抗FGFR2抗体和其使用方法技术

本文提供了与成纤维细胞生长因子受体2(FGFR2)结合的单克隆抗体和其抗原结合片段以及其使用方法和其使用方法。还包含抗体

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗FGFR2抗体和其使用方法


[0001]本专利技术涉及与成纤维细胞生长因子受体2(FGFR2)特异性结合的抗体和其抗原结合片段，以及此类抗体的抗体
‑
药物缀合物和其使用方法。
[0002]序列表
[0003]序列表的正式文本作为ASCII格式的序列表通过EFS
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Web以电子方式与本说明书同时提交，文件名为10680WO01_Sequence_Listing_ST25.TXT，创建日期为2021年10月21日，并且大小为约72千字节。包含在该ASCII格式文档中的序列表是说明书的一部分，并通过引用整体并入本文。

技术介绍

[0004]成纤维细胞生长因子(FGF)受体酪氨酸激酶(RTK)家族由成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)、FGFR2、FGFR3和FGFR4组成，并且涵盖多达18种不同FGF配体的高亲和力受体。受体是跨膜酪氨酸激酶，并且FGFR信号传导驱动下游通路，包含对细胞增殖、分化、存活和迁移至关重要的丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)和AKT通路。FGF配体与受体的结合诱导FGF:FGFR复合物的二聚化。二聚化导致受体的细胞质结构域中多个酪氨酸残基的激酶活化和自体磷酸化，以及磷酸肌醇3
‑
激酶(PI3K)
‑
AKT和MAPK细胞外信号调节激酶(ERK)通路的下游信号传导的活化。FGFR1
‑
3中的IgIII环的替代剪接产生FGFRIIIb或FGFRIIIc同种型。
[0005]在各种癌症中已报道FGFR2扩增。FGFR2扩增影响信号传导，而不改变受体的内源性激酶活性。通过过表达的FGFR2的信号传导也显示了配体非依赖性和对FGFR抑制剂敏感的证据(Lorenzi,1997,羧基末端改变对成纤维细胞生长因子受体
‑
2的配体非依赖性活化(Ligand
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independent activation of fibroblast growth factor receptor
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2by carboxyl terminal alterations),《致癌基因(Oncogene)》；Takeda,1999,AZD2171对过表达成纤维细胞生长因子受体2/角质细胞生长因子受体的胃癌显示出有效的抗肿瘤活性(AZD2171shows potent antitumor activity against gastric cancer over
‑
expressing fibroblast growth factor receptor 2/keratinocyte growth factor receptor),《临床癌症研究(Clin Cancer Research)》；Cha,2009,异常的受体内化和增强的FRS2依赖性信号传导有助于成纤维细胞生长因子受体2IIIb C3同种型的转化活性(Aberrant receptor internalization and enhanced FRS2
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dependent signaling contribute to the transforming activity of the fibroblast growth factor receptor 2IIIb C3 isoform),《生物化学杂志(J.Biol.Chem)》)。
