LY294002在制备鲤疱疹病毒Ⅱ型的抑制剂方面的应用制造技术

本发明专利技术涉及生物技术和农业渔业领域，尤其为水产养殖病害防控技术。具体公开了LY294002能够有效抑制GiCF细胞中CyHV

【技术实现步骤摘要】
LY294002在制备鲤疱疹病毒Ⅱ型的抑制剂方面的应用


[0001]本专利技术涉及生物技术和农业渔业领域，具体为水产养殖病害防控技术。

技术介绍

[0002]鲤疱疹病毒Ⅱ型(Cyprinid herpesvirus2，CyHV
‑
2)是一种感染鲫和金鱼，诱发患病鱼类出现病毒性造血器官坏死病(Herpesviral haematopoietic necrosis,HVHN)的鱼类疱疹病毒。CyHV
‑
2是双链DNA病毒，全长约为290304bp。感染病毒的鱼类主要表现为出血：包括鳃出血、鳍基部出血、肛门出血等；细胞水肿：包括肝细胞水肿，肾小球水肿等；坏死：包括肾组织坏死等；脾含铁血黄素沉积；鳃丝上皮细胞脱落和次生板层弯曲等症状(Wen J,Xu Y,Su M,et al.Susceptibility of Goldfish to Cyprinid Herpesvirus 2(CyHV
‑
2)SH01 Isolated from Cultured Crucian Carp[J].Viruses,2021,13(9):1761.)。CyHV
‑
2具有水平传播、垂直传播、潜伏感染的特征，严重危害着鲫和金鱼养殖产业的发展。然而，目前无有效的商品化疫苗和有效的药物控制该病毒的传播，主要原因之一为其致病机制尚不明晰。
[0003]LY294002是一种抑制PI3Kα/δ/β的小分子，名称为2
‑
(4
‑
吗啉基)/>‑8‑
苯基
‑
4H
‑1‑
苯并吡喃
‑4‑
酮(又称LY
‑
294002、2
‑
吗啉
‑4‑
基
‑8‑
苯基苯并吡喃
‑4‑
酮、8
‑
苯基
‑2‑
(吗啉
‑4‑
基)色原酮、PI3K抑制剂、2
‑
吗啉代
‑8‑
苯基色酮)，CAS号为154447
‑
36
‑
6，化学式为C
19
H
17
NO3，结构式为：
[0004][0005]LY294002能够抑制PI3K/AKT信号通路，从而抑制细胞增殖或诱导细胞凋亡，可作用于肿瘤细胞，用于癌症的治疗，也可调控病毒的感染(Ebrahimi S,Hosseini M,Shahidsales S,et al.Targeting the Akt/PI3K Signaling Pathway as a Potential Therapeutic Strategy for the Treatment of Pancreatic Cancer[J].Current medicinal chemistry,2017；24(13):1321
‑
31.)。PI3K/AKT信号通路参与细胞代谢和生存、细胞周期、细胞凋亡、蛋白质合成，是病因学的一个重要的靶点(Chen J.Roles of the PI3K/Akt pathway in Epstein
‑
Barr virus
‑
induced cancers and therapeutic implications[J].World journal of virology,2012；1(6):154
‑
61.)。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于提供LY294002的应用，尤其是在防治鲤疱疹病毒Ⅱ型(CyHV
‑
2)感染中的应用，为鲫造血器官坏死病的防治提供备选方案。
[0007]LY294002能够有效抑制GiCF细胞中CyHV
‑
2病毒的感染复制，因此，可以用于防治鲤疱疹病毒Ⅱ型的感染。
[0008]本专利技术技术方案为，将LY294002用于制备鲤疱疹病毒Ⅱ型的抑制剂。
[0009]LY294002可用于制备预防或治疗鲤疱疹病毒Ⅱ型感染的药物。
[0010]LY294002可用于制备预防或治疗鱼类病毒性造血器官坏死病的药物。优选的，所述的鱼类为鲫鱼或金鱼。
[0011]因此，LY294002可用于制备渔药、鱼饲料或者鱼饲料添加剂，可抑制鲤疱疹病毒Ⅱ型的感染复制，防治鲤疱疹病毒Ⅱ型感染，或者防治鱼类病毒性造血器官坏死病。
[0012]一种预防鱼类病毒性造血器官坏死病的方法，通过在鱼饲料中添加LY294002，可预防鲤疱疹病毒Ⅱ型感染，实现预防防鱼类病毒性造血器官坏死病。
[0013]优选的，所述的鱼类为鲫鱼或金鱼。
[0014]本专利技术提供一种抑制PI3Kα/δ/β的小分子药物LY294002，该药物能有效防治CyHV
‑
2；通过在体外施用LY294002，发现该药物能够有效降低GiCF细胞中CyHV
‑
2病毒的滴度，并且呈剂量依赖关系；说明可以有效抑制CyHV
‑
2病毒在GiCF细胞中的感染复制，达到阻碍病毒复制的效果，因此LY294002可用于防治鲤疱疹病毒Ⅱ型的感染，以及用于防治鱼类病毒性造血器官坏死病药物。
[0015]本专利技术的技术方案具有以下有益效果：
[0016]本专利技术首次将LY294002应用于防治鲤疱疹病毒Ⅱ型的感染，在浓度12.5μM时就可以显著降低CyHV
‑
2病毒在细胞内的滴度，实现阻碍病毒复制的效果。
[0017]同时，LY294002施用浓度低，在常用的使用剂量下，就可以产生显著效果，对细胞毒性低，可作为防治鲤疱疹病毒Ⅱ型的候选药物，从而提供了一种防治CyHV
‑
2病毒感染及鱼类病毒性造血器官坏死病的新型方案。
附图说明
[0018]图1为LY294002处理后细胞内病毒滴度检测结果，图1A和图1B分别为不同病毒滴度的检测结果。
[0019]图2为渥曼青霉素(Wortmannin)处理后细胞内病毒滴度检测结果。
[0020]图3为曲西立滨(Triciribine)处理后细胞内病毒滴度检测结果。
具体实施方式
[0021]实验材料：
[0022](一)实验毒株和细胞
[0023]异育银鲫尾鳍细胞系GiCF(The caudal fin of Carassius auratus gibelio)为本实验室构建，冻存于液氮中。细胞复苏所用培养基为含有10％胎牛血清和1％青霉素
‑
链霉素的M199培养基，于27℃恒温培养箱培养。CyHV
‑
2分离株YC
‑
01(以下简称CyHV
‑
2)在25℃的条件下感染细胞，待细胞全部死亡后，收集细胞上清液用0.22μm的针头式滤器过滤后即
为纯病毒液，于...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.LY294002在制备鲤疱疹病毒Ⅱ型的抑制剂方面的应用，所述LY294002的结构式如式(I)所示：2.LY294002在制备预防或治疗鲤疱疹病毒Ⅱ型感染的药物方面的应用。3.LY294002在制备预防或治疗鱼类病毒性造血器官坏死病的药物方面的应用。4.根...

【专利技术属性】
技术研发人员：王浩，肖思民，闻金萱，
申请(专利权)人：上海海洋大学，
类型：发明
国别省市：