金诺芬联合利奈唑胺抗耐药金黄色葡萄球菌的应用制造技术

本发明专利技术属于医药技术领域，公开了诺芬联合利奈唑胺抗耐药金黄色葡萄球菌的应用，本发明专利技术首次发现金诺芬提高MRSA菌对利奈唑胺敏感性，从而克服细菌耐药性的问题，进一步研究发现芬通过降低细菌SOD(超氧化物歧化酶)的活性，进而提高了细菌内ROS的水平，最终导致细菌死亡，此外金诺芬还通过降低MRSA菌生物被膜的产生，从而使细菌失去生物膜的保护，在利奈唑胺的作用下引起细菌死亡。将金诺芬与利奈唑胺联用可以显著提高利奈唑胺的杀菌作用，与现有的只用单一抗生素作为抗细菌药物相比，具有更好的效果以及更高的安全性和可操作性，具有较好的应用前景。用前景。用前景。

【技术实现步骤摘要】
金诺芬联合利奈唑胺抗耐药金黄色葡萄球菌的应用


[0001]本专利技术属于医药
，更具体地，涉及金诺芬联合利奈唑胺抗耐药金黄色葡萄球菌的应用。

技术介绍

[0002]金黄色葡萄球菌是生活在我们体内的常见细菌。很多健康人群都携带金黄色葡萄球菌而未被感染。实际上，大约有三分之一的人鼻子里都有金黄色葡萄球菌。但是一旦葡萄球菌在人体内大量繁殖聚集就会引起感染。葡萄球菌是最常见的皮肤感染原因之一。葡萄球菌通常可以用抗生素治疗。但几十年来，一些葡萄球菌菌株——如耐甲氧西林金黄色葡萄球菌——已经对曾经摧毁它的抗生素产生了耐药性。MRSA于1961年首次被发现。它现在对甲氧西林、阿莫西林、青霉素、苯唑西林和其他常见抗生素如头孢菌素具有耐药性。虽然一些抗生素仍然有效，但MRSA正在不断适应。更令人担忧的是，MRSA也出现在未住院的健康人群中。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)感染的治疗已经变得具有挑战性，因为这种病原体对几乎所有标准护理(SOC)抗生素都产生了耐药性。因此，迫切需要开发新的治疗策略来对抗这些威胁生命的MRSA感染。众所周知，MRSA能够在各种材料和表面上形成生物膜，生物膜中的细菌对抗生素和宿主防御系统表现出更高的耐药性，这往往导致持久和难以治疗的感染，这也是导致细菌耐药的主要原因之一。药物再利用是为现有或废弃药物寻找新适应症的一种有前途的方法。
[0003]金诺芬(Auranofin)为一种含金的口服抗风湿药，能减少类风湿因子及其抗体形成，抑制前列腺素合成和溶菌酶的释放，并有与免疫球蛋白补体结合的作用，阻断关节炎的发展。金诺芬用于治疗类风湿性关节炎已有30多年的历史。它已被证明对许多革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌有抗菌活性，包括金黄色葡萄球菌，艰难梭菌等。金诺芬在人体中的安全性和药代动力学特征已得到充分表征。但是，关于金诺芬能否提高利奈唑胺抗MRSA菌的活性的研究尚未见相关报道。

