一种化妆品中甲硝唑的快速筛查方法技术

本发明专利技术公开一种化妆品中甲硝唑的快速筛查方法，该方法是向待测化妆品中加入碱液，５０℃～８０℃水浴加热进行显色反应，根据显色反应结果判断待测化妆品中是否添加有甲硝唑，如果是软膏类化妆品，在加入碱液前需先向待测化妆品中加入酸液，加热溶化后，取溶液加入碱液。本发明专利技术的快速筛查方法不需要大型的仪器，而且操作方法简单，通过颜色判断即可挑选出添加有甲硝唑的样品进行后续的色谱精确检测。本发明专利技术的快速筛查方法有利于监管部门对大批量待测样品的快筛，简化了检测步骤而且也降低了检测成本，且可用于流动性大的检测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及甲硝唑的检测方法，具体涉及一种化妆品中甲硝唑的快速筛查 方法。
技术介绍
甲硝唑(英文名称为Metronidazole, MNZ)，其化学名称为2-甲基 -5-硝基咪唑-1-乙醇，分子式为C6H9N303，商品名为灭滴灵、甲硝哒唑、 甲硝基羟乙唑、灭滴唑。甲硝唑(MNZ)为硝基咪唑类药物，是广谱抗肠 虫药，能杀灭阿米巴原虫，对厌氧杆齒及球菌也有效，也用于外科手术感 染，被世界卫生组织(WHO)遴选为治疗厌氧菌感染的基本药物，此外， 甲硝唑对疥螨有较好的杀灭作用，可治疗疥疮，杀灭引起炎症性痤疮的棒 状杆菌，故对痤疮有效，被广泛用于化妆品中，尤其是一些消除"痘痘" 和"粉刺"的等化妆品中。然而，甲硝唑虽然具有抗菌和消炎的作用，对消除"痘痘"、"粉刺"等 有一定效果，但长期使用会刺激皮肤，引起接触性皮炎，表现为红斑、水 肿、糜烂、脱屑、瘙痒、灼热等，更严重的是导致对抗生素的耐药性，造 成健康隐患。目前我国《化妆品卫生规范2002年版》制定的化学指标分析方法只有22 个标准仅涉及57项，很多添加到化妆品的物质由于缺乏系统的成分、毒性、功 效检测方法及评价要求，使得目前化妆品的卫生质量仅仅是现行标准规定的 "合格"，不能有效反映化妆品的真实卫生质量，特别是化妆品中药物非法添加正受到越来越多的关注。我国《化妆品卫生规范》、欧盟化妆品规程(CoucilDirective76/768/EEC)规定甲硝唑、氯霉素、林可霉素等抗生素类物 质禁止在化妆品中使用。北京市疾病预防控制中心环境卫生所对在北京、江苏、江西地区销售的122 件祛痘除螨类化妆品进行了检测，122件样品检出甲硝唑14件，超标率11.5%， 最大添加量达至1』3.9%，其中广东28件中检出甲硝唑5件，超标率达17.9%。我国《化妆品卫生规范》已于2007年8月1日正式执行，其中首次提出测定 了祛痘除螨类化妆品中盐酸美满霉素、二水土霉素、盐酸四环素、盐酸金霉素、 盐酸多西环素、氯霉素6种抗生素和甲硝唑的高效液相色谱法。高效液相色谱法是常用的现代分析方法，它具有色谱分离效率高、灵敏度 高等优点，在相同的色谱条件下，甲硝唑对照品溶液和样品提取所得的供试品 溶液分别进样，根据色谱保留时间可判断待测样品是否含有甲硝唑。目前针对化妆品中甲硝唑的检测，除了常用的液相色谱法、液相色谱质谱 联用法以及薄层层析法外，还有的是采用间接竞争ELISA方法，在酶标板微孔 条上预包被偶联抗原，样本中残留的甲硝唑和微孔条上预包被的偶联抗原竞争 抗甲硝唑抗体，加入酶标二抗后，用TMB底物显色，样本吸光值与其残留物 甲硝唑的含量成负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出 样品中甲硝唑的含量。虽然上述的色谱法和ELIS A方法都能准确地检测出化妆品等中的甲硝唑， 然而这两种方法都存在操作复杂、样品处理时间长、对于大批量待检测样品无 法做到快速筛查，检测工作量大等问题，此外色谱法还存在仪器价格昂贵，色 谱柱易受污染、分析成本高和不适合做流动性大的现场检测等问题。
技术实现思路
