一种（-）-α-红没药醇发酵培养基及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种(

【技术实现步骤摘要】
一种(
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)
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α
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红没药醇发酵培养基及其制备方法和应用


[0001]本专利技术具体涉及一种(
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α
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红没药醇发酵培养基及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002](
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)
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α
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红没药醇又称甜红没药醇、防风根醇，是一种单环不饱和半倍萜醇，分子式为C
15
H
26
O，密度为0.922
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0.928，折光系数为1.492
‑
1.498，呈粘稠液体状，颜色呈无色至稻草黄色，具有轻微的本身气味，易溶于乙醇、异丙醇等低级醇，同时溶于脂肪醇、甘油酯以及石醋，但几乎不溶于甘油和水。(
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)
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α
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红没药醇主要应用在皮肤保护和皮肤护理化妆品中，作为活性成分以保护和护理过敏性皮肤，适合于用在防晒产品，日光浴后洗澡液，婴儿产品和剃须后护理品中。此外，(
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α
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红没药醇还可用于口腔卫生产品中，如牙膏和漱口水。
[0003](
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)
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α
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红没药醇主要存在于春黄菊、胶杨以及某些苦槛蓝属和鼠尾草属中，作为植物的次级代谢产物，受制于生物生长周期，环境等各种因素，植物提取的产量有限，俨然无法满足市场的需求。目前(
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α
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红没药醇主要依赖于化学合成法，国内以异戊烯醇和双戊烯为原料经过酯化和缩合反应制取红没药醇，巴斯夫公司以法呢醇和橙花叔醇为原料经过酸催化环化反应，然后水解生成红没药醇。由于(
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)
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α
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红没药醇复杂手性化学结构，使得直接化学合成难度高，合成品的生物活性低以及纯度低等弊端。因此利用生物发酵实现以廉价的碳源和培养基生产具有高附加值(
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α
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红没药醇是一条最具有潜力的途径。
[0004]有报道，利用基因工程菌生产(
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α
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红没药醇，但发酵产量并不理想，例如2016年Gui Hwan Han等人以大肠杆菌为宿主细胞，获得最终产(
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)
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α
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红没药醇基因工程菌，其发酵48h后产量仅为0.08g/L；CN110016458A公开了一种利用大肠杆菌发酵生产(
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)
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α
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红没药醇的方法，其虽然摇瓶产量达到4.15g/L，但还有进一步提高的空间，使发酵罐放大生产后的产量呈倍数级提高。对此，现目前还没有通过针对(
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α
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红没药醇的发酵培养基，以提高(
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)
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α
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红没药醇产量和质量的研究。

