Cldn5基因在调控认知障碍中的功能及应用制造技术

本发明专利技术涉及Cldn5基因在调控认知障碍中的功能及应用。具体地，本发明专利技术实验证明了Cldn5基因和/或其表达产物是认知障碍的风险因子；提供了增加Cldn5基因表达水平在制备和筛选治疗认知障碍的产品中的应用。认知障碍的产品中的应用。认知障碍的产品中的应用。

【技术实现步骤摘要】
Cldn5基因在调控认知障碍中的功能及应用


[0001]本专利技术属于生物医药领域，具体涉及Cldn5基因在认知障碍诊断和治疗中的应用。

技术介绍

[0002]认知障碍(Cognitive disorders，简称CDs)，也称为神经认知障碍 (neurocognitive disorders，简称NCDs)，是一种主要影响认知能力(包括学习、记忆、感知和问题解决等)的心理健康障碍。一般被定义为：执行功能、学习和记忆、感知运动功能、语言、复杂注意力和社会认知等6种认知能力缺陷，通常代表为衰退，并可能有潜在的脑病理。后天形成的有阿尔茨海默病、亨廷顿氏舞蹈症、创伤性脑损伤(TBI)、帕金森症、朊病毒疾病和由于艾滋病毒感染所引起的神经认知障碍等；先天形成的则多见于发育迟缓（如自闭症谱系）。
[0003]诱导认知障碍的机制十分复杂，目前临床上尚不能够完全预防和治疗认知功能异常。内环境稳态是维护脑结构和功能的基本条件，而血脑屏障 (Blood
‑
brain barrier, BBB)则是维持该条件的重要结构基础。应激负荷人群和认知障碍患者均呈现一定程度的BBB泄漏；应激引起的BBB损伤可进一步影响氨基酸转运、免疫细胞迁移或炎性因子积聚，引发脑内环境稳态失衡，导致不同类型细胞及不同脑区间的交流与连接异常。然而，目前对于应激致认知损伤过程中下BBB功能发生异常的调控机制仍未完全阐明。找到并修复BBB损伤的关键节点分子是揭示应激性认知障碍致病机制和探索应激性认知障碍的临床治疗手段的关键所在。相邻内皮细胞之间彼此融合构成的闭锁结构即紧密连接 (Tight junction, TJ) 是BBB发挥正常生理功能的结构基础。之前的研究发现，Cldn5等TJ分子对于维持TJ结构的完整性和BBB的低通透性至关重要，TJ蛋白的表达失调或活性异常可导致BBB损伤。然而上述研究对TJ蛋白
‑
BBB
‑
应激性认知障碍之间的内在机制缺少深刻的解释。
[0004]因此，针对认知障碍相关疾病的研究还需要进一步改进。

