【技术实现步骤摘要】
一种低毒性的脂溶性纳米粒组合物及其制备方法和应用
[0001]本专利技术属于生物医药领域,涉及一种低毒性的脂溶性纳米粒组合物及其制备方法和应用。
技术介绍
[0002]基因疗法是通过基因转移技术将外源基因导入受体细胞以治疗由基因缺陷引起的疾病。由于外源基因易被细胞内的生物酶消化降解,导致其编码蛋白的表达水平降低,影响基因治疗的效果。基因载体在基因治疗过程中可以有效地保护基因药物,是基因治疗的关键。基因载体主要分为病毒载体和非病毒载体两大类。病毒载体的转染效率高,但是由于其载体是活病毒,存在免疫原性高、毒性大、限制携带基因数量等缺陷,生产其可控性差、安全性存疑,导致其在生物领域中的应用受到一定的限制。患者接受以病毒为载体的基因药物治疗后,尽管疾病症状有所缓解,但数年后罹患癌症的情况多有发生。因此,非病毒类载体成为了研究重点。
[0003]脂溶性纳米粒作为非病毒载体,可以弥补病毒载体的上述缺陷。不仅如此,脂溶性纳米粒还具有制备简单、易于表面修饰、易于大量生产等优势,是构建基因载体的理想材料。纳米技术在基因药物递送领域中具有广泛应用,引起人们的高度重视。纳米材料作为基因载体具有以下优势:1)制备简单,易于合成;2)尺寸较小,易穿过生物体的组织间隙;3)易于多功能修饰,提高生物相容性,降低机体免疫反应,达到更高的表达效率。
[0004]尽管非病毒类的载体种类较多,但总结起来其本质主要为不同类型的纳米颗粒。目前针对纳米颗粒仍存在一系列的问题:1)需要特殊的材料,且价格昂贵,仅有少数材料能够实现稳定的基因递送,且 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种脂溶性纳米颗粒,其特征在于,所述脂溶性纳米颗粒包括表面活性剂和/或功能性分子修饰材料;优选地,所述表面活性剂包括磷脂;优选地,所述磷脂包括天然磷脂、半合成磷脂或合成磷脂中的一种或多种;优选地,所述天然磷脂包括大豆磷脂、蛋黄磷脂、二山嵛酰磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二油酰磷脂酰胆碱、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱、二反式油酰磷脂酰胆碱、二月桂酰磷脂酰胆碱、1
‑
棕榈酰
‑2‑
油酰磷脂酰胆碱、单棕榈酰磷脂酰胆碱、单硬酯酰胆碱、蛋黄脂酰磷脂酰乙醇胺、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺、二棕榈酰磷脂酰乙醇胺、二油酰磷脂酰乙醇胺、二肉豆蔻酰磷脂酰乙醇胺、蛋黄磷脂酰甘油、大豆磷脂酰甘油、二硬脂酰磷脂酰甘油、二棕榈酰磷脂酰甘油、二油酰磷脂酰甘油、二肉豆蔻酰磷脂酰甘油、大豆磷脂酰丝氨酸、二硬脂酰磷脂酰丝氨酸、二棕榈酰磷脂酰丝氨酸、二油酰磷脂酰丝氨酸、二肉豆蔻酰磷脂酰丝氨酸、蛋黄鞘磷脂、二硬脂酰鞘磷脂、二棕榈酰鞘磷脂、大豆磷脂酰肌醇、二棕榈酰磷脂酰肌醇、二油酰磷脂酰肌醇、大豆磷脂酸、蛋黄磷脂酸、二肉豆蔻酰磷脂酸或二棕榈酰磷脂酸;优选地,所述半合成磷脂包括氢化磷脂;优选地,所述合成磷脂包括DEPC、DOPC、DPPC、DSPC或DMPC;优选地,所述磷脂的用量选自70%~99%;优选地,所述磷脂的用量选自80%~90%;优选地,所述功能性分子修饰材料包括蛋白、核酸、化合物中的一种或多种;优选地,所述蛋白包括胆固醇
‑
PEG
‑
转铁蛋白、DSPE
‑
PEG
‑
转铁蛋白、植物凝集素、穿膜肽中的一种或多种;优选地,所述蛋白为胆固醇
‑
PEG
‑
转铁蛋白;优选地,所述胆固醇
‑
PEG
‑
转铁蛋白包括胆固醇
‑
PEG2k
‑
转铁蛋白、胆固醇
‑
PEG3k
‑
转铁蛋白、胆固醇
‑
PEG4k
‑
转铁蛋白、胆固醇
‑
PEG5k
‑
转铁蛋白中的一种或多种;优选地,所述胆固醇
‑
PEG
‑
转铁蛋白为胆固醇
‑
PEG2k
