一种测定丙氨酰谷氨酰胺原料药中有关物质的高效液相色谱方法技术

本发明专利技术提供了一种测定丙氨酰谷氨酰胺原料药中有关物质的高效液相色谱方法，采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，能够有效的分离丙氨酰谷氨酰胺有关物质，包括降解杂质和工艺杂质，且该方法的精密度高，柱子的使用寿命长，能够更好的控制丙氨酰谷氨酰胺原料药的产品质量。的产品质量。

【技术实现步骤摘要】
一种测定丙氨酰谷氨酰胺原料药中有关物质的高效液相色谱方法


[0001]本专利技术属于分析检测
，涉及一种测定丙氨酰谷氨酰胺原料药中有关物质的高效液相色谱方法。

技术介绍

[0002]L
‑
丙氨酰
‑
L
‑
谷氨酰胺又称丙谷二肽，分子式为C8H
15
N3O4，是白色或类白色的疏松块状物。丙氨酰谷氨酰胺是肠外营养的一个组分，适用于需要补充谷氨酰胺的病人，比如处于分解代谢或高代谢状况的病人。
[0003]丙氨酰谷氨酰胺原料药质量标准在《中国药典》2020版(二部)中有收录，其有关物质检测方法：采用氨基键合硅胶为填充剂的色谱柱。当前中国药典方法存在的挑战具体为：色谱柱的使用寿命短、方法重现性差、杂质分离度不佳甚至无法分离。

