一种胶体金胃三项联合检测试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种胶体金胃三项联合检测试剂盒，所述胃三项包括胃蛋白酶原I、胃蛋白酶原II和胃泌素17。胃三项联合检测试剂盒由底板、硝酸纤维素膜、结合垫、样本垫、吸水垫和扣卡所组成。本发明专利技术运用抗假阳性试剂对结合垫或样本垫进行处理，避免非特异性结合的发生，从而达到降低假阳性、降低高背景的技术效果，具有重要的推广应用价值。有重要的推广应用价值。

【技术实现步骤摘要】
一种胶体金胃三项联合检测试剂盒


[0001]本专利技术涉及免疫检测
，尤其涉及一种胶体金胃三项联合检测试剂 盒。

技术介绍

[0002]胃癌是最常见的主要恶性肿瘤之一，其致死率居全球所有恶性肿瘤的第2位。 多项临床试验表明，PGI、PGII、PGI/PGII比值、G
‑
17是萎缩性胃炎和早期胃癌 的标志物，联合PGI、PGII和G
‑
17检测可提高其灵敏度和特异度，对胃癌的早期 诊断及治疗具有重要意义。
[0003]现有技术中公开了G
‑
17、PGI、PGII联合检测装置及其制备方法(申请号为： 202010370096.6)，研究将胃泌素17、胃蛋白酶原I、胃蛋白酶原II并列置于一张 试纸条上进行联合检测，且运用聚乙二醇丙三醇处理，让单位面积的NC膜上结 合抗体数量增加。该检测装置存在所用聚乙二醇丙三醇所含亲水基团太多，无 法破坏因疏水基团相互作用产生的非特异性结合，从而存在高背景、假阳性等 缺陷。

