本发明专利技术提供了SGK1抑制剂在制备治疗颅内轴外海绵状血管瘤药物中的应用，属于肿瘤诊断和治疗。本发明专利技术发现颅内轴外海绵状血管瘤中存在GJA4c.121G>T体细胞突变。与野生型相比，突变的病灶具有特异的影像和病理表现。该突变可激活SGK1通路，使用SGK1通路选择性抑制剂EMD638683发现其可逆转GJA4突变引起的增值增加和抑制动脉分化等表型，进而达到治疗颅内轴外海绵状血管瘤的目的。外海绵状血管瘤的目的。外海绵状血管瘤的目的。
【技术实现步骤摘要】
SGK1抑制剂在制备治疗颅内轴外海绵状血管瘤药物中的应用
[0001]本专利技术属于肿瘤诊断和治疗
，尤其涉及SGK1抑制剂在制备治疗颅内轴外海绵状血管瘤药物中的应用。
技术介绍
[0002]轴外海绵状血管瘤是罕见的颅内病变，大多数发生在海绵窦(占所有良性海绵窦病变的3％)，偶尔也会出现在硬脑膜窦。轴外海绵状血管瘤无家族史，一般为单发病灶。随着时间的推移，病灶会扭曲和压迫邻近的组织，其行为与肿瘤病变类似。轴外海绵状血管瘤的病因尚不明确，同时病变属于血管肿瘤还是血管畸形仍有争议。组织学上，轴外海绵状血管瘤与脑内海绵状畸形有相似之处，均表现为薄壁扩张的血管网，内衬单层内皮细胞。血管通常彼此相邻，中间被纤维结缔组织分隔。脑海绵状血管畸形是由CCM复合体的种系突变(家族性脑海绵状畸形)和/或
[0003]PIK3CA、MAP3K3或其他基因的体细胞突变(散发性脑海绵状畸形)引起的中枢神经系统血管畸形。轴外海绵状血管瘤与脑海绵状畸形在组织学上的相似性表明，轴外海绵状血管瘤可能同样与遗传因素有关。但是现有技术中还未有关于GJA4 c.121G>T突变是否能够作为诊断颅内轴外海绵状血管瘤的标志物的相关报道。
技术实现思路
[0004]有鉴于此，本专利技术的目的在于提供SGK1抑制剂在制备治疗颅内轴外海绵状血管瘤药物中的应用。
[0005]为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供了以下技术方案：
[0006]本专利技术提供了SGK1抑制剂在制备治疗颅内轴外海绵状血管瘤药物中的应用。
[0007]优选的，所述SGK1抑制剂包括EMD638683。
[0008]本专利技术的有益效果为：
[0009]本专利技术发现颅内轴外海绵状血管瘤中存在GJA4 c.121G>T体细胞突变，该突变可激活SGK1通路。使用SGK1通路选择性抑制剂EMD638683发现其可逆转GJA4突变引起的增值增加和抑制动脉分化等表型，进而达到治疗颅内轴外海绵状血管瘤的目的。
附图说明
[0010]图1为GJA4 c.121G>T体细胞突变在人轴外海绵状血管瘤中的检测，顶部的瀑布图显示了人类轴外海绵状血管瘤中GJA4 c.121G>T突变的等位基因频率，通过全外显子组测序(WES)中包含变异体序列的百分比或数字液滴聚合酶链式反应(ddPCR)分析的变异体的分数丰富度进行识别，下面的图表显示了关于样本的详细信息，包括检测的技术，是否存在配对的血液样本，以及样本类型(新鲜冷冻或福尔马林固定，石蜡包埋组织)；
[0011]图2为体外培养的人脐静脉内皮细胞和轴外海绵状血管瘤组织样品中SGK1磷酸化的检测；A，被编码GJA4
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wt或GJA4 c.121G>T突变或空载体(CTRL)的慢病毒感染的人脐静脉
内皮细胞(HUVECs)的免疫印迹，结果显示SGK1磷酸化增加，但ERK1/2和p38通路没有变化；B，GJA4突变的组织样本的免疫组化染色显示血管管腔内皮细胞中SGK1磷酸化的强烈染色(箭头)，而非GJA4突变的样本和颞浅动脉内皮细胞中SGK1磷酸化的染色很少或没有(箭头)；标尺:200μm；统计图显示了p
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SGK1在GJA4
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wt、GJA4 c.121G>T突变ECHs和颞浅动脉(STA)中的表达水平的半定量分级；采用单因素方差分析和tukey多重比较检验；
[0012]图3为GJA4 c.121G>T突变慢病毒感染内皮细胞的表型A，TK1、PCNA和Cyclin D1在过表达GJA4
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WT，GJA4突变和CTRL慢病毒的HUVECs中的Western blot；B，在过表达GJA4
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野生型、GJA4