技术实现思路

[0005]本专利技术的第一方面，提供了一种认知障碍相关疾病的生物标志物，所述的生物标志物为紧密连接分子Claudin
‑
5（Cldn5分子）。
[0006]优选的，所述的Cldn5分子包括CLDN5蛋白、Cldn5基因。
[0007]优选的，所述的生物标记物的样本来源于血液、脑脊液或脑组织。
[0008]进一步优选的，所述的生物标志物的样本来源于脑组织中的前额叶皮层（Prefrontal cortex，PFC）。
[0009]优选的，所述的认知障碍相关疾病包括但不限于应激性认知障碍、阿尔茨海默病、亨廷顿氏舞蹈症、创伤性脑损伤(TBI)、帕金森症、朊病毒疾病或由于艾滋病毒感染所引起的神经认知障碍。
[0010]本专利技术的第二方面，提供了一种上述第一方面所述的生物标志物的检测试剂，所述的检测试剂包括：
1）检测CLDN5蛋白表达水平的试剂；2）检测Cldn5基因表达水平的试剂。
[0011]根据具体实施方式的需要，所述的试剂可以是现有技术中任一试剂，只要能检测Cldn5基因，例如Cldn5的mRNA表达水平和/或CLDN5蛋白表达水平即可。
[0012]优选的，所述的检测CLDN5基因表达水平的试剂包括引物和探针，和/或，所述的检测Cldn5蛋白表达水平的试剂包括抗体或酶的底物。
[0013]优选的，所述的检测CLDN5蛋白表达水平包括使用CLDN5蛋白抗体（购买自thermofisher scientific，货号35
‑
2500）、酶的底物，或者，使用ELISA试剂盒（购买自华美生物，货号CEB
‑
EL005507MO）。
[0014]优选的，所述的检测Cldn5基因的mRNA的引物包括正向引物（SEQ ID NO：1）：5
’‑
ACTCTTTGTTACCTTGACCGG
‑3’
和/或反向引物（SEQ ID NO：2）：5
’‑
CAGCTCGTACTTCTGTGACAC
‑3’
。
[0015]优选的，所述的检测Cldn5基因的mRNA的探针（SEQ ID NO：3）：5
’‑
TGAGTGCTACCCGTGCCTTAACTG
‑3’
。
[0016]本专利技术的第三方面，提供了一种上述第二方面所述的检测试剂在制备诊断认知障碍相关疾病的产品中的应用。
[0017]优选的，所述的产品包括但不限于诊断试剂盒、基因芯片、抗体，引物和（或）探针。
[0018]本专利技术的第四方面，提供了一种诊断产品，所述的诊断产品包括上述第二方面的检测试剂。
[0019]优选的，所述诊断产品包括诊断试剂盒、基因芯片、抗体，引物和（或）探针。
[0020]本专利技术的第五方面，提供了一种上述第一方面的生物标志物的调节试剂，所述的调节试剂提高CLDN5蛋白表达水平，和/或，Cldn5基因表达水平。
[0021]根据具体实施方式的需要，所述的调节试剂可以是现有技术中任一试剂，只要能调节Cldn5基因的mRNA表达水平和/或CLDN5蛋白表达水平即可。
[0022]在本专利技术的一个具体实施方式中，所述的调节试剂包括：1）CLDN5蛋白；2）包含Cldn5基因的过表达载体；促进Cldn5基因表达的调节因子。
[0023]进一步优选的，所述的促进Cldn5基因表达调节因子包括但不限于增强子、启动子等等。
[0024]本专利技术的第六方面，提供了一种上述第五方面的调节试剂在制备治疗认知障碍相关疾病的产品中的应用。
[0025]根据具体实施方式的需要，所述的应用还包括治疗认知障碍相关疾病的并发症。
[0026]本专利技术的第七方面，提供了一种药物或药物组合物，所述的药物或药物组合物包括上述第五方面的调节试剂。
[0027]本专利技术的第八方面，提供了一种阿尔兹海默症（AD）的治疗药物在制备治疗应激性认知障碍的产品中的应用。
[0028]优选的，所述治疗药物提高CLDN5蛋白表达水平，和/或，Cldn5基因表达水平。
[0029]更优选的，所述治疗药物包括多奈哌齐。
[0030]本专利技术的第九方面，提供了一种上述第一方面的生物标志物作为靶点在筛选诊
断、治疗和/或预后评估认知障碍相关疾病的产品中的应用。
[0031]优选的，所述的筛选包括筛选CLDN5蛋白表达水平和/或Cldn5基因表达水平的检测试剂作为诊断和/或预后评估认知障碍相关疾病的产品，或者，所述的筛选包括筛选提高CLDN5蛋白表达水平、和/或Cldn5基因表达水平的调节试剂作为治疗认知障碍相关疾病的产品。
[0032]本专利技术的第十方面，提供了一种治疗认知障碍相关疾病的方法。
[0033]优选的，所述的方法包本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种认知障碍相关疾病的生物标志物，其特征在于，所述的生物标志物为Cldn5分子。2.根据权利要求1所述的生物标志物，其特征在于，所述的Cldn5分子包括CLDN5蛋白、Cldn5基因。3.权利要求1
‑
2任一所述的生物标志物的检测试剂，其特征在于，所述的检测试剂包括：1）检测CLDN5蛋白表达水平的试剂；2）检测Cldn5基因表达水平的试剂。4.根据权利要求3所述的检测试剂，其特征在于，所述的检测CLDN5基因表达水平的试剂包括引物和探针，和/或，所述的检测Cldn5蛋白表达水平的试剂包括抗体或酶的底物。5.根据权利要求4所述的检测试剂，其特征在于，检测Cldn5基因的引物和/或探针包括SEQ ID NO：1和/或2所示的引物；和/或包括SEQ ID NO：3所示的探针。6.权利要求3
‑
5任一所述的检测试剂在制备诊断认知障碍相关疾病的产品中的应用。7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述的生物标记物的样本来源于血液、脑脊液或脑组织。8.一种诊断产品，其特征在于，所述的诊断产品包括权利要求3
‑
5任一所述的检测试剂。9.权利要求1
‑
2任一所述的生物标志物的调节试剂，其特征在于，所述的调节试剂提高CLDN5蛋白表达水平，和/或，Cldn5基因表达水平。10.根据权利要求9所述的调节试剂，其特征在于，所述的调节试剂包括：1）CLDN5蛋白；2）包含Cldn5基因的过表达载体；促进Cldn5基因表...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙兆炜，赵云，钱令嘉，谢方，王雪，吴雨涵，孙照鑫，
申请(专利权)人：中国人民解放军军事科学院军事医学研究院，
类型：发明
国别省市：