将单分子DNA连接到单个磁珠上的方法技术

技术编号:3820393 阅读:453 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
一种生物技术领域的将单分子DNA连接到单个磁珠上的方法:将DNA荧光标记,之后进行如下操作:在DNA的3’端标记生物素,5’端标记地高辛;或者在DNA的3’端标记地高辛,5’端标记生物素;将DNA置于玻璃上进行免疫反应,流水洗涤;再进行第二次免疫反应;将DNA内切酶加到磁珠周围,待DNA分子被降解后,用微枪尖逐一收集携带片段DNA的磁珠,并将其置于磁铁上;利用内切酶切割目的DNA,在连接酶作用下,将目的DNA片段与磁珠上的DNA片段连接。本发明专利技术的方法可以获得目的片段序列信息;可实现DNA的单分子测序;将纳米孔制作成阵列,与诱饵阵列配合,可提高测序通量。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种将单分子DNA连接到单个磁珠上的方法,其特征在于,包括如下步骤: 步骤一,将DNA荧光标记,之后进行如下操作:在DNA的3’端标记生物素,5’端标记地高辛;或者在DNA的3’端标记地高辛,5’端标记生物素; 步骤二,将DNA 置于表面用抗地高辛被覆的玻璃上进行免疫反应,流水洗涤;或将DNA置于表面用抗链霉生物素被覆的玻璃上进行免疫反应,流水洗涤; 步骤三,如果步骤二是地高辛-抗地高辛免疫反应,则将抗链霉生物素被覆的磁珠添加到玻璃表面,进行第二次免疫反应;如 果步骤二是生物素-抗链霉生物素免疫反应,则将抗地高辛被覆的磁珠添加到玻璃表面,进行第二次免疫反应; 步骤四,将DNA内切酶加到磁珠周围,待DNA分子被降解后,用微枪尖逐一收集携带短片段DNA的磁珠,并将其置于磁铁上; 步骤五,利 用DNA内切酶切割目的DNA,在连接酶作用下,将目的DNA片段与磁珠上的DNA片段连接。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:王志民李明
申请(专利权)人:上海交通大学
类型:发明
国别省市:31[中国|上海]

网友询问留言 已有0条评论
  • 还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。

1