一种用于包载蛋白药物的聚合物，由其制成的氧化还原响应性纳米粒及其应用制造技术

本申请提供一种用于包载蛋白药物的聚合物，由其制成的氧化还原响应性纳米粒及其应用。所述聚合物的结构如以下通式I所示。通过用所述聚合物包载蛋白药物可制备包载蛋白药物的纳米粒。所述纳米粒可高效负载蛋白药物，在肿瘤的氧化还原微环境中发生解组装，释放药物，从而为蛋白药物的靶向递送提供了新的技术手段。手段。手段。手段。

【技术实现步骤摘要】
一种用于包载蛋白药物的聚合物，由其制成的氧化还原响应性纳米粒及其应用


[0001]本公开属于生物医药领域，更具体而言，涉及一种用于包载蛋白药物的聚合物，及由其制成的氧化还原响应性纳米粒及其应用。

技术介绍

[0002]恶性肿瘤是严重危害我国居民生命健康的一种重大疾病。传统的化疗易引起耐药和严重不良反应，亟需寻找肿瘤治疗新策略和新技术。免疫治疗为临床肿瘤的治疗带来了革新，免疫检查点阻断疗法和细胞因子疗法等显著提高了部分患者的临床获益。蛋白药物，如免疫检查点抗体、细胞因子等被广泛用于免疫治疗，但蛋白药物稳定性差，易与正常组织中的靶标特异性结合，从而引起严重的不良反应，影响治疗疗程和疗效。因此，开发蛋白药物肿瘤特异性递送新技术仍十分迫切。
[0003]肿瘤组织具有炎症微环境，存在氧化应激压力，在肿瘤微环境中具有高浓度的活性氧(ROS)；同时，肿瘤细胞由于代谢异常，产生大量还原性谷胱甘肽(GSH)，造成了肿瘤独特的氧化还原微环境。这种特性导致了对氧化和还原敏感的物质可以在肿瘤微环境中发生相应的化学反应，产生响应性的变性、裂解等过程。构建氧化还原响应性纳米粒递送蛋白药物，可提高蛋白药物的肿瘤特异性递送，实现肿瘤微环境响应释药，屏蔽蛋白药物与正常组织的相互作用，减少不良反应，进而提高对多种肿瘤的治疗效果。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是克服现有肿瘤传统药物治疗的不足，提供一种用于肿瘤 (如结直肠癌、黑色素瘤、乳腺癌和肝癌)靶向治疗的载药系统。传统药物往往存在着低靶向性，高副作用，影响正常细胞组织的问题。本申请专利技术人发现，硼酸酯被氧化后会发生化学键断裂，能够在肿瘤微环境的高ROS条件下实现响应；二硫键和还原性GSH中的巯基进行交换，能够在肿瘤细胞内高GSH条件下实现响应。通过将硼酸酯和二硫键两种化学结构引入聚合物载体中，构建了氧化还原响应性纳米粒递送蛋白药物。通过合成氧化还原响应性高分子聚合物，包载蛋白药物制备纳米粒，从而达到在肿瘤部位富集并释放蛋白药物的目的。
[0005]本专利技术的另一目的是提供采用上述载药系统构建的氧化还原响应性纳米粒。
[0006]本专利技术的再一目的是提供上述氧化还原响应性纳米粒在制备抗肿瘤药物中的用途。
[0007]为实现上述目的，一方面，本专利技术提供一种聚合物，其结构如以下通式 I所示：
[0008][0009]在以上通式I中，n＝45～340，L选自
‑
CH2‑
CH2‑
或
‑
CH2‑
CH2‑
CONH(CH2)5‑
， R1为氢或羟基，表示或
[0010]另一方面，本专利技术提供一种制备上述聚合物的方法，所述方法包括以下步骤：
[0011](1)在有机弱碱的存在下，使CH3O
‑
PEG
‑
NH2与3
‑
(2
‑
吡啶二硫代) 丙酸N
‑
羟基琥珀酰亚胺酯(SPDP)或琥珀酰亚胺
‑
6(3
‑
[2
‑
吡啶基二硫代]‑
丙酰氨基)已酸酯(LC
‑
SPDP)在有机溶剂中，反应制得PEG
‑
SPDP/LC
‑
SPDP；
[0012](2)使步骤(1)中制得的PEG
‑
SPDP/LC
‑
SPDP与4
‑
巯基苯硼酸(PBA) 在有机溶剂中反应，得到产物PEG
‑
SPDP/LC
‑
SPDP
‑
PBA；
[0013](3)使步骤(2)中制得的PEG
‑
SPDP/LC
‑
SPDP
‑
PBA与表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)或其类似物在有机溶剂中反应制得所述聚合物，其中，所述EGCG的类似物包括表儿茶素没食子酸酯(ECG)或没食子儿茶素没食子酸酯(GCG)。
