一种水稻秸秆水解液培养基及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种水稻秸秆水解液培养基及其应用，所述水稻秸秆水解液培养基由水稻秸秆水解液、木糖和肌醇组成。本发明专利技术还加强了工程菌株的木糖还原酶

【技术实现步骤摘要】
一种水稻秸秆水解液培养基及其应用


[0001]本专利技术涉及一种水稻秸秆水解液培养基及其制备方法与其在工程菌发酵合成葡萄糖二酸中的应用。

技术介绍

[0002]葡萄糖二酸(D
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glucaric acid，GA)及其衍生物具有广泛的应用价值，其对β
‑
葡萄糖醛酸酶具有抑制作用，应用在保健品中具有清除人体内的致癌物质等作用；GA因其结构优势可应用于聚合物的生产，并由于其生物可降解的特性，在工业领域广受青睐，曾被美国能源部确定为“最具价值的生物炼制产品”之一。
[0003]化学法制备葡萄糖二酸常用硝酸氧化及以2，2，6，6
‑
四甲基哌啶氧化物(TEMPO)为催化剂的共催化氧化等，具有投入高、得率低，同时产生的废气废液对环境造成污染等劣势。通过在大肠杆菌中异源表达来源于酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中的肌醇
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磷酸合成酶基因(Ino1)、来源于小鼠中的肌醇氧化酶基因(MIOX)以及来源于丁香假单胞菌(Pseudomonas syringa本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种水稻秸秆水解液培养基，其特征在于所述水稻秸秆水解液培养基采用如下方法制备：(1)将水稻秸秆粉末与0.25
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1wt％硫酸水溶液混合，121℃反应20
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60min，所得反应液过滤，得到滤渣A和滤液A；所述硫酸水溶液的体积以所述水稻秸秆粉末的质量计为5
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10mL/g；(2)将步骤(1)所述滤液A用Ca(OH)2调节pH至10.0，静置2
‑
5h后过滤，所得滤液即为水解液A；(3)将步骤(1)所述滤渣A与0.25
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1wt％的NaOH水溶液混合，40
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60℃摇床振荡10
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15h，过滤，所得滤液即为水解液B；所述NaOH水溶液的体积以步骤(1)中所述水稻秸秆粉末的质量计为5
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10mL/g；(4)将步骤(2)所述水解液A和步骤(3)所述水解液B混合，调节pH至5.5，加入固体纤维素酶，50℃下摇床震荡10
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15h，离心，所得上清液即为水稻秸秆水解液；(5)检测步骤(4)所述的水稻秸秆水解液中葡萄糖和木糖的检测浓度，将所述水稻秸秆水解液115℃高温灭菌20
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30min后，补加木糖使得其中葡萄糖和木糖的浓度比为1：1
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7，加入终浓度为15
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60mM的肌醇，得到所述水稻秸秆水解液培养基。2.如权利要求1所述的水稻秸秆水解液培养基在发酵培养重组酵母生产葡萄糖二酸中的应用，其特征在于：所述重组酵母以酿酒酵母BY4741为起始菌株进行如下改造得到：将木糖异构酶基因XLYA3和木酮糖激酶基因XKS1的表达盒插入GRE3位点，将核酮糖
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磷酸差向异构酶基因RPE1和半乳糖感应蛋白基因GAL3*的表达盒插入ASC1位点，将亮氨酸基因LEU4和半乳糖转运蛋白基因GAL2*的表达盒插入PHO13位点，敲除GAL80基因，将肌醇
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磷酸合成酶基因INO1的表达盒分别插入OPI1位点和PFK2位点，将木糖异构酶基因XLYA3的表达盒插入ZWF1位点，将NADH氧化酶基因NOXE的表达盒插入PGI1位点，将肌醇氧化酶基因MIOX4和醛酸脱氢酶基因UDH的表达盒插入16SrDNA位点，得到所述重组酵母；所述核酮糖<...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙杰，刘倩莉，魏春，郑建永，
申请(专利权)人：浙江工业大学，
类型：发明
国别省市：