[0006]此外，FGFR2蛋白在约3％的乳腺癌中过表达，包含三阴性乳腺癌，以及约10％的胃癌/食道癌。在其它癌症中也发现了FGFR2过表达，包含结肠癌、肝细胞癌、胰腺癌、卵巢癌、子宫癌、宫颈癌、子宫内膜癌、膀胱癌、肺癌、结肠癌、神经胶质瘤和头颈癌。另外，已经在约12％的子宫内膜癌中报道了FGFR2基因的突变。FGFR2过表达已与胃癌患者的不良存活率相关。
[0007]非常关注FGFR2作为跨肿瘤类型的治疗靶标。在携带FGFR2扩增的胃癌患者中，已
经建议使用如TAS
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120和AZD4547等小分子FGFR抑制剂进行治疗干预。
[0008]临床前研究和临床研究两者证明FGFR扩增的肿瘤对FGFR抑制敏感并且因此对治疗靶向敏感。用如贝马里妥珠单抗(Bemarituzumab)等抗FGFR2疗法(又名HGS1036、HGS 1036、FP
‑
1039、FPA144、GSK3052230)治疗FGFR2阳性肿瘤据报道导致早期存活和晚期疾病的改善。(Gemo等人(2014)“FPA144：用于治疗携带FGFR2基因扩增的胃癌患者的治疗性抗体(FPA144:A Therapeutic Antibody for Treating Patients with Gastric Cancers Bearing FGFR2 Gene Amplification)”《美国癌症研究协会(AACR)》摘要ID 5446；Powers等人(2016)“靶向FGFR2b受体的治疗性单克隆抗体FPA144可促进抗体依赖性细胞介导的细胞毒性并在4T1同系肿瘤模型中刺激对PD
‑
1的敏感性(FPA144,A Therapeutic Monoclonal Antibody Targeting the FGFR2b Receptor,Promotes Antibody Dependent Cell
‑
Mediated Cytotoxicity and Stimulates Sensitivity to PD
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1in the 4T1 Syngeneic Tumor Model)”《美国癌症研究协会》摘要ID 1407；Lee等人(2016)“ADCC增强的FGFR2b同种型选择性单克隆抗体FPA144在FGFR2b+胃癌和晚期实体瘤患者中的抗肿瘤活性和安全性(Antitumor Activity and Safety of FPA144,an ADCC
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Enhanced,FGFR2b Isoform
‑
Selective Monoclonal Antibody,in Patients with FGFR2b+Gastric Cancer and Advanced Solid Tumors)”《美国临床肿瘤学会(ASCO)》摘要ID 2502)。
[0009]一些FGFR2抗体与细胞毒性有效载荷缀合，包括钍
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227(阿普鲁他单抗(Aprutumab)，又名BAY1179470、BAY2304058)和澳瑞他汀(auristatin)(伊沙多丁阿普鲁他单抗(Aprutumab ixadotin)，又名BAY1187982、BAY1179470 ADC)。据报道，阿普鲁他单抗
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TTC(抗FGFR2抗体，与抗体共价结合的螯合剂部分，以及发射α粒子的放射性核素钍
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227)抑制几种异种移植物模型中的肿瘤生长。(W本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种与FGFR2结合的分离的单克隆抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段表现出以下特性中的一种或多种特性：(a)是完全人类单克隆抗体；(b)如通过表面等离子体共振测量的，以等于或小于2.5
