一种表达载体及其在目的基因克隆或表达中的应用制造技术

本发明专利技术涉及一种表达载体及其在目的基因克隆或表达中的应用，属于生物技术领域。本发明专利技术提供了一种表达载体，所述表达载体包括质粒骨架；所述质粒骨架包括启动子和Poly(A)信号；所述启动子包括CMV启动子、鸡β

【技术实现步骤摘要】
promoter)、MSCV启动子(MSCV promoter)、人磷酸甘油酸激酶启动子(human phosphoglycerate kinase promoter，hPGK promoter)、泛素C启动子(UbC promoter)和/或人延长因子1α启动子(Human EF
‑
1αpromoter)；所述Poly(A)信号包括β
‑
globin poly(A)signal、bGH poly(A)signal、HSV TK poly(A)signal、Synthetic poly(A)signal和/或SV40poly(A)signal。
[0007]在本专利技术的一种实施方式中，所述启动子包括CMV启动子(CMV promoter)、鸡β
‑
肌动蛋白启动子(Chickenβ
‑
actin promoter)和/或人延长因子1α启动子(Human EF
‑
1αpromoter)；所述Poly(A)信号包括β
‑
globin poly(A)signal、bGH pol本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种表达载体，其特征在于，所述表达载体包括质粒骨架；所述质粒骨架包括启动子和Poly(A)信号；所述启动子包括CMV启动子、鸡β
‑
肌动蛋白启动子、SFFV启动子(SFFV promoter)、MSCV启动子(MSCV promoter)、人磷酸甘油酸激酶启动子(human phosphoglycerate kinase promoter，hPGK promoter)、泛素C启动子(UbC promoter)和/或人延长因子1α启动子；所述Poly(A)信号包括β
‑
globin poly(A)signal、bGH poly(A)signal、HSV TK poly(A)signal、Synthetic poly(A)signal和/或SV40 poly(A)signal。2.如权利要求1所述的表达载体，其特征在于，所述质粒骨架还包括土拨鼠肝炎病毒转录后调节元件、嵌合内含子和/或信号肽；所述信号肽包括Gaussia luciferase信号肽、Serum albumin preproprotein信号肽和/或Ig kappa chain V
‑
III region MOPC 321信号肽。3.如权利要求1或2所述的表达载体，其特征在于，所述土拨鼠肝炎病毒转录后调节元件插入在质粒骨架的多克隆位点与聚腺苷酸化信号之间；所述嵌合内含子插入在质粒骨架的启动子之后；所述信号肽插入在质粒骨架的多克隆位点处。4.如权利要求1～3任一项所述的表达载体，其特征在于，所述质粒骨架的启动子为鸡β
‑
肌动蛋白启动子，所述质粒骨架的Poly(A)信号为β
‑
globin poly(A)signal，所述质粒骨架的启动子之后插入有嵌合内含子，并且，所述质粒骨架的多克隆位点处插入Serum albumin preproprotein信号肽；或者，所述质粒骨架的启动子为CMV启动子，所述质粒骨架的Poly(A)信号为bGH poly(A)signal，所述质粒骨架的多克隆位点与bGH poly(A)signal之间插入有土拨鼠肝炎病毒转录后调节元件，并且，所述质粒骨架的多克隆位点处插入Serum albumin preproprotein信号肽；或者，所述质粒骨架的启动子为鸡β
‑
肌动蛋白启动子，所述质粒骨架的我方案号Poly(A)信号为β
‑
globin poly(A)signal，所述质粒骨架的多克隆位点与β
‑
globin poly(A)signal之间插入有土拨鼠肝炎病毒转录后调节元件，所述质粒骨架的启动子之后插入有嵌合内含子，并且，所述质粒骨架的多克隆位点处插入Serum albumin preproprotein信号肽；或者，所述质粒骨架的启动子为鸡β
‑
肌动蛋白启动子，所述质粒骨架的Poly(A)信号为bGH poly(A)signal，所述质粒骨架的多克隆位点与bGH poly(A)signal之间插入有土拨鼠肝炎病毒转录后调节元件，所述质粒骨架的启动子之后插入有嵌合内含子，并且，所述质粒骨架的多克隆位点处插入Serum albumin preproprotein信号肽；或者，所述质粒骨架的启动子为鸡β
‑
肌动蛋白启动子，所述质粒骨架的Poly(A)信号为bGH poly(A)signal，所述质粒骨架的启动子之后插入有嵌合内含子，并且，所述质粒骨架的多克隆位点处插入Gaussia luciferase信号肽；或者，所述质粒骨架的启动子为鸡β
‑
肌动蛋白启动子，所述质粒骨架的Poly(A)信号为HSV TK poly(A)signal，所述质粒骨架的多克隆位点与HSV TK poly(A)signal之间插入有土拨鼠肝炎病毒转录后调节元件，所述质粒骨架的启动子之后插入有嵌合内含子，并且，所述质粒骨架的多克隆位点处插入Gaussia luciferase信号肽；或者，所述质粒骨架的启动子为鸡β
‑
肌动蛋白启动子，所述质粒骨架的Poly(A)信号为β
‑
globin poly(A)signal，所述质粒骨架的多克隆位点与β
‑
globin poly(A)signal之间插
入有土拨鼠肝炎病毒转录后调节元件，所述质粒骨架的启动子之后插入有嵌合内含子，并且，所述质粒骨架的多克隆位点处插入Gaussia luciferase信号肽。5.如权利要求1～4任一项所述的表达载体，其特征在于，所述质粒骨架在pcDNA3.1(+)质粒的基础上改造而得；所述改造为将pcDNA3.1(+)...

【专利技术属性】
技术研发人员：邓凤，李慧，周静，吴辉辉，
申请(专利权)人：苏州金唯智生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：