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突变型和空载慢病毒的人脐静脉内皮中，Western blot检测Ephrin
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B2和VEGF
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R2；C，GJA4突变的病灶组织样本的免疫组化染色显示血管腔内壁内皮细胞的PCNA水平增加(箭头)，而非GJA4突变的样本和颞浅动脉内皮细胞的PCNA很少或没有染色。标尺:200μm；D，GJA4突变的病灶组织样本的免疫组化染色显示，血管腔内壁内皮细胞中Ephrin
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B2水平下降，而非GJA4突变的样本和颞浅动脉内皮细胞中Ephrin
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B2表达强烈(箭头)；标尺:200μm；采用单因素方差分析和tukey多重比较检验；
[0013]图4为GJA4突变影响小鼠视网膜血管生成；A，视网膜染色显示，与GJA4
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野生型和对照小鼠相比，GJA4突变小鼠视网膜浅丛血管静脉直径增加；EMD638683逆转了GJA4突变引起的静脉内径增加(n＝6)；符号：A＝动脉；V＝静脉；比例尺：100μm；B，对注射GJA4
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野生型、GJA4
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突变型和空载腺相关病毒的C57小鼠血管生成前的凝集素染色(红色)分析显示，GJA4突变增加了血管密度，而EMD638683逆转了这一变化(n＝8)；比例尺：100μm；C，免疫染色显示，与GJA4
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野生型和对照小鼠相比，GJA4
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突变小鼠视网膜血管网络中α
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SMA
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(红色)表达减少；同时，EMD638683处理的gja4突变小鼠α
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SMA表达增加(n＝6)；比例尺：100μm；采用单因素方差分析和tukey多重比较检验。
具体实施方式
[0014]本专利技术提供了SGK1抑制剂在制备治疗颅内轴外海绵状血管瘤药物中的应用。在本专利技术中，所述SGK1抑制剂优选包括EMD638683。在本专利技术中，所述EMD638683是小分子化合物，见
[0015]https://www.selleck.cn/products/emd638683.html。本专利技术对所述EMD638683的来源没有特殊限定，采用常规市售产品即可。本专利技术对所述药物的剂型没有特殊限定，本领域技术人员采用EMD638683在医学上可接受的剂型即可。
[0016]下面结合实施例对本专利技术提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本专利技术保护范围的限定。
[0017]实施例1
[0018]一、材料与方法
[0019]1.1病人
[0020]本专利技术招募了根据标准程序诊断为颅内轴外海绵状血管瘤患者，并经过放射科医生、神经外科医生和病理学专家小组确认。这些患者既没有接受过头部辐射，也没有相关疾病家族史(如海绵状血管瘤或遗传性血管疾病)。所有患者均已签署知情同意协议书。本专利技术已获得北京天坛医院机构审查委员会和伦理委员会的批准。
[0021]1.2标本准备
[0022]从入选的患者中获得术中轴外海绵状血管瘤标本和配对的外周血全血样本，用于进一步的本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.SGK1抑制剂在制备治疗颅内轴外海绵状血管瘤药物中的应用。2.根据权利要求1...
【专利技术属性】
技术研发人员：霍然，许宏远，曹勇，
申请(专利权)人：首都医科大学附属北京天坛医院，
类型：发明
国别省市：
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