本专利技术的目的在于针对现有技术的不足，提供一种无需大型检测仪器，检 测方法简便快速，检测成本低且检测结果准确的针对化妆品中是否含有甲硝唑 的快速筛查方法，该方法有利于监管部门现场快速筛査，尤其是针对大批量样 品的快速筛査。本专利技术的上述目的是通过如下方案予以实现的芳香族硝基化合物易于被还原，甲硝唑被碱液还原后，会生成紫红色的偶 氮苯和无色的氢化偶氮苯，因此可利用碱液显色来鉴定待测样品中是否含有甲 硝唑，如果碱液显色结果为粉红色或紫红色，则说明待测样品中含有甲硝唑， 甲硝唑被碱液还原后出现了颜色变化，如果碱液显色结果为没有颜色变化，则 说明待测样品中无甲硝唑。本专利技术的，就是基于上述的原理，采 用向待测化妆品中加入碱液，然后水浴加热进行显色反应，如果溶液颜色变为 粉红色或紫红色，则说明该待测化妆品中含有甲硝唑，如果溶液无颜色变化， 则说明该待测化妆品中不含有甲硝唑。化妆品 一般分为溶液类和软膏类 (1)当待测化妆品为溶液时，因为溶液类的化妆品不含有固体不溶杂质， 所以溶液类化妆品可以直接加入碱液，水浴加热进行显色反应，其间稍加振摇 并不断观察，如显色反应结果为溶液变成为紫红色或粉红色，则可判为怀疑阳 性，否则判为阴性；(2)当待测化妆品为软膏时，因为软膏类化妆品中含有很多的不溶杂质而 且添加剂成分复杂，所以需要先向软膏类化妆品中加入酸液，然后加热，待软膏溶化后，过滤，取滤液加入碱液，水浴加热进行显色反应，其间稍加振摇并 不断观察，如显色结果为溶液变为紫红色或粉红色判为怀疑阳性，否则判为阴 性；加入酸液后的加热，其目的是使软膏溶化，从而将甲硝唑释放出来，因为甲硝唑可溶于酸，所以这里采用加酸后加热溶化，也可以使得一部分不溶于酸 或者不溶的物质去除掉，只保留溶液，从而达到高比率提取软膏类化妆品中甲硝唑的目的；加酸后的加热，其温度只要使得软膏溶化即可，实际操作时可选 择5(TC 8(TC的加热温度。上述的快速筛査方法中，向软膏类化妆品中加入的酸液可以选择任何一种 常用酸，如醋酸、盐酸等，而出于对环保的考虑，优选醋酸，因为醋酸不但环 保而且腐蚀性好，醋酸的浓度可以选择《lmol/L，如0.3mol/L醋酸溶液。本专利技术的快速筛查方法中，作为显色试剂用的碱液可选择本领域常用的碱 液，如氢氧化钠、氢氧化钾等，由于本专利技术在前面已经加入了酸液，这里进行 显色反应的时候，部分的碱液可能会和前面的酸液进行中和反应，因此为了保 证显色反应的较高灵敏度，这里碱液优选高浓度的氢氧化钠，20质量％ 40 质量％氢氧化钠溶液，更加优选30质量％氢氧化钠溶液。本专利技术的快速筛查方法中，碱液加入后，需要采用水浴加热进行颜色反应， 这里显色反应水浴温度控制比较重要，因为水浴温度过高则显色反应后褪色太 快，可能影响观察，如果水浴温度过低，则显色反应时间会比较长，影响筛査 的快速性，同时显色反应的颜色也会比较淡，影响观察，因此这里显色反应的 水浴温度控制在5(TC 8(TC之间，从而可以保证快速显色，同时也能保证显色 时间足够长，优选显色反应的水浴温度为6(TC 7(TC。本专利技术的快速筛查方法主要是针对化妆品中是否违法添加了甲硝唑进行的初筛，只要是利用本专利技术方法进行显色后，出现粉红色或紫红色的化妆品， 则可初步判断该化妆品中可能添加有甲硝唑，如果显色反应为无变化，则说明 该化妆品中肯定没有添加甲硝唑，然后将可能添加有甲硝唑的化妆品再进行质 谱、色谱等更加精细的检测。虽然只是初筛，但是本专利技术的方法操作简便，而 且所用时间短， 一般3分钟内即可完成检查，而且结果直观通过看颜色就可以 从大批量的待测化妆品中挑出少量的可疑样品，大大简化了检测的步骤，而且 只需要对少量可疑的样品进行质谱、色谱等精细检测，也使得检测成本大大降 低，适合于监管部门快速检査的需要，对提高监管部门的运作效率、快速打击 不法分子有着重大的社会效益。与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果1. 本专利技术的快速筛査方法采用加酸、加碱和水浴加热的简单步骤，既可以 检测出待测样品中是否含有甲硝唑，方法简便，容易上手，不需要对检测人员 进行特别培训；2. 本专利技术的快速筛査方法其原料只需本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种化妆品中甲硝唑的快速筛查方法，其特征在于该方法是向待测化妆品中加入碱液，５０℃～８０℃水浴加热进行显色反应，根据显色反应结果判断待测化妆品中是否添加有甲硝唑。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：关日晴，梁祈，刘敏敏，李晨辉，
申请(专利权)人：广东省药品检验所，
类型：发明
国别省市：81[中国|广州]