人类ND1基因重组载体在制备ND1融合蛋白试剂盒中应用制造技术

本发明专利技术公开了人类ND1基因重组载体在制备ND1融合蛋白试剂盒中应用。通过全基因合成方法合成核密码子编码的ND1核苷酸序列，构建人类ND1基因重组载体，将重组载体导入细胞后合成靶向线粒体的ND1融合蛋白并发挥功能。ND1基因重组载体的核苷酸序列如SEQ ID NO:7所示。本发明专利技术还公开了上述制备的ND1融合蛋白的氨基酸序列，线粒体靶向序列，CMV启动子序列，表达载体序列，包含ND1融合蛋白制备方法及所用制剂。本发明专利技术所述人类ND1基因重组载体能在细胞中高效表达，制备的ND1融合蛋白能靶向线粒体，发挥正常ND1蛋白功能，缓解m.3460G>A突变导致的ND1蛋白异常对细胞功能造成的影响。的ND1蛋白异常对细胞功能造成的影响。

【技术实现步骤摘要】
人类ND1基因重组载体在制备ND1融合蛋白试剂盒中应用


[0001]本专利技术涉及生物医学领域，涉及人类ND1基因重组载体在制备ND1融合蛋白试剂盒中应用，是制备缓解m.3460G>A突变导致的Leber遗传性视神经病变的ND1融合蛋白试剂盒。

技术介绍

[0002]线粒体是细胞有氧呼吸的主要场所，其氧化磷酸化产物ATP是生命活动主要的能量来源。ND1蛋白是线粒体呼吸链复合体Ⅰ的重要组成亚基，编码ND1蛋白的线粒体基因突变导致蛋白氨基酸序列改变，常引发细胞能量代谢异常并导致疾病发生。
[0003]Leber遗传性视神经病变(Leber hereditary optic neuropathy，LHON)是以双侧无痛性、急性或亚急性中央视野缺失和视力衰竭为特征的退行性视力障碍，儿童至老年均可发病，青年及男性好发，发病年龄通常集中在20
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30岁，患病个体发病前通常不表现其他症状，多数患者视力下降至0.1以下。
[0004]Leber遗传性视神经病变由线粒体位点致病突变引起，呈母系遗传特点，目前国内由于本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.人类ND1基因重组载体在制备ND1融合蛋白试剂盒中应用，其特征在于，所述人类ND1基因重组载体的基因序列从N端到C端依次为CMV启动子、线粒体靶向序列COX8A
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MTS和优化后的核密码子编码的人类线粒体ND1核苷酸序列。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述人类ND1基因重组载体的核苷酸序列为优化后的核密码子编码的人类ND1基因核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，该载体能在突变细胞中表达野生型ND1蛋白，替代突变导致的ND1异常蛋白，进而缓解m.3460G>A突变导致的Leber遗传性视神经病变。3.根据权利要求1所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：管敏鑫，冀延春，王静，陈加荣，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：