技术实现思路

[0004]本专利技术要解决的技术问题是如何避免假阳性和高背景发生的问题，本专利技术 提供了一种胶体金胃三项联合检测试剂盒。
[0005]本专利技术的目的可通过采用以下技术方案予以实现：
[0006]一种胶体金胃三项联合检测试剂盒，由检测扣卡和位于检测扣卡内的检测 试纸条以及装载检测口卡的密封袋组成，所述检测试纸条含有PVC支撑底片， 由近至远依次粘贴有样本垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，具有如下特征：<br/>[0007]所述硝酸纤维素膜首先平行包被抗胃蛋白酶原I单克隆抗体、抗胃蛋白 酶原II单克隆抗体、抗胃泌素17单克隆抗体和羊抗鼠IgG多克隆抗体，37摄 氏度干燥烘干，然后用结合垫处理液浸泡包被后的所述硝酸纤维素膜，37摄氏 度过夜烘干，所述的结合垫处理液含有PVP40、海藻糖和吐温20；
[0008]所述样本垫用样本垫处理液进行预处理，37摄氏度过夜烘干，所述的样本 垫处理液为含有吐温20、PVP40、酪蛋白、PEG 20000和鼠IgG的Tris缓冲液；
[0009]所述结合垫为采用单克隆抗体标记胶体金溶液进行包被的玻璃纤维素膜， 其中所述单克隆抗体为与用于所述硝酸纤维素膜包被的单克隆抗体相配对的配 对抗胃蛋白酶原I单克隆抗体、配对抗胃蛋白酶原II单克隆抗体和配对所述抗 胃泌素17单克隆抗体。
[0010]所述抗胃蛋白酶原I单克隆抗体标记胶体金所采用的胶体金溶液为40nm胶 体金溶液，所述抗胃蛋白酶原II单克隆抗体标记胶体金所采用的胶体金溶液为 40nm胶体金溶液，所述抗胃泌素17单克隆抗体标记胶体金所采用的胶体金溶 液为60nm胶体金溶液。
[0011]所述的结合垫处理液含有0.01％
‑
0.1％PVP40、0.5％
‑
2％海藻糖和0.01％
‑
0.1％ 的吐温20。
[0012]所述的样本垫处理液含有30mM Tris PH8.5、0.5％
‑
1％吐温20、 0.5％
‑
2％PVP40、0.5％
‑
1％酪蛋白、0.05％
‑
0.1％聚乙二醇20000、0.1
‑
0.5mg/ml 鼠IgG。
[0013]所述的结合垫处理液中还含有1％
‑
5％的蔗糖。
[0014]所述的样本垫处理液中中还含有0.1％
‑
0.5％的曲拉通X
‑
100。
[0015]所述的样本垫处理液还含有0.05％
‑
0.1％聚乙烯醇、0.05％
‑
0.5％脂肪酸甘油 酯或0.1％
‑
0.5％聚山梨酯中的一种或几种。
[0016]采用上述技术方案，本专利技术至少具有下列优点：
[0017]1、本专利技术以对硝酸纤维素膜和样本垫进行处理，降低了非特异性结合发的 发生，从而达到降低假阳性、降低高背景的技术效果。
[0018]2、本专利技术方法操作简单，易于实现和推广。
[0019]因此，本专利技术一种胶体金胃三项联合检测试剂盒对改善现有胃病免疫检测 具有重要的意义和良好的应用前景。
具体实施方式
[0020]为更进一步阐述本专利技术为达成预定目的所采取的技术手段及功效，以下下 述实施例对本专利技术进行进一步说明，但本专利技术并不局限于以下说明。
[0021]实施例一：
[0022](1)硝酸纤维素膜的处理：硝酸纤维素膜首先平行包被抗胃蛋白酶原I单 克隆抗体、抗胃蛋白酶原II单克隆抗体、抗胃泌素17单克隆抗体和羊抗鼠IgG 多克隆抗体，37摄氏度干燥烘干得到待处理的结合垫。配制含有0.1％PVP40、 1％海藻糖和0.1％的吐温20的混合液，用以上混合液浸泡待处理的结合垫，充 分浸泡后，取出烘干，备用。
[0023](2)样本垫的处理：配制30mM Tris PH8.5、1％吐温20、1％PVP40、0.5％ 酪蛋白和0.1％PEG 20000的混合液，制得样本垫处理液，将玻璃纤维素膜浸泡 到样本垫处理液中，充分浸泡后，取出烘干，备用。
[0024](3)滤血膜的制备：将滤血膜裁剪成10cm
×
4mm每条。
[0025](4)吸水纸的制备：将吸水纸裁剪成30cm
×
2.7cm每条。
[0026](5)组装：将上述处理好的样本垫、结合垫、滤血膜、硝酸纤维素膜和吸 水垫依次粘贴于PVC底板上，贴好后用切条机切成宽4mm的试纸条，置于扣 卡内，加入干燥剂封装。
[0027]实施例二：
[0028](1)硝酸纤维素膜的处理：硝酸纤维素膜首先平行包被抗胃蛋白酶原I单 克隆抗体、抗胃蛋白酶原II单克隆抗体、抗胃泌素17单克隆抗体和羊抗鼠IgG 多克隆抗体，37摄氏度干燥烘干得到待处理的结合垫。配制含有0.1％PVP40、 1％海藻糖、0.1％的吐温20和1％的蔗糖的混合液，用以上混合液浸泡待处理的 结合垫，充分浸泡后，取出烘干，备用。
[0029](2)样本垫的处理：配制30mM Tris PH8.5、1％吐温20、1％PVP40、0.5％ 酪蛋白和0.1％PEG 20000的混合液，制得样本垫处理液，将玻璃纤维素膜浸泡 到样本垫处理液中，充分浸泡后，取出烘干，备用。
[0030](3)滤血膜的制备：将滤血膜裁剪成10cm
×
4mm每条。
[0031](4)吸水纸的制备：将吸水纸裁剪成30cm
×
2.7cm每条。
[0032](5)组装：将上述处理好的样本垫、结合垫、滤血膜、硝酸纤维素膜和吸 水垫依次粘贴于PVC底板上，贴好后用切条机切成宽4mm的试纸条，置于扣 卡内，加入干燥剂封装。
[0033]实施例三：
[0034](1)硝酸纤维素膜的处理：硝酸纤维素膜首先平行包被抗胃蛋白酶原本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种胶体金胃三项联合检测试剂盒，由检测扣卡和位于检测扣卡内的用于检测胃蛋白酶原I、抗胃蛋白酶原II和抗胃泌素17的检测试纸条组成，所述检测试纸条是以PVC板作为支撑底片，由近至远依次粘贴有样本垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，其特征在于：1)所述硝酸纤维素膜首先平行包被抗胃蛋白酶原I单克隆抗体、抗胃蛋白酶原II单克隆抗体、抗胃泌素17单克隆抗体和羊抗鼠IgG多克隆抗体，37摄氏度干燥烘干，然后用结合垫处理液浸泡包被后的所述硝酸纤维素膜，37摄氏度过夜烘干，所述的结合垫处理液含有PVP40、海藻糖和吐温20；2)所述样本垫用样本垫处理液进行预处理，37摄氏度过夜烘干，所述的样本垫处理液为含有吐温20、PVP40、酪蛋白、PEG 20000和鼠IgG的Tris缓冲液；3)所述结合垫为采用单克隆抗体标记胶体金溶液进行包被的玻璃纤维素膜，其中所述单克隆抗体为与用于所述硝酸纤维素膜包被的单克隆抗体相配对的配对抗胃蛋白酶原I单克隆抗体、配对抗胃蛋白酶原II单克隆抗体和配对所述抗胃泌素17单克隆抗体。2.根据权利要求1所述的一种胃三项联合检测试剂盒，其特征在于，所述抗胃蛋白酶原I单克隆抗体标记胶体金所采用的胶体金溶液为40nm胶体金溶液，所述抗胃蛋白酶原II单克隆抗体标记胶体金所采用的胶体金溶液为40nm胶体金溶液，所述抗胃泌素17单克隆抗体标记胶体金所采用的胶体金溶液为60nm胶体金溶液。3.根据权利要求1所述的一种胃三...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴钊，陈敏，李亚楠，
申请(专利权)人：常州博闻迪医药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：