‑
转铁蛋白;优选地,所述胆固醇
‑
PEG2k
‑
转铁蛋白的用量选自1%~30%;优选地,所述胆固醇
‑
PEG2k
‑
转铁蛋白的用量选自10%~20%;优选地,所述核酸包括转铁蛋白核酸适配体;优选地,所述脂溶性纳米颗粒还包括有机溶剂和水;优选地,所述有机溶剂包括甲醇、乙醇、己二醇、丙二醇、二丙二醇、丙三醇、乙腈、丁酮、1,1,1
‑
三氟乙烷、六氟异丙醇、乙酸乙酯、四氯化碳、丁醇、二丁基醚、二乙基醚、环己胺、二氯甲烷、己烷、乙酸丁酯、二异丙基醚、苯、二戊醚、氯仿、庚烷、四氯乙烯、甲苯、十六烷、二甲基甲酰胺、N
‑
甲基吡咯烷酮、二甲基乙酰胺、四氢呋喃、甘油、二氧杂环乙烷中的一种或多种;优选地,所述有机溶剂为乙醇。2.一种脂溶性纳米粒组合物,其特征在于,所述脂溶性纳米粒组合物包括权利要求1所述的脂溶性纳米颗粒和药物;优选地,所述药物包括基因药物、化学药物;优选地,所述药物为基因药物;
优选地,所述基因药物包括DNA、RNA药物;优选地,所述DNA药物包括双链DNA、单链DNA药物;所述RNA药物包括双链RNA、单链RNA药物;优选地,所述双链DNA包括质粒;优选地,所述单链DNA包括DNA核酸适配体;优选地,所述单链RNA包括RNA核酸适配体、mRNA、ncRNA或反义寡核苷酸ASO;优选地,所述ncRNA包括miRNA、siRNA、shRNA、saRNA、sgRNA、piRNA、lncRNA、circRNA或其他调控性RNA;优选地,所述基因药物包括质粒药物或mRNA药物;优选地,所述质粒药物包括质粒、编码标签蛋白的基因序列和/或目的基因;优选地,所述mRNA药物包括mRNA和/或编码标签蛋白的基因序列;优选地,所述质粒包括pQE
‑
12、pUC
‑
系列、pBluescript、pET
‑
系列表达载体、pCRTOPO、pJOE、pBACKBONE、pBBR1
‑
MCS系列、pJB861、pBSMuL、pBC2、pUCPKS、pTACT1、pTRE、pCAL
‑
n
‑
EK、pESP
‑
1、pOP13CAT、E
‑
027pCAG Kosak
‑
Cherry载体系统、pREP、pCEP4、pMC1neo、pXT1、pSG5、EBO
‑
pSV2neo、pBPV
‑
1、pdBPVMMTneo、pRSVgpt、pRSVneo、pSV2
‑
dhfr、pIZD35、Okayama
‑
Berg cDNA表达载体pcDV1、pRc/CMV、pcDNA1、pcDNA3、pSPORT1、pGEMHE、pLXIN、pSIR、pIRES
‑
EGFP、pEAK
‑
10、pTriEx
‑
Hygro、pCINeo、pUC19、pMB1、pSC101、pBEU1、pBEU2、pDF41、pDF42、pBR322、ptdTomato
‑
N1或pcDNA3.1;优选地,所述质粒为ptdTomato
‑
N1或pCDNA3.1;优选地,所述标签包括荧光蛋白;优选地,所述荧光蛋白包括GFP、EGFP、mFruit蛋白、DsRed系列荧光蛋白、OFP、YFP中的一种或多种;优选地,所述荧光蛋白包括GFP或EGFP;优选地,所述目的基因包括WT1、MUC1、LMP2、EGFRvIII、Her2、p53、NY
‑
ESO
‑
1、PSMA、GD2、CEA、gp100、PR1、PSA、hTERT、EphA2、PAP、ML
‑
IAP、AFP、EpCAM、ERG、NA17、PAX3、MYCN、RhoC、TRP
‑
2、GD3、间皮素、PSCA、CYP1B1、PLAC1、GM3、BORIS、GloboH、ETV6
‑
...
【专利技术属性】
技术研发人员:申辽,全东琴,王永安,杨军,骆媛,隋昕,
申请(专利权)人:中国人民解放军军事科学院军事医学研究院,
类型:发明
国别省市:
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。