【技术实现步骤摘要】
一种生物合成普伦斯特中间体的方法
[0001]本专利技术属于生物工程
,具体涉及一种普伦斯特中间体的生物合成法。
技术介绍
[0002]普仑斯特是日本小野药业株式会社首创的世界上第一个白三烯受体拮抗剂,该药物在1995年于日本上市,随后1996年在欧洲和美国注册,其临床主要用作抗哮喘及抗过敏药,是治疗哮喘的有效药物。由于普仑斯特具有高效、低毒、左右范围广、不良反应少等诸多优点,从其上市开始就迅速占领了抗哮喘药市场,成为目前国际市场上最受关注的焦点,具有非常广阔的市场前景。其中3
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氨基
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羟基苯乙酮(3AHAP)是合成普仑斯特的关键药物中间体,在新药研究方面有很大的应用价值。
[0003]现有技术下,3
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氨基
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羟基苯乙酮可以选择对氯苯酚为原料通过酯化、Fries重排、硝化、还原反应的四步法反应获得。该途径的第二步,即在路易斯或布朗斯特酸的催化下,将酚酯重排为邻或对乙酰基苯酚。然而,由于有机溶剂的使用,如氯仿和二氯甲烷等,使得该步骤具有极高的环境污染风险。同时,反应系统中使用的催化剂,如AlCl3、BF3和TiCl4,可能会释放有毒气体,对环境产生极大危害。此外,该方法的制备过程中涉及到硝化反应及催化加氢反应,存在较大生产及安全隐患。其中,硝化反应速度快,放热量大,且硝化试剂具有强腐蚀性与强氧化性,与有机物接触能够引起燃烧或爆炸;催化加氢反应在工业规模的生产中十分危险,具有高燃爆危险特性,而传统搅拌工艺无法保证气
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【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种生物合成3
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氨基
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羟基苯乙酮的方法,其特征在于,所述方法为:以硝基苯还原酶nbzA、羟胺苯变异酶habA、葡萄糖脱氢酶GDH为催化剂并构成酶混合系统,以葡萄糖和间硝基苯乙酮3NAP为底物,合成3
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氨基
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羟基苯乙酮3AHAP;所述酶混合系统中硝基苯还原酶nbzA、羟胺苯变异酶habA、葡萄糖脱氢酶GDH的摩尔比为(1~4):(1~8):(1~32)。2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述方法的反应过程为:硝基苯还原酶nbzA催化间硝基苯乙酮3NAP生成3
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羟基氨基乙酰苯3HAAP;羟胺苯变异酶habA催化3
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羟基氨基乙酰苯3HAAP生成3
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氨基
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羟基苯乙酮3AHAP;葡萄糖脱氢酶GDH催化葡萄糖生成NADPH。3.如权利要求2所述的方法,其特征在于,所述反应体系中底物间硝基苯乙酮3NAP的浓度为2~10g/L。4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述硝基苯还原酶nbzA以硝基苯还原酶nbzA基因工程菌发酵培养的湿菌体破碎后以粗酶液形式加入,所述硝基苯还原酶nbzA基因工程菌是核苷酸序列SEQ ID NO.1所示的硝基苯还原酶nbzA基因插入重组表达载体后转入宿主菌中转化制备得到;所述羟胺苯变异酶habA以羟胺苯变异酶habA基因工程菌发酵培养的湿菌体破碎后以粗酶液形式加入,所述羟胺苯变异酶habA基因工程菌是核苷酸序列SEQ ID NO.2所示的羟胺苯变异酶habA基因插入重组表达载体后转入宿主菌中转化制备得到;所述葡萄糖脱氢酶GDH以葡萄糖脱氢酶GDH基因工程菌发酵培养的湿菌体破碎后以粗酶液形式加入,所述葡萄糖脱氢酶GDH基因工程菌是核苷酸序列SEQ ID NO.3所示的葡萄糖脱氢酶GD...
【专利技术属性】
技术研发人员:薛亚平,汤恒,朱红利,郑裕国,
申请(专利权)人:浙江工业大学,
类型:发明
国别省市:
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