一种生产苏氨酸的重组微生物及其应用制造技术

本发明专利技术涉及微生物工程技术领域，具体涉及一种生产苏氨酸的重组微生物及其应用。本发明专利技术提供一种重组微生物，其中，磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶编码基因的起始密码子上游20～30bp片段被替换为强启动子。本发明专利技术通过对磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶编码基因的启动子的特异优化和基因编码区的突变，显著提高了菌株合成苏氨酸的能力，苏氨酸产量较未经改造的菌株提高25

【技术实现步骤摘要】
一种生产苏氨酸的重组微生物及其应用


[0001]本专利技术涉及微生物工程
，具体涉及一种生产苏氨酸的重组微生物及其应用。

技术介绍

[0002]L
‑
苏氨酸(L
‑
Threonin，化学名为β
‑
羟基
‑
α
‑
氨基丁酸)的分子式为C4H9NO3，相对分子质量为119.12，是一种必需氨基酸，主要用于医药、化学试剂、食品强化剂、饲料添加剂等领域。
[0003]谷氨酸棒状杆菌中，由草酰乙酸生成苏氨酸需要五步催化反应，其催化酶分别为天冬氨酸激酶(lysC编码)、天冬氨酸半醛脱氢酶(asd编码)、高丝氨酸脱氢酶(hom编码)、高丝氨酸激酶(thrB编码)以及苏氨酸合酶(thrC编码)。目前利用谷氨酸棒状杆菌生产苏氨酸的报道主要集中在对苏氨酸的合成代谢路径的改造，其中包括：抗反馈抑制的hom基因和lysC基因(Reinscheid D J,Eikmanns B J,Sahm H.Analysis of a Corynebacterium glutami本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶编码基因的强化表达在提高棒状杆菌属细菌的苏氨酸产量或构建生产苏氨酸的棒状杆菌属细菌中的应用；所述强化表达通过将磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶编码基因的起始密码子上游20～30bp片段替换为强启动子实现。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述强化表达通过将磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶编码基因的起始密码子上游27bp片段替换为强启动子实现；优选地，所述强启动子为Ptuf。3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1或2所示。4.一种重组微生物，其特征在于，所述重组微生物中，磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶编码基因的起始密码子上游20～30bp片段被替换为强启动子；优选地，所述重组微生物中，磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶编码基因的起始密码子上游27bp片段被替换为强启动子；更优选地，所述强启动子为Ptuf。5.根据权利要求4所述的重组微生物，其特征在于，所述重组微生物的磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1或2所示。6.根据权利要求4或5所述的重组微生物，其特征在于，所述重组微生物中，以下(1)～(7)中的任意一个或多个酶的酶活性被增强和/或解除反馈抑制：(1)天冬氨酸激酶；(2)天冬氨酸半醛脱氢酶；(3)高丝氨酸脱氢酶；(...

【专利技术属性】
技术研发人员：康培，吴涛，宫卫波，何君，李岩，
申请(专利权)人：廊坊梅花生物技术开发有限公司，
类型：发明
国别省市：