肝脏特异性表达的重组启动子和载体及其在肝脏相关疾病治疗中的应用制造技术

技术编号:38438165 阅读:26 留言:0更新日期:2023-08-11 14:22
本发明专利技术公开了肝脏特异性表达的重组启动子和载体及其在肝脏相关疾病治疗中的应用,所述重组肝脏特异性启动子可用于驱动较大的外源基因表达,由此解决了现有基因治疗技术所采用的rAAV载体存在装载容量有限的技术问题,此外,所述启动子具有较高的特异性、表达强度和安全性,适用于rAAV介导的基因治疗,为肝脏代谢类疾病、凝血因子缺乏造成的血友病等多种疾病相关的基因药物的开发提供了良好的线索。病相关的基因药物的开发提供了良好的线索。病相关的基因药物的开发提供了良好的线索。

【技术实现步骤摘要】
肝脏特异性表达的重组启动子和载体及其在肝脏相关疾病治疗中的应用


[0001]本专利技术属于生物医药
,具体地,本专利技术涉及肝脏特异性表达的重组启动子和载体及其在肝脏相关疾病治疗中的应用。

技术介绍

[0002]肝脏是动物机体中具有新陈代谢作用的消化系统器官,参与代谢、分泌胆汁、能量转换、解毒、凝血、免疫等多个生理过程。肝脏代谢异常会导致多种疾病的发生,例如肝炎、肝纤维化、肝硬化、脂肪肝、肝癌等,此外,糖尿病、肥胖症、血友病等疾病也和肝脏代谢异常有关,肝脏代谢疾病主要是由于某些基因过度表达或表达不足所致。而肝脏相关疾病是威胁人类生命健康的一类重要因素,每年在全世界造成约200万人死亡,目前的医疗手段与药物对于肝脏相关疾病的治疗效果不佳,不仅存在感染疾病的危险,而且只能暂时减轻肝脏相关疾病的相关症状,无法起到治本的作用。
[0003]血友病B是由凝血因子IX(F9)缺乏引起的一种严重的遗传性出血性疾病,为X连锁隐性遗传,在男性中发病率为1/30000。其中,F9由肝脏合成并分泌到血浆中,生理状态下以酶原形式存在,当发生出血时,F9被本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一组重组肝脏特异性启动子,其特征在于,所述重组肝脏特异性启动子包括HBVpS启动子、HBVpL启动子、HBVpM启动子、hALBpL启动子、hALBpS启动子、FGBp启动子、SERPINA启动子;优选地,所述HBVpS启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO:6所示或与SEQ ID NO:6具有至少90%同一性的核苷酸序列;优选地,所述HBVpL启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示或与SEQ ID NO:4具有至少90%同一性的核苷酸序列;优选地,所述HBVpM启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO:5所示或与SEQ ID NO:5具有至少90%同一性的核苷酸序列;优选地,所述hALBpL启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示或与SEQ ID NO:2具有至少90%同一性的核苷酸序列;优选地,所述hALBpS启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示或与SEQ ID NO:1具有至少90%同一性的核苷酸序列;优选地,所述FGBp启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示或与SEQ ID NO:3具有至少90%同一性的核苷酸序列;优选地,所述SERPINA启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO:7所示或与SEQ ID NO:7具有至少90%同一性的核苷酸序列。2.一组重组核酸分子,其特征在于,所述重组核酸分子包含权利要求1所述的重组肝脏特异性启动子;优选地,所述重组核酸分子的核苷酸序列如SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:7中任一种所示或与SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:7中任一种具有至少90%同一性的核苷酸序列。3.一组表达盒,其特征在于,所述表达盒包含权利要求2所述的重组核酸分子和编码目的基因的核苷酸序列;优选地,权利要求2所述的重组核酸分子可操作性地连接至目的基因的上游;更优选地,所述重组核酸分子能够促进目的基因在肝脏组织中的特异性表达;最优选地,所述目的基因包括F9、F9/384L、F8、F11、GH、PTH、GRF、FSH、LH、hCG、VEGF、血管生成素、血管抑素、GCSF、EPO、CTGF、bFGF、aFGF、EGF、PDGF、IGF

I、GAA、IGF

II、和/或荧光蛋白基因;最优选地,所述荧光蛋白包括EGFP、mCherry、GFP、YFP、EYFP、BFP、EBFP、CFP、ECFP、RFP、hfGFP、hfYFP、OFP、dsRed、qFP611、Dronpa、TagRFP、KFP、EosFP、IrisFP、Dendra、Kaede、和/或KikGr1。4.一组重组表达载体,其特征在于,所述重组表达载体包含权利要求2所述的重组核酸分子、和/或权利要求3所述的表达盒;优选地,所述表达载体包括病毒载体、质粒载体;更优选地,所述病毒载体包括腺相关病毒载体、腺病毒载体、慢病毒载体、逆转录病毒载体、甲病毒载体、疱疹病毒载体、EB病毒载体、牛痘病毒载体;最优选地,所述腺相关病毒载体包括AAV1、AAV2、AAV3、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8、
AAV9、AAV10、AAV11、AAV12、AAV13、AAV2/1、AAV2/2、AAV2/5、AAV2/6、AAV2/8、AAV2/9。5.一种哺乳动物宿主细胞,其特征在于,所述哺乳动物宿主细胞包含权利要求3所述的表达盒、和/或权利要求4所述的重组表...

【专利技术属性】
技术研发人员:张恒顾雨春武佳燕肖思雨吴理达
申请(专利权)人:呈诺再生医学科技北京有限公司
类型:发明
国别省市:

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