一种展示猪链球菌前噬菌体裂解酶的重组芽孢杆菌及其构建方法和应用技术

本发明专利技术提供了一种展示猪链球菌前噬菌体裂解酶的重组芽孢杆菌及其构建方法和应用，属于基因工程技术领域。本发明专利技术将枯草芽孢杆菌编码锚定蛋白cotG基因与编码前噬菌体裂解酶Lys0859基因融合，在枯草芽孢杆菌中进行外源表达，获得表面展示前噬菌体裂解酶Lys0859的重组枯草芽孢杆菌。所述重组枯草芽孢杆菌产生的芽孢可耐受高温、强酸强碱、胃肠道的环境，同时对猪链球菌、金黄色葡萄球菌、李斯特菌、产气荚膜梭菌等革兰氏阳性菌具有抑菌效果，可作为新型的替抗制剂。重组芽孢在应用于猪链球菌感染时，可通过口服接种，同时在储存和运输方面有极大便利，还具有节约生产成本的特点。还具有节约生产成本的特点。还具有节约生产成本的特点。

【技术实现步骤摘要】
一种展示猪链球菌前噬菌体裂解酶的重组芽孢杆菌及其构建方法和应用


[0001]本专利技术属于基因工程
，具体涉及一种展示猪链球菌前噬菌体裂解酶的重组芽孢杆菌及其构建方法和应用。

技术介绍

[0002]我国饲料“禁抗令”已全面实施，饲料行业进入禁止使用抗生素的新时代，寻找更多、更好、更有效的抗生素替代品成为当务之急。噬菌体裂解酶是双链DNA噬菌体感染后期在宿主体内合成的细胞壁水解酶，通过穿孔素蛋白，裂解酶到达宿主细胞肽聚糖层从而发挥裂解功能，最终宿主细胞裂解释放子代噬菌体。噬菌体裂解酶因其不易产生耐药性、作用专一、高效且特异性杀菌等优点成为研究的热点。现有技术中报道的猪链球菌前噬菌体裂解酶Lys0859具有CHAP的催化结构域(EAD)和SH3b的细胞壁结合结构域(CBD)。该裂解酶是半胱氨酸、组氨酸依赖性的酰胺水解酶。但是该裂解酶耐受胃肠道的环境能力极差，不稳定易降解，增加储存和运输成本。注射的给药途径给猪只带来较大的应激，不仅影响仔猪生产性能，而且操作不便，增加工作量和饲养成本。另一方面，噬菌体裂解酶的制备过程如纯化、破碎成本高。因此，亟本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种展示猪链球菌前噬菌体裂解酶的重组芽孢杆菌，其特征在于，在芽孢杆菌的锚定蛋白表面展示前噬菌体裂解酶Lys0859。2.根据权利要求1所述重组芽孢杆菌，其特征在于，所述芽孢杆菌锚定蛋白为cotG蛋白；所述cotG蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。3.根据权利要求1所述重组芽孢杆菌，其特征在于，所述前噬菌体裂解酶Lys0859的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。4.根据权利要求1所述重组芽孢杆菌，其特征在于，所述锚定蛋白cotG和前噬菌体裂解酶Lys0859形成的融合蛋白的氨基酸序列SEQ IDNO:3所示。5.根据权利要求1～4中任意一项所述重组芽孢杆菌，其特征在于，所述重组芽孢杆菌的宿主菌为枯草芽孢杆菌168标准菌株。6.一种权利要求1～5中任意一项所述重组芽孢杆菌的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：制备芽孢杆菌锚定蛋白cotG和前噬菌体裂解酶Lys0859的融合基因；将所述融合基因克隆至穿梭质粒中，得到重组质粒；将所述重组质粒转化芽孢杆菌宿主菌中，得到展示猪链球菌前噬菌体裂解酶的重组芽孢杆菌。7.根据权利要求6所述构建方法，其特征在于，所述制备芽孢杆菌锚定蛋白和前噬菌体裂解酶Lys0859形成融合基因的...

【专利技术属性】
技术研发人员：钱平，朱梦媛，李祥敏，李鑫鑫，王林康，
申请(专利权)人：华中农业大学，
类型：发明
国别省市：