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与FGFR2b结合；(c)相对于hFGFR2c而选择性地与hFGFR2b结合；以及(d)包括三个重链CDR(HCDR1、HCDR2和HCDR3)，所述三个重链CDR包含在SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:22的重链可变区(HCVR)氨基酸序列或与其至少90％相同的氨基酸序列内；以及三个轻链CDR(LCDR1、LCDR2和LCDR3)，所述三个轻链CDR包含在SEQ ID NO:10或SEQ ID NO:28的轻链可变区(LCVR)氨基酸序列或与其至少90％相同的氨基酸序列内。2.根据权利要求1所述的抗FGFR2抗体或其抗原结合片段，其包括：三个重链CDR(HCDR1、HCDR2和HCDR3)，所述三个重链CDR包含在SEQ ID NO:2的重链可变区(HCVR)氨基酸序列或与其至少90％相同的氨基酸序列内；以及三个轻链CDR(LCDR1、LCDR2和LCDR3)，所述三个轻链CDR包含在SEQ ID NO:10的轻链可变区(LCVR)氨基酸序列或与其至少90％相同的氨基酸序列内。3.根据权利要求2所述的抗FGFR2抗体或其抗原结合片段，其中所述抗FGFR2抗体或其抗原结合片段具有以下特性中的一种或多种特性：(a)是完全人类单克隆抗体；(b)如通过表面等离子体共振测量的，以等于或小于2.5
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与FGFR2b结合；(c)如通过表面等离子体共振测量的半衰期(t1/2)大于约10分钟；以及(d)相对于hFGFR2c而选择性地与hFGFR2b结合。4.根据权利要求2所述的抗FGFR2抗体或其抗原结合片段，其中HCDR1包括SEQ ID NO:4的氨基酸序列或包括两个或更少个氨基酸取代的SEQ ID NO:4的氨基酸序列；HCDR2包括SEQ ID NO:6的氨基酸序列或包括两个或更少个氨基酸取代的SEQ ID NO:6的氨基酸序列；HCDR3包括SEQ ID NO:8的氨基酸序列或包括两个或更少个氨基酸取代的SEQ ID NO:8的氨基酸序列；LCDR1包括SEQ ID NO:12的氨基酸序列或包括两个或更少个氨基酸取代的SEQ ID NO:12的氨基酸序列；LCDR2包括SEQ ID NO:14的氨基酸序列或包括两个或更少个氨基酸取代的SEQ ID NO:14的氨基酸序列；并且LCDR3包括SEQ ID NO:16的氨基酸序列或包括两个或更少个氨基酸取代的SEQ ID NO:16的氨基酸序列。5.根据权利要求2所述的抗FGFR2抗体或其抗原结合片段，其中HCDR1包括SEQ ID NO:4的氨基酸序列；HCDR2包括SEQ ID NO:6的氨基酸序列；HCDR3包括SEQ ID NO:8的氨基酸序列；LCDR1包括SEQ ID NO:12的氨基酸序列；LCDR2包括SEQ ID NO:14的氨基酸序列；并且LCDR3包括SEQ ID NO:16的氨基酸序列。6.根据权利要求2所述的抗FGFR2抗体或其抗原结合片段，其中所述抗FGFR2抗体或其抗原结合片段包括：HCVR，所述HCVR包括SEQ ID NO:2的氨基酸序列或与其至少95％相同的氨基酸序列；以及LCVR，所述LCVR包括SEQ ID NO:10的氨基酸序列或与其至少95％相同的氨基酸序列。7.根据权利要求2所述的抗FGFR2抗体或其抗原结合片段，其中所述抗FGFR2抗体或其抗原结合片段包括：HCVR，所述HCVR包括SEQ ID NO:2的氨基酸序列；以及LCVR，所述LCVR包括SEQ ID NO:10的氨基酸序列。
8.根据权利要求1所述的抗FGFR2抗体或其抗原结合片段，其包括：三个重链CDR(HCDR1、HCDR2和HCDR3)，所述三个重链CDR包含在SEQ ID NO:22的重链可变区(HCVR)氨基酸序列或与其至少90％相同的氨基酸序列内；以及三个轻链CDR(LCDR1、LCDR2和LCDR3)，所述三个轻链CDR包含在SEQ ID NO:28的轻链可变区(LCVR)氨基酸序列或与其至少90％相同的氨基酸序列内。9.根据权利要求8所述的抗FGFR2抗体或其抗原结合片段，其中所述抗FGFR2抗体或其抗原结合片段具有以下特性中的一种或多种特性：(a)是完全人类单克隆抗体；(b)如通过表面等离子体共振测量的，以等于或小于8.9
