.0
×
106个/mL
‑
1.0
×
107个/mL分散于溶剂中,再将其置于2℃
‑
8℃条件下超声处理,制得细胞裂解液,其中,所述溶剂选自选自生理盐水、5%葡萄糖溶液、磷酸盐缓冲液(PBS)、TBPS缓冲液、TBST缓冲液、Tr i s缓冲液的任一种或其组合;(3)将步骤(2)制得的细胞裂解液分离后,所得的分离液依次经0.45um、0.22 um滤膜过滤,即得。2.如权利要求1所述的蛋白提取物,步骤(1)的培养基中含有DMEM/F12 42
‑
45%、RPM I 1640 42
‑
45%、牛血清蛋白(BSA)0.5
‑
1.5%、表皮细胞生长因子(EGF)5
‑
10ug/mL、成纤维细胞生长因子(FGF)5
‑
10ug/mL、胰岛素转铁蛋白5
‑
10ug/mL、复方氨基酸(18AA)0.02
‑
0.05%和3
‑
8μmol/L的...
【专利技术属性】
技术研发人员:王宇,高文勇,陈琳,李建军,
申请(专利权)人:北京达尔文细胞生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
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