[0014]在具体实施方式中，步骤(1)、(2)、(3)中的有机溶剂各自独立地选自氯仿、甲醇、乙醇和丙酮。
[0015]在具体实施方式中，在步骤(1)中，CH3O
‑
PEG
‑
NH2的分子量范围为 2000～15000Da，例如5000Da。
[0016]在具体实施方式中，在步骤(1)中，CH3O
‑
PEG
‑
NH2∶SPDP/LC
‑
SPDP 的质量比为(10～20)∶1；
[0017]在步骤(2)中，PEG
‑
SPDP/LC
‑
SPDP∶PBA的质量比为(15～45)∶1；
[0018]在步骤(3)中，PEG
‑
SPDP/LC
‑
SPDP
‑
PBA∶EGCG或其类似物的质量比为(1～16)∶1。
[0019]在具体实施方式中，在步骤(1)中，所述有机弱碱可选自三乙胺、环己胺和苯胺。
[0020]在具体实施方式中，在步骤(1)中，所述有机弱碱相对于SPDP/LC
‑
SPDP 的用量可为0.5
‑
50μL/1mg SPDP/LC
‑
SPDP。
[0021]在具体实施方式中，步骤(1)的反应温度为室温，反应时间为4～8小时；
[0022]步骤(2)的反应温度为室温，反应时间为4～8小时；
[0023]步骤(3)的反应温度为30
‑
40℃，优选在37℃下孵育过夜。
[0024]在具体实施方式中，在步骤(2)中，将PEG
‑
SPDP/LC
‑
SPDP和PBA分别溶于有机溶剂中，将PBA溶液缓慢加入PEG
‑
SPDP/LC
‑
SPDP溶液，搅拌反应。
[0025]在具体实施方式中，在步骤(1)和(2)之后，分别包括去除有机溶剂的操作。例如在步骤(1)中，在20～60℃下旋蒸除去有机溶剂，产生的固体在20～60℃烘箱中放置0.5～4小时烘干；例如在步骤(2)中，室温下旋蒸除去有机溶剂，用乙醚或甲叔醚多次洗涤析出的固体直至黄色基本褪去，除去上清，固体在20～60℃烘箱中放置0.5～4小时烘干。
[0026]另一方面，本专利技术提供一种制备包载蛋白药物的纳米粒的方法，所述方法包括：
[0027]将蛋白药物溶于去离子水中，在超声均质中加入上述聚合物在有机溶剂中的溶液，即制得所述包载蛋白药物的纳米粒。
[0028]在具体实施方式中，所述有机溶剂选自氯仿、甲醇、乙醇和丙酮。
[0029]在具体实施方式中，所述蛋白药物包括免疫检查点抗体药物(如欧狄沃 (纳武利尤单抗)和可瑞达(帕博利珠单抗))、细胞因子(如干扰素系列(IFN)和白介素系列(IL))、其本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种聚合物，其结构如以下通式I所示：在以上通式I中，n＝45～340，L选自
‑
CH2‑
CH2‑
或
‑
CH2‑
CH2‑
CONH(CH2)5‑
，R1为氢或羟基，表示2.一种制备如权利要求1所述的聚合物的方法，所述方法包括以下步骤：(1)在有机弱碱的存在下，使CH3O
‑
PEG
‑
NH2与3
‑
(2
‑
吡啶二硫代)丙酸N
‑
羟基琥珀酰亚胺酯(SPDP)或琥珀酰亚胺
‑
6(3
‑
[2
‑
吡啶基二硫代]
‑
丙酰氨基)已酸酯(LC
‑
SPDP)在有机溶剂中反应，制得PEG
‑
SPDP/LC
‑
SPDP；(2)使步骤(1)中制得的PEG
‑
SPDP/LC
‑
SPDP与4
‑
巯基苯硼酸(PBA)在有机溶剂中反应，得到产物PEG
‑
SPDP/LC
‑
SPDP
‑
PBA；(3)使步骤(2)中制得的PEG
‑
SPDP/LC
‑
SPDP
‑
PBA与表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)或其类似物在有机溶剂中反应制得所述聚合物，其中，所述EGCG的类似物包括表儿茶素没食子酸酯(ECG)或没食子儿茶素没食子酸酯(GCG)。3.根据权利要求2所述的方法，其中，步骤(1)、(2)、(3)中的有机溶剂各自独立地选自氯仿、甲醇、乙醇和丙酮。4.根据权利要求2所述的方法，其中，在步骤(1)中，CH3O
‑
PEG

【专利技术属性】
技术研发人员：李亚平，王当歌，王珏，孙祥石，
申请(专利权)人：中国科学院上海药物研究所，
类型：发明
国别省市：