一种高效热稳定的核糖核酸酶SiRe_0917及其编码基因和应用制造技术

本发明专利技术公开了一种高效热稳定的核糖核酸酶SiRe_0917及其编码基因和应用。本发明专利技术从嗜热古菌冰岛硫化叶菌REY15A中克隆得到核糖核酸酶基因SiRe_0918，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，其编码的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。核糖核酸酶SiRe_0917具有非常高效且专一的水解RNA活性，对DNA完全没有非特异性切割。此外，该酶来源于嗜热古菌，经检测其热稳定性好，在22～90℃范围内都具有非常好的活性。因此，核糖核酸酶SiRe_0917是一种新的热稳定性核糖核酸酶，在常温与高温条件下都具有极高的RNA水解活性，符合临床、生产以及分子克隆等领域的需求。领域的需求。领域的需求。

【技术实现步骤摘要】
一种高效热稳定的核糖核酸酶SiRe_0917及其编码基因和应用


[0001]本专利技术属于生物化工和生物
，具体涉及一种高效热稳定的核糖核酸酶SiRe_0917及其编码基因和应用。

技术介绍

[0002]核糖核酸酶(ribonuclease，RNase)指能水解RNA磷酸二酯键的酶，不同的RNase其专一性不同。目前常用的核糖核酸酶有RNaseA，RNase H以及RNase T1等。核糖核酸酶为具有球蛋白性状的一种蛋白质，溶于水、50％丙酮。此酶最适宜温度为60℃，85℃以上失去作用，最适宜的pH值为7.6。其中核糖核酸酶A(RNase A)：来源于牛胰脏，是一种内切核糖核酸酶，可特异攻击RNA上嘧啶残基的3'端，切割胞嘧啶或尿嘧啶与相邻核苷酸形成的磷酸二酯键，反应终产物是3'嘧啶核苷酸和末端带3'嘧啶核苷酸的寡核苷酸。无辅助因子及二价阳离子存在时，核糖核酸酶A的作用可以被胎盘RNA酶抑制剂(RNasin)或氧钒一核糖核苷复合物(vanadyl
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ribonuclosidecomplex，VRC)所抑制。核糖核酸酶T1本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种核糖核酸酶SiRe_0917，其特征在于，氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。2.一种编码权利要求1所述的核糖核酸酶SiRe_0917的编码基因SiRe_0917。3.根据权利要求2所述的编码基因SiRe_0917，其特征在于，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。4.一种含有权利要求2所述的编码基因SiRe_0917的重组载体。5.一种权利要求1所述的核糖核酸酶SiRe_0917的制备方法，其特征在于，将纯化的SiRe_0917经磷酸二酯酶PDE水解去除核酸化修饰，然后再次纯化获得无核酸化修饰的核糖核酸酶SiRe_0917。6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，将重组载体pSeSD
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SiRe_0917
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【专利技术属性】
技术研发人员：姚建云，王晓雪，冯旭，陈喆，
申请(专利权)人：中国科学院南海海洋研究所，
类型：发明
国别省市：