miR-3074-5p作为宫内生长受限标志物和治疗靶点的应用制造技术

本发明专利技术公开了miR

【技术实现步骤摘要】
miR
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3074
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5p作为宫内生长受限标志物和治疗靶点的应用


[0001]本专利技术属于生物医学
，具体来说，是关于miR
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5p作为宫内生长受限标志物和治疗靶点的应用。

技术介绍

[0002]炎症因子介导的母胎免疫耐受平衡状态对妊娠建立和维持至关重要，其失衡将导致不良妊娠结局。在动物和人类中进行的大多数相关研究表明，一定程度的子宫局部或全身性的炎症水平对胚胎着床和妊娠都是必要的。然而，如果在体内炎症状态失衡，变得过于微弱或过度，会导致如反复自然流产、宫内生长受限、先兆子痫、早产等妊娠并发症。近年来不断有研究探讨外周血中IFN
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γ、TNF
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α、IL
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6、IL
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17、IL
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1β、MCP
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1、IL
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4、IL
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10等炎症因子水平以及TH1/TH2型细胞因子平衡在临床反复植入失败、复发性流产、子痫前期、早产、妊娠期糖尿病等病理妊娠预测中的参考价值。然而，由于机体内免疫稳态调控的复杂性，不同炎症因子在妊娠中的作用还存在争议，需要进一步明确相关调控机制，因而外周血中炎症相关的生物标志物作为病理妊娠检测指标的应用还存在难度，急需新的特异性检测标志物的研究开发。
[0003]微小RNA(microRNAs，miRNAs)是一类由21～25个核苷酸组成的小分子非编码RNA，其主要是通过与靶基因转录产物mRNA的3
′
UTR特异性位点互补结合而抑制靶基因的表达，是表观遗传调控的重要机制之一。妊娠妇女血浆中miRNAs水平比未妊娠妇女显著升高，而这些miRNAs被认为来源于胎盘滋养层细胞所释放的外泌体，很有可能成为预测妊娠结局的特异性标志物。
[0004]miR
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5p是目前发现的一种miRNAs，参与多个靶基因的表达调控，在人体中序列为guuccugcugaacugagccag，小鼠中序列为guuccugcugaacugagccagu。目前关于miR
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5p的研究发现其与类风湿性关节炎、心肌纤维化等疾病相关，可作为诊断的潜在分子标记物。还有研究发现miR
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5p胎盘组织中miR
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5p的异常低表达可能通过诱导p27的表达而参与子痫前期的病理过程(顾艳,乔磊,范卓然,顾文文,盛红娜,王建梅,华绍芳,张璇.miR
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5p及其靶基因p27在子痫前期胎盘组织中的异常表达[J].中华生殖与避孕杂志,2021,41(09):812
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821)。

技术实现思路

[0005]本专利技术在构建一种新的miR
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5p过表达小鼠模型的基础上，通过对miR
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5p过表达小鼠孕第7.5天外周血炎症因子水平的研究，发现miR
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5p过表达可以提高孕小鼠外周血中炎症因子的水平。接着，专利技术人通过对miR
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5p敲入小鼠模型孕第13.5天和孕第16.5天平均胚胎吸收率的研究，发现miR
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5p过表达导致小鼠胚胎宫内生长受限，也叫胎儿生长受限。尾静脉注射miR
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5p激动剂以及对人巨噬细胞体外诱导模型和小鼠原代骨髓诱导巨噬细胞模型过表达miR
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5p的实验进一步证实了上述结论。
[0006]基于以上发现，本专利技术提供了一种可作为宫内生长受限检测标志物和治疗靶点的
生物标记物miR
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5p及其用途。
[0007]因此，本专利技术的第一个目的在于，提供miR
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5p的一种应用，用于作为宫内生长受限的检测标志物。
[0008]根据本专利技术，所述作为检测标志物是检测miR
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5p是否过表达。
[0009]作为本专利技术的miR
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5p的应用的进一步改进，所述作为检测标志物是用于制备诊断试剂或试剂盒。
[0010]根据本专利技术，所述诊断试剂或试剂盒是用于检测外周血中miR
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5p是否高表达。
[0011]本专利技术的第二个目的在于，提供miR
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5p的另一种应用，用于作为靶点筛选miR
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5p的抑制剂。
[0012]本专利技术的有益效果是：本专利技术建立的miR
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5p过表达小鼠模型是促炎因子水平过度激活的病理妊娠体内研究模型，并且本专利技术提供了两种模型建立方法，分别为基因编辑和尾静脉注射miR
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5p激动剂的方法。而基于miR
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5p过表达对小鼠外周血炎症因子水平和胚胎生长发育的影响，miR
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5p可以被认为是宫内生长受限等病理妊娠检测标志物和治疗靶点。因此本专利技术为宫内生长受限的检测和治疗提供了新的体内研究模型，为临床检测提供了新的生物标志物，为病理妊娠治疗提供了新的靶点。
附图说明
[0013]图1为实施例1的鼠尾DNA电泳结果图。
[0014]图2为小鼠孕7.5天血清中炎症因子浓度的检测结果图。
[0015]图3为小鼠孕13.5天妊娠表型观察图。
[0016]图4为小鼠孕16.5天妊娠表型观察图。
[0017]图5为尾静脉注射给药后小鼠孕8.5天血清中炎症因子浓度检测结果图。
[0018]图6为THP1细胞中细胞因子表达量的qPCR检测结果图。
[0019]图7为BMDM细胞中细胞因子表达量的qPCR检测结果图。
具体实施方式
[0020]以下结合具体实施例，对本专利技术作进一步说明。应理解，以下实施例仅用于说明本专利技术而非用于限定本专利技术的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件进行。以下实施例中，除另有说明外，内参miR
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39a和miR
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5p的逆转录和定量PCR引物来源为广州锐博生物技术有限公司。
[0021]本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.miR
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5p的应用，其特征在于，用于作为宫内生长受限的检测标志物。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述作为检测标志物是检测miR
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5p是否过表达。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述作为检测标志物...

【专利技术属性】
技术研发人员：顾文文，杨龙，石燕，史家欣，张璇，沈志敏，王健，
申请(专利权)人：上海市生物医药技术研究院，
类型：发明
国别省市：