一种纳米金标记－黄曲霉毒素Ｂ１新型检测方法技术

本发明专利技术涉及利用纳米金标记黄曲霉毒素Ｂ１（ＡＦＢ１），结合纳米金银增强、吸光度检测／溶出化学发光检测技术，建立了两种ＡＦＢ１新型超灵敏检测体系。第一种方法用ＡＦＢ１抗体与金标抗原、待测抗原进行竞争免疫反应，然后加入银增强溶液，以金为核沉积生长银，通过检测吸光度来确定待测物中ＡＦＢ１的含量，该方法的检出限可达到０．０１ｎｇ／ｍＬ。第二种方法在前一种方法的基础上，将银化学溶出，通过化学发光法检测沉积的银的量来确定待测物中ＡＦＢ１的含量，该方法的检出限可达到０．００２ｎｇ／ｍＬ。本发明专利技术建立的ＡＦＢ１检测技术准确、灵敏、快速，对于食品安全具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及采用纳米金标记AFB工人工抗原，使其与AFB工标准抗原直接竞争同固定 化抗体发生免疫反应，再加入银增强液，银在纳米金上沉积。待测抗原的浓度越大，通过免 疫反应结合的金标记抗原就越少，纳米金上沉积的银就越少，颜色(灰度)也越浅，用分光 光度法测定该银增强产物的吸光度，即可得出待测AFB工的量，建立了吸光度检测体系。其 次，进一步将银化学溶出，采用溶出化学发光检测技术，通过二次信号放大，建立了金标银 增强_溶出化学发光检测体系，实现了 AFB工的超灵敏化学发光检测。 具体实验原理如图1所示。 具体来说，本专利技术的主要分析步骤如下 1标准试样制备 1. 1本专利技术所用试液与材料①AFB工单克隆抗体溶液；②封闭液(含1%牛血清 白蛋白(BSA)的10mmol/L PBS(pH 7.4));③人工AFB!抗原溶液； AFB!标准溶液；⑤包 被缓冲液(pH 9. 6的10mmol/L PBS);⑥洗涤液(含0. 05% Tween20的10mmol/L PBS(pH 7.4));⑦银增强液(组成见2.2);⑧银溶出液(1 : 3HN03(v : v)溶液)；⑨化学本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种纳米金标记黄曲霉毒素Ｂ↓［１］的新型检测方法，其特征在于：（１）采用纳米金标记ＡＦＢ↓［１］人工抗原，使其与ＡＦＢ１标准抗原直接竞争同固定化抗体发生免疫反应；（２）加入银增强溶液，以金为核沉积生长银，通过检测吸光度来确定纳米金表面沉积的银的量，从而对ＡＦＢ↓［１］进行间接定量检测。（３）进一步将银化学溶出，采用溶出化学发光检测技术，通过二次信号放大，实现了ＡＦＢ↓［１］的超灵敏化学发光检测。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王周平，李井泉，段诺，吴世嘉，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：32[中国|江苏]