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与FGFR2b结合；(c)如通过表面等离子体共振测量的半衰期(t1/2)大于约25分钟；以及(d)相对于hFGFR2c而选择性地与hFGFR2b结合。10.根据权利要求8所述的抗FGFR2抗体或其抗原结合片段，其中HCDR1包括SEQ ID NO:24的氨基酸序列或包括两个或更少个氨基酸取代的SEQ ID NO:24的氨基酸序列；HCDR2包括SEQ ID NO:6的氨基酸序列或包括两个或更少个氨基酸取代的SEQ ID NO:6的氨基酸序列；HCDR3包括SEQ ID NO:26的氨基酸序列或包括两个或更少个氨基酸取代的SEQ ID NO:26的氨基酸序列；LCDR1包括SEQ ID NO:30的氨基酸序列或包括两个或更少个氨基酸取代的SEQ ID NO:30的氨基酸序列；LCDR2包括SEQ ID NO:32的氨基酸序列或包括两个或更少个氨基酸取代的SEQ ID NO:32的氨基酸序列；并且LCDR3包括SEQ ID NO:34的氨基酸序列或包括两个或更少个氨基酸取代的SEQ ID NO:34的氨基酸序列。11.根据权利要求8所述的抗FGFR2抗体或其抗原结合片段，其中HCDR1包括SEQ ID NO:24的氨基酸序列；HCDR2包括SEQ ID NO:6的氨基酸序列；HCDR3包括SEQ ID NO:26的氨基酸序列；LCDR1包括SEQ ID NO:30的氨基酸序列；LCDR2包括SEQ ID NO:32的氨基酸序列；并且LCDR3包括SEQ ID NO:34的氨基酸序列。12.根据权利要求8所述的抗FGFR2抗体或其抗原结合片段，其中所述抗FGFR2抗体或其抗原结合片段包括：HCVR，所述HCVR包括SEQ ID NO:22的氨基酸序列或与其至少95％相同的氨基酸序列；以及LCVR，所述LCVR包括SEQ ID NO:28的氨基酸序列或与其至少95％相同的氨基酸序列。13.根据权利要求8所述的抗FGFR2抗体或其抗原结合片段，其中所述抗FGFR2抗体或其抗原结合片段包括：HCVR，所述HCVR包括SEQ ID NO:22的氨基酸序列；以及LCVR，所述LCVR包括SEQ ID NO:28的氨基酸序列。14.一种药物组合物，其包括治疗有效量的根据权利要求1至13中任一项所述的一种或多种分离的人单克隆抗体或其抗原结合片段以及一种或多种药学上可接受的赋形剂。15.一种核酸分子，其编码根据权利要求1至13中任一项所述的与FGFR2结合的人单克隆抗体或其片段。16.一种表达载体，其包括根据权利要求15所述的编码与FGFR2结合的人单克隆抗体或其片段的核酸分子。17.一种宿主细胞，其含有根据权利要求11所述的表达载体。18.根据权利要求1至13中任一项所述的抗FGFR2抗体或其抗原结合片段，其中所述抗FGFR2抗体或其抗原结合片段与细胞毒素缀合。
19.根据权利要求18所述的抗FGFR2抗体或其抗原结合片段，其中所述抗FGFR2抗体或其抗原结合片段表现出以下特性中的一种或多种特性：(a)相对于表达hFGFR2c的细胞而选择性地对表达hFGFR2b的细胞具有细胞毒性；(b)如通过表面等离子体共振测量的，以等于或小于4.8
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与FGFR2b结合；(c)如通过表面等离子体共振测量的半衰期(t1/2)大于约7分钟；以及(d)以剂量依赖性方式诱导FGFR2b阳性肿瘤的消退。20.根据权利要求18所述的抗FGFR2抗体或其抗原结合片段，其中所述细胞毒素选自由以下组成的组：生物毒素、化疗剂和放射性同位素。21.根据权利要求20所述的抗FGFR2抗体或其抗原结合片段，其中所述细胞毒素是妥布赖森(tubulysin)、美登素类化合物(maytansinoid)或喜树碱(camptothecin)。22.根据权利要求1至13中任一项所述的抗FGFR2抗体或其抗原结合片段，其中所述抗FGFR2抗体或其抗原结合片段通过接头与细胞毒素缀合。23.根据权利要求22所述的抗FGFR2抗体或其抗原结合片段，其中所述细胞毒素是妥布赖森。24.根据权利要求23所述的抗FGFR2抗体或其抗原结合片段，其中所述抗FGFR2抗体或其抗原结合片段通过叠氮基
‑
PEG3‑