技术实现思路

[0004]针对现有的技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种测定丙氨酰谷氨酰胺原料药中有关物质的高效液相色谱方法，采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，使用寿命更长，重现性更佳，对杂质的分离效果更好，检测灵敏度更高。
[0005]为实现专利技术目的，本专利技术采取如下的技术方案：
[0006]一种丙氨酰谷氨酰胺原料药有关物质的高效液相色谱方法，包括如下步骤：
[0007](1)配制溶液：
[0008]a、稀释剂：纯化水；
[0009]b、供试品溶液：取丙氨酰谷氨酰胺原料药适量，加溶剂稀释，作为供试品溶液；c、对照品溶液：取丙氨酰谷氨酰胺原料药适量，加溶剂稀释，作为对照品溶液；d、系统适用性溶液：取丙氨酰谷氨酰胺杂质即丙氨酰按谷氨酰胺适量，加溶剂稀释，作为系统适用性溶液；
[0010](2)检测：
[0011]分别取供试品溶液、对照品溶液、系统适用性溶液注入液相色谱仪，记录色谱图，按加校正因子的主成分外标法计算；
[0012]色谱条件如下：
[0013]色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；
[0014]检测波长：200nm
±
2nm；
[0015]流速：0.9～1.1ml/min；
[0016]柱温：32～34℃；
[0017]进样器温度：2～8℃
[0018]进样体积：10～50μL；
[0019]流动相：磷酸盐缓冲溶液
‑
乙腈
[0020]洗脱方式：等度洗脱。
[0021]进一步地，所述的流动相的配置方法为：取磷酸二氢钾1.36g，加水1000ml使溶解，用磷酸溶液调节pH值至2.1
±
0.05，加乙腈11.5ml
±
0.5ml，加辛烷磺酸钠0.108g，溶解后混匀。
[0022]进一步地，所述步骤(1)中的供试品溶液的浓度为1～3mg/ml；对照品溶液的浓度为0.8～4μg/ml；系统适用性溶液的主成分浓度为1～4mg/ml，杂质浓度为0.8～4μg/ml。
[0023]作为优选，系统适用性溶液的主成分浓度的浓度为2mg/ml。
[0024]作为优选，所述步骤(2)中流速为1.0ml/min，柱温为33℃，进样器温度5℃，进样体积为20μL。
[0025]进一步地，所述步骤(2)中检测方法的色谱柱规格为Inertsil ODS
‑
3V，5μm，4.6
×
250mm；
[0026]与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：
[0027]本专利技术提供的丙氨酰谷氨酰胺原料药有关物质检测方法，能够有效的分离丙氨酰谷氨酰胺有关物质，包括降解杂质和工艺杂质，且该方法的精密度高，柱子的使用寿命长，能够更好的控制丙氨酰谷氨酰胺原料药的产品质量。
附图说明
[0028]图1为实施例1中的中国药典收载方法的液相色谱图；
[0029]图2为实施例1中的本申请方法的液相色谱图；
[0030]图3为实施例2系统适用性溶液的液相色谱图；
[0031]图4为实施例2供试品溶液的液相色谱图。
具体实施方式
[0032]为是本专利技术实施例的目的、技术方案和技术效果更加清楚，下面将对本专利技术实施例中的技术方案晶型清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本专利技术一部分实施例。结合本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0033]本专利技术的描述中，所涉及的各种仪器与材料说明如下：
[0034]1、材料
[0035]丙氨酰谷氨酰胺对照品(中国食品药品检定研究院，批号140702
‑
202005)；丙氨酰谷氨酰胺原料药(精晶药业股份有限公司，批号C582204006)；环
‑
(L
‑
丙氨酰
‑
L
‑
谷氨酰胺)(中国食品药品检定研究院，批号140702
‑
202005)；环
‑
(L
‑
丙氨酰
‑
L
‑
谷氨酸)(中国食品药品检定研究院，批号140761
‑
201903)；L
‑
焦谷氨酰
‑
L
‑
丙氨酸(中国食品药品检定研究院，批号140766
‑
201803)；L
‑
焦谷氨酸(中国食品药品检定研究院，批号140762
‑
202103)；D
‑
丙氨酰
‑
L
‑
谷氨酰胺(中国食品药品检定研究院，批号140763
‑
201602)；L
‑
丙氨酰
‑
L
‑
谷氨酸(中国食品药品检定研究院，批号140765
‑
201702)；L
‑
丙氨酰
‑
L
‑
丙氨酰
‑
L
‑
谷氨酰胺(上海柯维化学技术有限公司，批号30175
‑
A6)；环状亚胺(QCC，批号13
‑
JAN
‑
22
‑
33)；丙氨酰
‑
谷氨酰
‑
丙氨酰
‑
谷氨酰胺(QCC，批号13
‑
JAN
‑
22
‑
27)；丙氨酰
‑
(γ
‑
谷氨酰)
‑
丙氨酰
‑
谷氨酰胺(QCC，批号24
‑
NOV
‑
20
‑
28)。
[0036]2、主要仪器
[0037]Agilent1260高效液相色谱仪；DAD检测器。
[0038]3、已知杂质的化学结构式
[0039][00本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种测定丙氨酰谷氨酰胺原料药中有关物质的高效液相色谱方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)配制溶液：a、稀释剂：纯化水；b、供试品溶液：取丙氨酰谷氨酰胺原料药适量，加溶剂稀释，作为供试品溶液；c、对照品溶液：取丙氨酰谷氨酰胺原料药适量，加溶剂稀释，作为对照品溶液；d、系统适用性溶液：取丙氨酰谷氨酰胺杂质即丙氨酰按谷氨酰胺适量，加溶剂稀释，作为系统适用性溶液；(2)检测：分别取供试品溶液、对照品溶液、系统适用性溶液注入液相色谱仪，记录色谱图，按加校正因子的主成分外标法计算；色谱条件如下：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；检测波长：200nm
±
2nm；流速：0.9～1.1ml/min；柱温：32～34℃；进样器温度：2～8℃进样体积：10～50μL；流动相：磷酸盐缓冲溶液
‑
乙腈；洗脱方式：等度洗脱。2.根据权利要求1所述的一种测定丙氨酰谷氨酰胺原料药中有关物质的高效液相色谱方法，其特征在于，所述的流动相的配置方法为：取磷酸二氢钾1.36g，加水1000ml使溶解，用磷酸溶液调节...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘思凡，金马成伟，浦俊华，
申请(专利权)人：新美誉杭州生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：