一种利用新型RecA酶制备的病毒快速核酸检测试剂盒及其检测方法技术

本发明专利技术提供了一种利用新型RecA酶制备的病毒快速核酸检测试剂盒及其检测方法，通过对重组酶RecA基因进行编辑，使其表达的RecA蛋白具有更好的可溶性和重组酶活性。利用该RecA蛋白制备重组酶干粉，进一步优化重组酶干粉的配方及比例关系，并针对ASFV P72基因设计特异性引物，用于非洲猪瘟病毒的快速核酸检测，显著提高检测灵敏度，检测时间更短，从而有效避免漏检、错检，帮助预防疫情扩散。帮助预防疫情扩散。帮助预防疫情扩散。

【技术实现步骤摘要】
一种利用新型RecA酶制备的病毒快速核酸检测试剂盒及其检测方法


[0001]本专利技术属于分子诊断生物学
，涉及一种利用新型RecA酶制备的病毒快速核酸 检测试剂盒及其检测方法；尤其涉及一种针对非洲猪瘟病毒的快速核酸检测试剂盒及其检 测方法。

技术介绍

[0002]非洲猪瘟是由非洲猪瘟病毒引发家猪、野猪的一种急性、热性、高度接触性动物传染 病，所有品种和年龄的猪均能被感染，发病率和死亡率可达100％。该病具有易感染、病 发过程短、传播快、控制难、致死率高等特征，世界动物卫生组织将其列为法定报告动物 疫病，我国将其列为一类动物疫病，一旦发生将造成养殖场出现成规模的猪死亡现象，对 猪群健康和养殖场效益带来巨大损失。非洲猪瘟由于缺乏有效的免疫疫苗和治疗药物，目 前只能以防控为主，通常采取扑杀和无公害处理的措施进行防控，这给当地农牧民的经济 收入带来严重影响。
[0003][0004]非洲猪瘟病毒(ASFV)是一种DNA病毒，主要检测的方法有酶联免疫吸附法 (ELISA)，聚合链式反应试验(PCR)、和实时荧光定量PCR法、以及胶体金试纸本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种重组酶RecA基因，其特征在于，具有如序列表Seq ID NO.6所述的序列。2.一种重组酶干粉，其特征在于，含有如权利要求1所述的RecA基因表达的RecA蛋白。3.如权利要求2所述的重组酶干粉，其特征在于，还含有uvsY蛋白、ssb蛋白和Exo蛋白。4.如权利要求3所述的重组酶干粉，其特征在于，所述重组酶干粉包括20ng/μL～50ng/μL的RecA蛋白，10ng/μL～50ng/μL的uvsY蛋白，10ng/μL～50ng/μL的DNA聚合酶P，30ng/μL～100ng/μL的ssb蛋白，20ng/μL～60ng/μL的Exo蛋白。5.一种病毒核酸快速检测试剂盒，其特征在于，包含如权利要求2～4任一项所述的重组酶干粉。6.如权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，还包括引物探针组合，反应Buffer、BufferB、阴性对照和阳性对照。7.如权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述病毒为非洲猪瘟病毒，所述引物探针组合包括：(1)上游引物，其序列如序列表中Seq ID NO.1所示；(2)下游引物，其序列如序列表中Seq ID NO.2所示；(3)荧光探针序列，其序列如序列表中Seq ID NO.3所示。8.如权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，所述反...

【专利技术属性】
技术研发人员：程奇，王金辉，胡东杰，陈军，邓子新，
申请(专利权)人：浙江善测禾骑士生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：