【技术实现步骤摘要】
一种慢病毒质粒载体及稳定表达tRNA2_LeuTAA的细胞系的制备方法与应用
[0001]本专利技术涉及生物
,具体涉及一种慢病毒质粒载体及稳定表达tRNA2_LeuTAA的细胞系的制备方法与应用。
技术介绍
[0002]目前的医学或者生物学研究中,研究人员已经实现通过人工设计和改造,合成大量自然界不存在或未发现的生物元件、生物装置及生物系统,为探索细胞内基因调控机制提供了有效的工具。
[0003]tRNA是一种典型的非编码RNA,长度约为60
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90个核苷酸。成熟tRNA具有典型的三叶草型二级机构,由接收臂、D环、反密码环、可变臂和TΨC环构成。在细胞内tRNA通过反密码子依次识别mRNA密码子,将氨基酸递呈至延伸中的肽链。以往研究中仅认为tRNA是普遍表达的管家分子,但随着研究深入,发现tRNA具有组织、细胞特异的表达模式。tRNA异常表达可能导致疾病的发生发展,包括神经类疾病和肿瘤。在肿瘤中,tRNA可通过密码子偏好性调控RNA稳定型和翻译而调控肿瘤细胞的生物学行为;或与细胞色素C结合调 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种慢病毒质粒载体,其特征是:所述慢病毒质粒载体用于编码tRNA2_LeuTAA,所慢病毒质粒载体由骨架载体PLVX
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Puro和插入克隆位点xhoⅠ和BamHⅠ之间的序列组成,其序列如SEQ ID NO.1所示。2.一种慢病毒转移载体,其特征是:所述慢病毒转移载体的元件包括CMV增强子、CMV启动子、酶切位点、PKG启动子和Puro抗性位点。3.一种慢病毒,其特征是:所述慢病毒携载如权利要求2所述的慢病毒转移载体,所述慢病毒由慢病毒包装质粒及如权利要求2所述的慢病毒转移载体转染细胞后分离后获得。4.如权利要求3所述的一种慢病毒,其特征是:所述慢病毒包装质粒由psPAX2和addgene编号为12259的pMD2.G组成。5.一种表达tRNA2_LeuTAA的细胞系,其特征是:由如权利要求3所述的慢病毒转染所述细胞后得到表达tRNA2_LeuTAA的细胞系。6.如权利要求5所述的一种表达tRNA2_LeuTAA的细胞系,其特征是:所述细胞是真核细胞。7.如权利要求6所述的一种表达tRNA2_LeuTAA的细胞系,其特征是:所述真核细胞为哺乳动物细胞。8.如权利要求7所述的一种表达tRNA2_LeuTAA的细胞系,其特征是:所述哺乳动物细胞为PC
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