技术实现思路

[0005]为解决上述问题，本专利技术提供了一种(
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α
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红没药醇发酵培养基，它含有如下终浓度的原料：
[0006]葡萄糖10
‑
30g/L、酵母浸粉20
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70g/L、酵母蛋白胨5
‑
10g/L、黄豆饼粉5
‑
30g/L、玉米浆干粉10
‑
50g/L、磷酸氢二钾5
‑
20g/L、磷酸二氢钾1
‑
10g/L、氯霉素0.005
‑
0.1g/L，氨苄青霉素0.05
‑
0.2g/L、消泡剂0.05
‑
2g/L，其余为水。
[0007]进一步地，它含有如下终浓度的原料：
[0008]葡萄糖15
‑
25g/L、酵母浸粉30
‑
60g/L、酵母蛋白胨5
‑
10g/L、黄豆饼粉5
‑
30g/L、玉米浆干粉20
‑
30g/L、磷酸氢二钾5
‑
10g/L、磷酸二氢钾3
‑
8g/L、氯霉素0.01
‑
0.05g/L，氨苄青霉素0.05
‑
0.15g/L、消泡剂0.05
‑
0.5g/L，其余为水。
[0009]更进一步地，它含有如下终浓度的原料：
[0010]葡萄糖20g/L、酵母浸粉30g/L、酵母蛋白胨10g/L、黄豆饼粉10g/L，玉米浆干粉
20g/L，磷酸氢二钾6g/L、磷酸二氢钾8g/L、氯霉素0.034g/L，氨苄青霉素0.1g/L、消泡剂0.1g/L，其余为水。
[0011]进一步地，所述发酵培养基的pH值6.80
‑
7.50。
[0012]更进一步地，所述发酵培养基的pH值6.80。
[0013]本专利技术还提供一种制备前述(
‑
)
‑
α
‑
红没药醇发酵培养基的方法，它包括如下步骤：
[0014]1)按配比称取原料；
[0015]2)取酵母浸粉、酵母蛋白胨、黄豆饼粉、玉米浆干粉，磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、氯霉素和氨苄青霉素，加水溶解，再加入葡萄糖和消泡剂，灭菌，即得。
[0016]进一步地，所述灭菌的条件为温度121
‑
123℃，灭菌时间30min。
[0017]本专利技术最后提供了一种生产(
‑
)
‑
α
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红没药醇的方法，它包括如下步骤：
[0018]取重组大肠杆菌菌种活化，活化的种子液接种于前述的(
‑
)
‑
α
‑
红没药醇发酵培养基中发酵60～100h，收集发酵液，即得。
[0019]进一步地，所述活化是重组大肠杆菌菌种接种于pH值6.80
‑
7.40，浓度25g/L的LB培养基，在温度35
‑
38℃，转速200
‑
250rpm的条件下培养6
‑
20h。
[0020]进一步地，所述重组大肠杆菌来源于上海锐康生物研发有限公司自主研发。
[0021]进一步地，所述种子液以5％
‑
20％的接种量接种于所述(
‑
)
‑
α
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红没药醇发酵培养基中；所述发酵的条件为罐压0.03
‑
0.1MPa，通气量10
‑
30L/min，搅拌速度200
‑
800rpm，诱导前温本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种(
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α
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红没药醇发酵培养基，其特征在于：它含有如下终浓度的原料：葡萄糖10
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30g/L、酵母浸粉20
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70g/L、酵母蛋白胨5
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10g/L、黄豆饼粉5
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30g/L、玉米浆干粉10
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50g/L、磷酸氢二钾5
‑
20g/L、磷酸二氢钾1
‑
10g/L、氯霉素0.005
‑
0.1g/L、氨苄青霉素0.05
‑
0.2g/L、消泡剂0.05
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2g/L，其余为水。2.根据权利要求1所述的(
‑
)
‑
α
‑
红没药醇发酵培养基，其特征在于：它含有如下终浓度的原料：葡萄糖15
‑
25g/L、酵母浸粉30
‑
60g/L、酵母蛋白胨5
‑
10g/L、黄豆饼粉5
‑
30g/L、玉米浆干粉20
‑
30g/L、磷酸氢二钾5
‑
10g/L、磷酸二氢钾3
‑
8g/L、氯霉素0.01
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0.05g/L、氨苄青霉素0.05
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0.15g/L、消泡剂0.05
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0.5g/L，其余为水。3.根据权利要求1或2所述的(
‑
)
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α
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红没药醇发酵培养基，其特征在于：它含有如下终浓度的原料：葡萄糖20g/L、酵母浸粉30g/L、酵母蛋白胨10g/L、黄豆饼粉10g/L、玉米浆干粉20g/L、磷酸氢二钾6g/L、磷酸二氢钾8g/L、氯霉素0.034g/L、氨苄青霉素0.1g/L、消泡剂0.1g/L，其余为水。4.根据权利要求1或2所述的(
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α
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红没药醇发酵培养基，其特征在于：所述发酵培养基的pH值6.80
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7.50，优选pH值6.80。5.一种制备权利要求1～4任一项所述(
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α
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【专利技术属性】
技术研发人员：代嘉懿，张宝新，张海雷，周路，赵晓龙，周双傲，邓旭衡，
申请(专利权)人：伊犁川宁生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：