一种靶向PSME3基因的siRNA及其应用制造技术

本发明专利技术属于基因靶向药物技术领域，具体涉及一种靶向PSME3基因的siRNA及其应用。siRNA选自siRNA1或siRNA2，其中，siRNA1的正义链和反义链分别如SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示；siRNA2的正义链和反义链分别如SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4所示。该siRNA既可以靶向人的PSME3基因，也可以靶向小鼠的PSME3基因，从而可以有效降低癌细胞中PSME3基因的mRNA水平，进而有效降低癌细胞中PSME3基因的蛋白表达水平，达到有效抑制癌细胞的增殖和阻滞癌细胞生长周期的目的。长周期的目的。长周期的目的。

【技术实现步骤摘要】
一种靶向PSME3基因的siRNA及其应用


[0001]本专利技术属于基因靶向药物
，具体涉及一种靶向PSME3基因的siRNA及其应用。

技术介绍

[0002]PSME3，又名REGγ、11Sγ、PA28γ、PSME3或Ki(GeneID：10197)，是11S蛋白酶体激活因子家族成员之一，其可以通过与20S核心颗粒的α亚基结合，将底物蛋白送入20S的β亚基蛋白酶催化位点处，将底物蛋白降解。PSME3
‑
20S蛋白质降解系统可以通过降解一些具有重要生物学功能的蛋白质来调控生理反应，从而引发疾病，尤其是癌症。
[0003]近年来，有研究发现PSME3可以通过降解p21、p16、p19及p14等细胞周期素依赖激酶抑制因子来调控细胞周期和细胞凋亡，这些细胞周期素抑制因子的缺失可以诱导正常细胞转变为癌细胞，从而导致癌症的发生。同时，PSME3还可以通过与p53(p53是一个肿瘤抑制因子，可以加速细胞凋亡和抑制肿瘤发生)和MDM2的结合，促进p53的泛素化降解，从而促进肿瘤发展；此外，对人及小鼠的肿瘤组织中PSME3表达水平的研究发现，PSME3在肺癌、结肠癌、甲状腺癌及肝癌中均有较高水平的表达，这些发现印证了PSME3与癌症之间存在的重要联系，使PSME3成为了一个潜在的癌症标签。此外，PSME3还可以通过降解GSK3β(GSK3β是一种丝氨酸/苏氨酸激酶，除调控糖原合成外，还具有调控众多信号蛋白和转录因子的功能，调控细胞分化、增殖、存活及凋亡，对癌症的发生具有一定的抑制作用)，上调β/>‑
catenin的表达水平，促进Wnt/β
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catenin信号通路下游靶基因CyclinD1和c
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Myc的表达，从而促进皮肤癌的发生。以上结果皆表明，PSME3在细胞活动和人类疾病中发挥着非常重要的调控作用，是一个癌症或其他疾病诊断和治疗的潜在靶点。
[0004]因此，研发一种可以基于PSME3基因靶点增加PSME3靶点实际应用的途径是有必要的。