胺接头与妥布赖森缀合。25.根据权利要求23所述的抗FGFR2抗体或其抗原结合片段，其中所述妥布赖森是：26.根据权利要求25所述的抗FGFR2抗体或其抗原结合片段，其中所述抗FGFR2抗体或其抗原结合片段与
或其区域异构体缀合，其中是与重链谷氨酰胺的键。27.根据权利要求23所述的抗FGFR2抗体或其抗原结合片段，其中所述抗FGFR2抗体或其抗原结合片段通过Q295与妥布赖森缀合。28.根据权利要求27所述的抗FGFR2抗体或其抗原结合片段，其中所述抗FGFR2抗体或其抗原结合片段进一步包括通过Q297缀合的妥布赖森。29.根据权利要求23所述的抗FGFR2抗体或其抗原结合片段，其中所述妥布赖森是其中是与所述接头的键。30.根据权利要求29所述的抗FGFR2抗体或其抗原结合片段，其中所述接头包括缬氨酸
‑
瓜氨酸部分和PAB部分。31.根据权利要求29或30所述的抗FGFR2抗体或其抗原结合片段，其包括：三个重链CDR(HCDR1、HCDR2和HCDR3)，所述三个重链CDR包含在SEQ ID NO:2的HCVR氨基酸序列内；以及三个轻链CDR(LCDR1、LCDR2和LCDR3)，所述三个轻链CDR包含在SEQ ID NO:10的LCVR氨基酸序列内。32.根据权利要求29或30所述的抗FGFR2抗体或其抗原结合片段，其包括：HCDR1，所述HCDR1具有SEQ ID NO:4的氨基酸序列；HCDR2，所述HCDR2具有SEQ ID NO:6的氨基酸序列；HCDR3，所述HCDR3具有SEQ ID NO:8的氨基酸序列；LCDR1，所述LCDR1具有SEQ ID NO:12的氨基酸序列；LCDR2，所述LCDR2具有SEQ ID NO:14的氨基酸序列；以及LCDR3，所述LCDR3具有SEQ ID NO:16的氨基酸序列。33.根据权利要求29或30所述的抗FGFR2抗体或其抗原结合片段，其包括：HCVR，所述HCVR包括SEQ ID NO:2的氨基酸序列；以及LCVR，所述LCVR包括SEQ ID NO:10的氨基酸序列。34.根据权利要求29或30所述的抗FGFR2抗体或其抗原结合片段，其包括：三个重链CDR(HCDR1、HCDR2和HCDR3)，所述三个重链CDR包含在SEQ ID NO:22的HCVR氨基酸序列内；以及三个轻链CDR(LCDR1、LCDR2和LCDR3)，所述三个轻链CDR包含在SEQ ID NO:28的LCVR氨基酸序列内。35.根据权利要求29或30所述的抗FGFR2抗体或其抗原结合片段，其包括：HCDR1，所述HCDR1具有SEQ ID NO:24的氨基酸序列；HCDR2，所述HCDR2具有SEQ ID NO:6的氨基酸序列；HCDR3，所述HCDR3具有SEQ ID NO:26的氨基酸序列；LCDR1，所述LCDR1具有SEQ ID NO:30的氨基酸序列；LCDR2，所述LCDR2具有SEQ ID NO:32的氨基酸序列；以及LCDR3，所述LCDR3具有SEQ ID NO:34的氨基酸序列。
36.根据权利要求29或30所述的抗FGFR2抗体或其抗原结合片段，其包括：HCVR，所述HCVR包括SEQ ID NO:22的氨基酸序列；以及LCVR，所述LCVR包括SEQ ID NO:28的氨基酸序列。37.根据权利要求22所述的抗FGFR2抗体或其抗原结合片段，其中细胞毒性剂是美登素类化合物。38.根据权利要求37所述的抗FGFR2抗体或其抗原结合片段，其中所述美登素类化合物是其中是与所述接头的键。39.根据权利要求38所述的抗FGFR2抗体或其抗原结合片段，其中所述接头是：其中标有的键表示与所述抗体或其抗原结合片段的键并且标有的键表示与所述美登素类化合物的键。40.根据权利要求38或39所述的抗FGFR2抗体或其抗原结合片段，其包括：三个重链CDR(HCDR1、HCDR2和HCDR3)，所述三个重链CDR包含在SEQ ID NO:2的HCVR氨基酸序列内；以及三个轻链CDR(LCDR1、LCDR2和LCDR3)，所述三个轻链CDR包含在SEQ ID NO:10的LCVR氨基酸序列内。41.根据权利要求38或39所述的抗FGFR2抗体或其抗原结合片段，其包括：HCDR1，所述HCDR1具有SEQ ID NO:4的氨基酸序列；HCDR2，所述HCDR2具有SEQ ID ...

【专利技术属性】
技术研发人员：C，
申请(专利权)人：瑞泽恩制药公司，
类型：发明
国别省市：