【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于液相色谱分析，具体涉及一种α-酮基-d-葡萄醛酸发酵液的hplc检测方法。
技术介绍
1、2-酮基-d-葡萄糖酸(2-keto-d-gluconic acid，2kga)是目前国际上规模化发酵生产的有机酸之一，主要作为食品抗氧化剂d-异抗坏血酸及其盐类合成的前体。2kga的质量浓度是2kga发酵过程控制的一个极其重要的技术参数，其影响了2kga发酵产率和2kga质量。
2、传统的发酵液中2-酮基-d-葡萄糖酸(2kga)的检测方法是采用旋光-葡萄糖综合检测法或碘量法。但这些传统检测方法操作过程繁琐、耗时长、准确率较低。有必要提供一种更简单、高效和准确的新方法以提高发酵液中2kga的质量控制水平。
技术实现思路
1、为解决上述问题，本专利技术提供了一种α-酮基-d-葡萄醛酸发酵液的hplc检测方法，它包括如下步骤：
2、1)对照品溶液制备：取2-酮基-d-葡萄糖酸半钙盐，加水溶解，即得；
3、2)供试品溶液制备：取α-酮基-d-葡萄醛酸发酵液，加水混匀，过滤即得；
4、3)分别吸取对照品溶液和供试品溶液注入高效液相色谱仪；色谱条件如下：色谱柱：以聚苯乙烯二乙烯苯树脂为填充剂；流动相：硫酸溶液。
5、进一步地，步骤1)所述对照品溶液中2-酮基-d-葡萄糖酸半钙盐的浓度为0.1～1mg/ml。
6、进一步地，步骤2)所述供试品溶液中发酵液的浓度为0.1 -1mg/ml，优选0.4-0.5mg/ml。p>
7、进一步地，步骤3)所述色谱柱为aminex hpx-87h，300*7.8mm,9um。
8、进一步地，步骤3)所述硫酸溶液的浓度为4.5-5.5mmol/l。
9、更进一步地，所述硫酸溶液的浓度为5mmol/l。
10、进一步地，步骤3)所述色谱条件还包括柱温50-60℃。
11、更进一步地，所述柱温55℃。
12、进一步地，步骤3)所述色谱条件还包括进样量5～50ul。
13、更进一步地，所述进样量10ul。
14、进一步地，所述高效液相色谱仪的检测器为示差检测器。
15、进一步地，所述待检α-酮基-d-葡萄醛酸发酵液中α-酮基-d-葡萄醛酸的含量按外标法以峰面积计算。
16、本专利技术α-酮基-d-葡萄醛酸发酵液的hplc检测方法，以特定的流动相洗脱进样于特定色谱柱的α-酮基-d-葡萄醛酸发酵液，在特定的柱温和进样量的条件下，首次实现了对发酵液中α-酮基-d-葡萄醛酸有效分离，使之能被准确的定量检测，完善了α-酮基-d-葡萄醛酸发酵液的质量控制方法，使α-酮基-d-葡萄醛酸发酵液的质量得到了有效控制，保障了α-酮基-d-葡萄醛酸的发酵生产。
17、显然，根据本专利技术的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本专利技术上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
18、以下通过实施例形式的具体实施方式，对本专利技术的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。
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1.一种α-酮基-D-葡萄醛酸发酵液的HPLC检测方法，其特征在于：它包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的HPLC检测方法，其特征在于：步骤1)所述对照品溶液中2-酮基-D-葡萄糖酸半钙盐的浓度为0.1～1mg/ml。
3.根据权利要求1所述的HPLC检测方法，其特征在于：步骤2)所述供试品溶液中发酵液的浓度为0.1-1mg/mL，优选0.4-0.5mg/mL。
4.根据权利要求1所述的HPLC检测方法，其特征在于：步骤3)所述色谱柱为AminexHPX-87H，300*7.8mm,9um。
5.根据权利要求1所述的HPLC检测方法，其特征在于：步骤3)所述硫酸溶液的浓度为4.5-5.5mmol/L。
6.根据权利要求5所述的HPLC检测方法，其特征在于：所述硫酸溶液的浓度为5mmol/L。
7.根据权利要求1所述的HPLC检测方法，其特征在于：步骤3)所述色谱条件还包括柱温50-60℃，进样量5～50ul。
8.根据权利要求7所述的HPLC检测方法，其特征在于：所述柱温55℃，进样量10ul
9.根据权利要求1所述的HPLC检测方法，其特征在于：步骤3)所述高效液相色谱仪的检测器为示差检测器。
10.根据权利要求1～9任一项所述的HPLC检测方法，其特征在于：所述待检α-酮基-D-葡萄醛酸发酵液中α-酮基-D-葡萄醛酸的含量按外标法以峰面积计算。
...【技术特征摘要】
1.一种α-酮基-d-葡萄醛酸发酵液的hplc检测方法，其特征在于：它包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的hplc检测方法，其特征在于：步骤1)所述对照品溶液中2-酮基-d-葡萄糖酸半钙盐的浓度为0.1～1mg/ml。
3.根据权利要求1所述的hplc检测方法，其特征在于：步骤2)所述供试品溶液中发酵液的浓度为0.1-1mg/ml，优选0.4-0.5mg/ml。
4.根据权利要求1所述的hplc检测方法，其特征在于：步骤3)所述色谱柱为aminexhpx-87h，300*7.8mm,9um。
5.根据权利要求1所述的hplc检测方法，其特征在于：步骤3)所述硫酸溶液的浓度为4.5-...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈倩，董进臣，张霞飞，娄慧萍，依力扎提·阿力江，
申请(专利权)人：伊犁川宁生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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