一种温敏载药核壳纳米颗粒的制备及应用制造技术

利用带负电的酪蛋白酸钠（CN）在酸性条件下自聚集形成的纳米团聚体为核，带正电的温敏性羟丁基壳寡糖（HBCOS）通过静电相互作用吸附在CN核表面并利用安全的交联剂京尼平进行共价交联，制备稳定的具有温敏性的CN

【技术实现步骤摘要】
一种温敏载药核壳纳米颗粒的制备及应用


[0001]本专利技术属于生物化学领域，具体涉及温度敏感的药物递送载体的制备。

技术介绍

[0002]癌症在世界各国均是导致死亡的主要原因，也是缩短预期寿命的一个重要因素。化疗是治疗癌症的重要手段，然而，化疗药物的选择性差、药物利用率低、毒副作用强。因此，针对肿瘤微环境和正常组织的差异性（如温度、pH、酶），设计具有刺激响应性特性的纳米载体提高肿瘤的选择性、增强药物在肿瘤部位的靶向积累和控制释放成为肿瘤治疗的重要手段。刺激响应性纳米载体是在特定物理化学刺激(包括温度、pH、光和离子强度)下具有可控收缩或膨胀行为的材料，因其刺激响应特性使其可以在适当的时间和位置释放被包埋的药物。在各种刺激中，温度是刺激响应给药研究最广泛的刺激之一，因为温度刺激可以由内源或远程控制的热变化诱导。
[0003]许多合成的温度响应材料包括聚(N
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异丙基丙烯酰胺)、聚(N,N
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二乙基丙烯酰胺)和聚(环氧乙烷)等被开发出来应用于生物医学领域。但是这些合成类聚合物的生物相容性或可生物降解性差，制约了其应用。天然产物衍生出来聚合物如羟丁基壳聚糖、羟丁基壳寡糖和羟丙基纤维素也具有温度响应特性，同时具有良好的生物相容性和生物可降解性。然而，这些材料的温敏性都具有浓度依赖性，在低浓度下其温度响应临界点上升或者温度响应特性消失，因此主要应用于智能窗户、重金属清除、伤口敷料、水污染治理等方面。而聚合物在生物医药领域的应用过程中，势必会经由各种途径而导致浓度被稀释，导致其温敏作用减弱甚至消失。因此，被用于药物递送的载体必须具有稀释稳定性，浓度依赖型的温敏响应聚合物在药物递送应用中受限。