技术实现思路

[0005]针对以上问题，本专利技术目的之一在于提供一种靶向PSME3基因的siRNA，该siRNA既可以靶向人的PSME3基因，也可以靶向小鼠的PSME3基因，从而有效抑制PSME3基因的表达，进而抑制癌细胞的增殖和阻滞癌细胞生长周期。
[0006]为了达到上述目的，本专利技术可以采用以下技术方案：
[0007]本专利技术一方面提供一种靶向PSME3基因的siRNA，其选自siRNA1或siRNA2，其中，siRNA1的正义链和反义链分别如SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示；siRNA2的正义链和反义链分别如SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4所示。
[0008]本专利技术另一方面提供一种靶向PSME3基因的核酸分子，由上述靶向PSME3基因的siRNA经过化学修饰得到。
[0009]本专利技术另一方面提供一种重组表达载体，其特征在于，包括上述的靶向PSME3基因的siRNA或上述的靶向PSME3基因的核酸分子。
[0010]本专利技术再一方面提供一种用于抑制PSME3基因表达的组合物，包括上述的靶向PSME3基因的siRNA或上述的靶向PSME3基因的核酸分子或上述的重组表达载体。
[0011]本专利技术再一方面提供一种用于抑制PSME3基因表达的制剂，包括上述的靶向PSME3基因的siRNA或上述的靶向PSME3基因的核酸分子或上述的靶向PSME3基因的核酸分子或上述的重组表达载体或上述的用于抑制PSME3基因表达的组合物；和可药用载体。
[0012]本专利技术再一方面提供一种上述的靶向PSME3基因的siRNA或上述的靶向PSME3基因的核酸分子或上述的靶向PSME3基因的核酸分子或上述的重组表达载体或上述的用于抑制PSME3基因表达的组合物在制备PSME3基因表达抑制剂中的应用。
[0013]本专利技术再一方面提供一种上述的靶向PSME3基因的siRNA或上述的靶向PSME3基因的核酸分子或上述的重组表达载体或上述的用于抑制PSME3基因表达的组合物在制备用于治疗由PSME3基因异常表达引发疾病的药物中的应用。
[0014]本专利技术有益效果至少包括：本专利技术提供的siRNA，该siRNA既可以靶向人的PSME3基因，也可以靶向小鼠的PSME3基因，从而可以有效降低癌细胞中PSME3基因的mRNA水平，进而可以有效降低癌细胞中PSME3基因的蛋白表达水平，达到有效抑制癌细胞的增殖和阻滞癌细胞生长周期的目的。
附图说明
[0015]图1为PSME3
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496转染小鼠的肝癌细胞系Hepa1
‑
6细胞增殖情况；
[0016]图2为流式细胞术检测PSME3
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496转染小鼠的肝癌细胞系Hepa1
‑
6细胞周期情况；
[0017]图3为PSME3
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496转染小鼠的肝癌细胞系Hepa1
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6细胞周期柱状图；
[0018]图4为PSME3
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223和PSME3
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496分别转染小鼠的肝癌细胞系Hepa1
‑
6后的PSME3的mRNA表达水平；
[0019]图5为PSME3
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223和PSME3
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496分别转染人的肝癌细胞系HepG2后的PSME3的mRNA表达水平；
[0020]图6为PSME3
‑
223和PSME3
‑
496分别siRNAs转染小鼠的肝癌细胞系Hepa1
‑
6后的PSME3的蛋白表达水平。
具体实施方式
[0021]所举实施例是为了更好地对本专利技术进行说明，但并不是本专利技术的内容仅局限于所举实施例。所以熟悉本领域的技术人员根据上述
技术实现思路
对实施方案进行非本质的改进和调整，仍属于本专利技术的保护范围。
[0022]本文中使用的术语仅用于描述特定实施例，并且无意于限制本公开。除非在上下文中具有明显不同的含义，否则单数形式的表达包括复数形式的表达。如本文所使用的，应当理解，诸如“包括”、“具有”、“包含”之类的术语旨在指示特征、数字、操作、元件、材料或组合的存在。在说明书中公开了本专利技术的术语，并且不旨在排除可能存在或可以添加一个或多个其他特征、数字、操作、元件、材料或其组合的可能性。如在此使用的，根据情况，“/”可以被解释为“和”或“或”。
[0023]本专利技术实施例提供一种靶向PSME3基因的siRNA，其选自siRNA1或siRNA2，其中，siRNA1的正义链和反义链分别如SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示；siRNA2的正义链和反义
链分别如SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4所示。本专利技术中的siRNA1(以下也称PSME3
‑
223)或siRNA2(以下也本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种靶向PSME3基因的siRNA，其特征在于，选自siRNA1或siRNA2，其中，siRNA1的正义链和反义链分别如SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示；siRNA2的正义链和反义链分别如SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4所示。2.一种靶向PSME3基因的核酸分子，其特征在于，由权利要求1所述的靶向PSME3基因的siRNA经过化学修饰得到。3.重组表达载体，其特征在于，包括权利要求1所述的靶向PSME3基因的siRNA或权利要求2所述的靶向PSME3基因的核酸分子。4.用于抑制PSME3基因表达的组合物，其特征在于，包括权利要求1所述的靶向PSME3基因的siRNA或权利要求2所述的靶向PSME3基因的核酸分子或权利要求3所述的重组表达载体。5.用于抑制PSME3基因表达的制剂，其特征在于，包括权利要求1所述的靶向PSME3基因的siRNA或权利要求2所述的靶向...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡超，陈雪，胡杰，叶美希，王熙瑞，胡玲，
申请(专利权)人：重庆医科大学，
类型：发明
国别省市：