技术实现思路

[0004]本专利技术所要解决的技术问题是克服现有技术中存在的问题，首先提供金诺芬在制备利奈唑胺抗耐药金黄色葡萄球菌的增效剂的应用。
[0005]本专利技术的第二个目的是提供用于联合杀菌的组合物。
[0006]本专利技术的目的通过以下技术方案实现：
[0007]金诺芬在制备利奈唑胺抗耐药金黄色葡萄球菌的增效剂的应用。本专利技术发现添加金诺芬后，利奈唑胺对MRSA菌的杀菌作用明显提高。结果表明，金诺芬可以提高MRSA菌对利奈唑胺的敏感性。
[0008]本专利技术发现金诺芬通过降低细菌SOD(超氧化物歧化酶)的活性，进而提高了细菌内ROS的水平，最终导致细菌死亡。
[0009]本专利技术发现金诺芬通过减少MRSA菌生物被膜的产生，从而使细菌失去生物膜的保
护，在利奈唑胺的作用下引起细菌死亡。
[0010]优选的，上述应用中，所述耐药金黄色葡萄球菌为JE2。
[0011]优选的，上述应用中，体外杀菌时，金诺芬的浓度为0.125～0.25mg/L，利奈唑胺的浓度为4～8mg/L，耐药金黄色葡萄球菌的量为104～106CFU/mL。
[0012]本专利技术还提供用于联合杀菌的组合物，所述组合物由金诺芬和利奈唑胺组成，所述菌为耐药金黄色葡萄球菌JE2、MW2、161402、161429、161494。
[0013]优选的，体外杀菌时，金诺芬的浓度为0.125～0.25mg/L，利奈唑胺的浓度为4～8mg/L，耐药金黄色葡萄球菌的量为104～106CFU/mL。体内杀菌时，金诺芬的浓度为0.25mg/kg，利奈唑胺的浓度为50mg/kg，靶器官中耐药金黄色葡萄球菌的量为104～106CFU/g。
[0014]本专利技术还提供上述组合物在制备饲料添加剂中的应用，所述组合物用于饲料添加剂中的抗菌药。
[0015]与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：
[0016]本专利技术首次发现金诺芬提高MRSA菌对利奈唑胺敏感性，从而克服细菌耐药性的问题，进一步研究发现芬通过降低细菌SOD(超氧化物歧化酶)的活性，进而提高了细菌内ROS的水平，最终导致细菌死亡，此外金诺芬还通过降低MRSA菌生物被膜的产生，从而使细菌失去生物膜的保护，在利奈唑胺的作用下引起细菌死亡。将金诺芬与利奈唑胺联用可以显著提高利奈唑胺的杀菌作用，与现有的只用单一抗生素作为抗细菌药物相比，具有更好的效果以及更高的安全性和可操作性，具有较好的应用前景。
附图说明
[0017]图1为金诺芬与利奈唑胺单独或联合使用对MRSA菌株的体外杀菌曲线；
[0018]图2为金诺芬联合利奈唑胺对金黄色葡萄球菌JE2的生物被膜抑制实验；
[0019]图3为金诺芬和利奈唑胺对JE2成熟生物被膜形成的消除，****P<0.0001；
[0020]图4为大蜡螟在金诺芬和利奈唑胺单独给药及联合给药中的存活率；
[0021]图5为金诺芬(0.25mg/kg，口服灌胃，一天一次)和利奈唑胺(50mg/kg，口服灌胃，一天两次)单独或联合在菌ATCC 43300菌血症模型中的治疗效果，每个点代表1只小鼠菌血症模型中靶组织的载菌量，中间水平线代表靶组织菌量的平均值，上下两条水平线代表靶组织菌量的SD(n≥6)。
具体实施方式
[0022]以下将结合本专利技术实施例中的附图，进一步对本专利技术做进一步详细说明，并且所描述的内容，不会限制权利要求书中所描述的本专利技术。显然，所描述的实施例仅为关键的实施例，并非全部的实施例，内容对本领域的技术人员是易理解的。
[0023]下述实验例中所使用的试验方法如无特殊说明，均为常规方法；所使用的材料、试剂等，如无特殊说明，为可从商业途径得到的试剂和材料。
[0024]判定原则：如使用金诺芬和利奈唑胺联合降低的菌量相较于分别单独使用它们，联合组菌量下降2个对数值，即表明金诺芬与利奈唑胺具有协同杀菌作用。
[0025]实施例1测定金诺芬跟利奈唑胺对JE2菌株的MIC
[0026]1、实验材料：
[0027]试验：将经高压灭菌的CAMH肉汤冷却备用。利奈唑胺(5120μg/ml)、金诺芬10mg/ml)，
‑
20℃保存。
[0028]2、试验前的准备工作：将金黄色葡萄球菌临床菌株JE2于脑心浸液培养基上，培养至合适大小。
[0029]3、金诺芬及利奈唑胺杀菌效果评价实验：
[0030](1)受试MRSA菌株JE2接到装有10mL CAMH肉汤的50mL无菌离心管中，放入37度摇床中180rpm孵育至对数生长期取出离心管；以3000rpm离心10min收集受试MRSA的菌体后，以PBS溶液洗涤2次后重悬。使用分光光度计调整离心重悬后的菌液至OD
600
＝0.5，即1
‑5×
108CFU/mL；
[0031](2)使用CAMH肉汤将孵育后的金黄色葡萄球菌临床菌株释到100倍，约1
‑5×
106CFU/mL，备用；
[0032本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.金诺芬在制备利奈唑胺抗耐药金黄色葡萄球菌的增效剂的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述耐药金黄色葡萄球菌为JE2。3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，体外杀菌时，金诺芬的浓度为0.125～0.25mg/L，利奈唑胺的浓度为4～8mg/L，耐药金黄色葡萄球菌的量为104～106CFU/mL。4.用于联合杀菌的组合物，其特征在于，所述组合物由金诺芬和利奈唑胺组成，所述菌为耐药金黄色葡萄球菌JE2、MW2、161402、161429、161494。5....

【专利技术属性】
技术研发人员：周宇峰，牛超言，李健国，姚鑫，卢婷茵，
申请(专利权)人：华南农业大学，
类型：发明
国别省市：