【技术实现步骤摘要】
耐高温谷氨酸棒杆菌菌株、培养基、驯化筛选方法及应用
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[0001]本专利技术微生物发酵
,特别是涉及一种耐高温谷氨酸棒杆菌菌株、培养基、驯化筛选方法及应用。
技术介绍
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[0002]谷氨酸(glutamic acid)是蛋白结构氨基酸之一,也是一种重要的游离氨基酸,广泛应用于食品、医药、日化及饲料等工业领域。
[0003]谷氨酸生产方法目前主要采用发酵法生产,即利用微生物合成谷氨酸,该方法主要包括糖酵解途径(EMP)、磷酸戊糖途径(PPP)、三羧酸循环(TCA)、乙醛酸循环和CO2固定反应等。发酵法生产谷氨酸所用到的菌株为谷氨酸棒杆菌。
[0004]谷氨酸棒杆菌最适宜生长的温度为30
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33℃,当发酵液的温度超过33℃时,就必须使用冷却水进行降温,否则就会对谷氨酸棒杆菌的活性产生抑制,影响谷氨酸的产率。在谷氨酸发酵工厂生产中,夏季高温天气,发酵前期温度很难控制在30
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33℃之间。前期高温会造成菌株活力早衰,后劲不足,后期产酸幅度低或者停滞,致使产量下降,成本升高。此外高温条件下进行生产,需要大量的冷却手段,能耗高。所以需要对现有谷氨酸棒杆菌进行高温驯化筛选,使之耐高温,在高温环境下菌体也可以正常生长和产谷氨酸。
技术实现思路
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[0005]本专利技术的第一个目的在于提供一种耐高温谷氨酸棒杆菌菌株。
[0006]本专利技术的第二个目的在于提供:一种耐高温谷氨酸棒杆菌菌的用途。
[0007]本专利技术的第三个目的在于提供:耐高温谷 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.耐高温谷氨酸棒杆菌菌株,其特征在于,所述菌株为谷氨酸棒杆菌(Corynebactenumglutamicum),命名为MHZ
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0115,保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC),地址:中国,北京,保藏编号为:CGMCC No.25175,保藏时间:2022年6月23日。2.如权利要求1所述耐高温谷氨酸棒杆菌菌株,其特征在于,所述菌株在41℃
‑
45℃下,用于发酵生产谷氨酸,产酸量高于43g/L。3.如权利要求1所述耐高温谷氨酸棒杆菌菌株,其特征在于,所述菌株在33℃
‑
41℃下,用于发酵生产谷氨酸,产酸量高于45g/L,发酵周期为20h
‑
24h。4.如权利要求1
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3任一所述的耐高温谷氨酸棒杆菌菌株,用于发酵生产谷氨酸。5.如权利要求1所述耐高温谷氨酸棒杆菌菌株的驯化筛选方法,其特征在于,其包括如下步骤:(一)原始菌株接种于LB平板培养基进行活化,从新鲜活化的平板上挑取菌苔,接种于种子培养基中扩大培养得到种子液;(二)取步骤(一)得到的种子液进行温度驯化得到高温驯化谷氨酸棒杆菌:温度驯化分为两个阶段,第一阶段温度驯化的温度区间为:35℃
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41℃,初始驯化温度为35℃,温度逐步提高,每次提高2℃;第二阶段温度驯化的温度区间为:42℃
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45℃,初始驯化温度为42℃,温度逐步提高,每次提高1℃。6.如权利要求5所述的耐高温谷氨酸棒杆菌菌株的驯化筛选方法,其特征在于,所述步骤(一)原始菌株活化及扩大培养得到种子液的具体方法包括如下步骤:(1)在33℃温度下,将原始菌株接种到LB平板培养基上,进行活化培养,培养时间为24h;(2)从步骤(1)得到的活化后菌株中,挑选生长占优势的单菌落,取一环接种到摇瓶种子培养基上,并放在往复式摇床培养,200rpm,33℃培养,培养24h得到种子液。7.如权利要求5所述的耐高温谷氨酸棒杆菌菌株的驯化筛选方法,其特征在于,所述步骤(二)中第一阶段温度驯化的具体操作方法为:(1)将所述步骤(一)培养得到的种子液取一环稀释后涂布于LB平板培养基上,放到生化培养箱中,35℃培养24h;然后,挑选生长占优势的单菌落,取一环接种于摇瓶驯化培养基中,放到往复式摇床上,200rpm,35℃培养;(2)待步骤(1)菌体生长至对数期后,取一环稀释后涂布于LB平板培养基上,放到生化培养箱中,37℃培养24h;然后,挑选生长占优势的单菌落,取一环接种于摇瓶驯化培养基中,放到往复式摇床上,200rpm,37℃培养;(3)待步骤(2)菌体生长至对数期后,取一环稀释后涂布于LB平板培养基上,放到生化培养箱中,39℃培养24h;然后挑选生长占优势的单菌落,取一环接种于摇瓶驯化培养基中,放到往复式摇床上200rpm,39℃培养;(4)待步骤(3)菌体生长至对数期后,取一环稀释后涂布于LB平板培养基上,放到生化培养箱中,41℃培养72h;然后,挑选生长占优势的单菌落,取一环接种于摇瓶驯化培养基中,放到往复式摇床上200rpm,41℃培养;种子生...
【专利技术属性】
技术研发人员:程国平,李必金,龙泉伟,高铭泽,高鹏,李岩,赵津津,
申请(专利权)人:通辽梅花生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
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