技术实现思路

[0004]解决浓度依赖型的温敏响应聚合物在药物递送应用中的不足。
[0005]我们利用带负电的酪蛋白酸钠（CN）在酸性条件下自聚集形成的纳米团聚体为核，带正电的温敏性羟丁基壳寡糖（HBCOS）通过静电相互作用吸附在CN核表面并利用安全的交联剂京尼平进行共价交联，制备稳定的具有温敏性的CN
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HBCOS核壳纳米材料。可用于包埋DOX等抗肿瘤药物，实现载药纳米颗粒的温敏控制释放，治疗癌症。
[0006]具体的，本专利技术提供以下技术方案。
[0007]本专利技术的第一个方面提供酪蛋白酸钠
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羟丁基壳寡糖核壳纳米颗粒的制备方法，所述的方法为：1）将CN溶于超纯水得到CN溶液，调pH，得到CN纳米聚集体（即核）的溶液；2）将HBCOS滴入步骤1）中的核溶液中，调节二者重量比，得到CN
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HBCOS核壳纳米颗粒；3）加入京尼平交联，调pH后透析，然后冷冻干燥得到交联后的核壳纳米颗粒。
[0008]在一个具体的实施方式中，其中步骤1）中的CN浓度为0.5~1.5mg.mL，调节pH为5.5
~6.5；优选的，CN浓度为1mg/mL，pH为5.9。
[0009]在另外一个具体的实施例中，其中步骤2）中的HBCOS的浓度为30~50mg/mL，pH为5.5~6.5，CN与HBCOS的重量比例为1:0.275
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0.375；优选的，其中HBCOS的浓度为40mg/mL，pH为5.9，CN与HBCOS的比例为1:0.375。
[0010]在另外一个具体的实施例中，其中步骤3）加入京尼平的浓度为0.03~0.08mg/mL，反应温度为35~40℃，pH为6.5~7.5；透析分子量为截留为8000~12000Da，透析时间为24~72h；优选的，京尼平的浓度为0.05 mg/mL，反应温度为37℃，pH为7.0，透析截留分子量为10000Da，透析时间为48h。
[0011]本专利技术的第二个方面提供载药酪蛋白酸钠
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羟丁基壳寡糖核壳纳米颗粒的制备方法：1）将第一方面制备获得的CN
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HBCOS核壳纳米颗粒用超纯水复溶，调节pH后，加入药物，避光条件下摇晃，然后用超纯水透析，根据监测结果更换透析液；2）透析结束后将透析袋里的样品冻干，得到载药核壳纳米颗粒。
[0012]在一个具体的实施例中，步骤1）中所述的CN
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HBCOS核壳纳米颗粒用超纯水复溶后的浓度为0.5~1.5 mg/mL，调节pH值7.0~7.8，避光摇晃时间为10~15h，透析截留分子量为8000~12000Da；优选的，所述CN
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HBCOS核壳纳米颗粒复溶后的浓度为1mg/mL，避光摇晃时间为12h，调节pH值为7.4，截留分子量为10000Da。
[0013]在另外一个具体的实施例中，所述的药物为化学药物，优选为治疗癌症的化疗药物，更优选的为DOX；更优选的，所述的药物的终浓度为0.08~0.12mg/mL，优选为0.1mg/mL本专利技术的第三个方面是提供第一方面所述的方法制备获得的核壳纳米颗粒。
[0014]本专利技术的第四个方面是提供本专利技术第二个方面所述的方法制备获得的载药的核壳纳米颗粒。
[0015]本专利技术的第五个方面是提供本专利技术第一个方面所述的方法或第三方面所述的核壳纳米颗粒在制备治疗疾病的药物中的应用；优选的，所述的治疗为治疗癌症，所述的药物还包含药学上可接受的载体。
[0016]本专利技术的第六个方面是提供本专利技术第二个方面所述的方法或第三方面所述的载药核壳纳米颗粒在制备治疗疾病的药物中的应用；优选的，所述的治疗为治疗癌症，所述的药物还包含药学上可接受的载体。
[0017]本专利技术的有益效果为：利用带负电的酪蛋白酸钠（CN）在酸性条件下自聚集形成的纳米团聚体为核，带正电的温敏性羟丁基壳寡糖（HBCOS）通过静电相互作用吸附在CN核表面并利用安全的交联剂京尼平进行共价交联，制备稳定的具有温敏性的CN
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HBCOS核壳纳米材料；可用于包埋DOX等抗肿瘤药物，实现载药纳米颗粒的温敏控制释放，治疗癌症。
附图说明
[0018]图1 核壳纳米颗粒的温敏性：A,不同CN与HBCOS的比例形成的核壳纳米颗粒在37℃和42℃下的粒径变化；B，TEM检测粒径。
[0019]图2核壳纳米颗粒的稀释稳定性。
[0020]图3 核壳纳米颗粒的血液稳定性：A，血清吸附粒径检测；B,溶血试验评价核壳纳
米颗粒。
[0021]图4 载DOX核壳纳米颗粒的响应释放。
[0022]图5 载DOX核壳纳米颗粒的抗癌活性：A, 未载药的核壳纳米颗粒对于细胞毒性；B，负载DOX的核壳纳米颗粒分别在37℃、42℃孵育24 h后细胞存活率。
具体实施方式
[0023]以下通过参考示范性实施例，本专利技术的目的和功能以及用于实现这些目的和功能的方法将得以阐明。然而，本专利技术并不受限于以下所公开的示范性实施例；可以通过不同形式来对其加以实现。说明书的实质仅仅是帮助相关领域技术人员综合理解本专利技术的具体细节。
[0024]实施例1酪蛋白酸钠
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羟丁基壳寡糖本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种酪蛋白酸钠CN
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羟丁基壳寡糖HBCOS核壳纳米颗粒的制备方法，所述的方法为：1）将CN溶于超纯水得到CN溶液，调pH，得到CN纳米聚集体（即核）的溶液；2）将HBCOS滴入步骤1）中的核溶液中，调节二者重量比，得到CN
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HBCOS核壳纳米颗粒；3）加入京尼平交联，调pH后透析，然后冷冻干燥得到交联后的核壳纳米颗粒。2.根据权利要求1所述的方法，其中步骤1）中的CN浓度为0.5~1.5mg.mL，调节pH为5.5~6.5。3.根据权利要求1或2所述的方法，其中步骤2）中的HBCOS的浓度为30~50mg/mL，pH为5.5~6.5，CN与HBCOS的比例为1:0.275
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0.375。4.根据权利要求3所述的方法，其中步骤3）加入京尼平的浓度为0.03~0.08mg/mL，反应温度为35~40℃，pH为6.5~7.5。5.一种载药酪蛋白酸钠
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羟丁基壳寡糖核壳纳米颗粒的制备方法：1）将权利要求1
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4任一项所述的方法制备获得...

【专利技术属性】
技术研发人员：任发政，陈冲，张伟博，王鹏杰，李依璇，刘思源，申月敏，张炎，
申请(专利权)人：中国农业大学，
类型：发明
国别省市：