ALDH1A1和AMIGO2基因在制备房颤诊断和干预产品中的应用制造技术

本发明专利技术公开了ALDH1A1和AMIGO2基因在制备房颤诊断和干预产品中的应用。采集房颤患者外周血白细胞，同时收集不同年龄段无房颤人群的外周血白细胞作对照，RT

【技术实现步骤摘要】
ALDH1A1和AMIGO2基因在制备房颤诊断和干预产品中的应用


[0001]本专利技术涉及房颤诊断和干预产品
，特别涉及ALDH1A1和AMIGO2基因在制备房颤诊断和干预产品中的应用。

技术介绍

[0002]房颤是临床中最为常见的心律失常。
[0003]当前，房颤的筛查手段主要包括脉搏触诊、血压测量、智能手环、可穿戴式心电监测设备、心电图和动态心电图等。脉搏触诊、血压测量需要一定的经验，且敏感性不高；智能手环、可穿戴式心电监测设备价格较昂贵；心电图和动态心电图需要在医疗机构进行，检查不方便，且对于房颤发作次数少的阵发性房颤患者容易漏诊。血液生物标志物因其采样简单、检测方便，被广泛用于疾病的早期诊断和筛查，但房颤还缺乏特异性的生物标志物。此外，虽然随着射频消融手术、左心耳封堵术等新技术的不断开展和推广，房颤的治疗手段得到了长足的发展，但目前仍缺乏特异性的药物，现有的抗凝药、节律控制药物只是为缓解症状和减少并发症。因此，为了有效提高房颤的诊断率，丰富房颤的干预手段，以便减少房颤的危害，临床亟需找到房颤的血清标志物和干预靶点。
[0004]酰脱氢酶家族成员A1(Aldehyde dehydrogenase 1family member A1,ALDH1A1)在肿瘤干细胞中高表达，是乳腺癌、前列腺癌、结肠癌和肺癌的生物标志物，在促进肿瘤血管生成和转移、获得抗癌药物耐药等方面发挥重要作用。此外，ALDH1A1可调节急性早幼粒细胞白血病中视黄酸(Retinoic Acid,RA)的生物合成和RA信号传导。最近发现，ALDH1A1与心脏发育和心肌梗死后的保护作用有关。然而，ALDH1A1在房颤中的作用尚无报道。本专利技术提出了ALDH1A1可能作为房颤诊断的生物标志物或干预靶点，ALDH1A1拮抗剂或其功能类似物有望用于制备治疗房颤的药物。
[0005]Ig样结构域2黏附分子(Adhesion molecule with Ig like domain 2,AMIGO2)为AMIGO家族中的一员，是一种含6个氨基酸重复序列的穿膜黏蛋白。AMIGO2基因突变有可能导致第一、二腮弓综合征。研究发现，AMIGO2在视网膜细胞树突发育中起重要作用，其高表达可提高胃腺癌细胞黏附能力，降解细胞外基质和破坏基底膜，从而促使胃癌的发生发展。此外，AMIGO2蛋白高表达与前列腺癌、口腔癌、宫颈癌和肝癌的发生发展密切相关，其可能是一个潜在的肿瘤治疗靶点。新近发现，AMIGO2对心脏缺血后心功能的保护亦具有重要作用。然而，AMIGO2在房颤中的作用尚无相关研究报道。本专利技术提出了AMIGO2可能作为房颤诊断的生物标志物或干预靶点，AMIGO2拮抗剂或其功能类似物有望用于制备治疗房颤的药物。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的是提供ALDH1A1和AMIGO2基因在制备房颤诊断和干预产品中的应用，以解决
技术介绍
中提出的问题，方便推广。
[0007]为了达到上述专利技术目的，本专利技术采用的技术方案为：
[0008]ALDH1A1和AMIGO2基因在制备房颤诊断和干预产品中的应用，所述ALDH1A1和AMIGO2基因可作为房颤诊断的生物标志物。
[0009]进一步的，诊断方法是通过对房颤患者进行外周血白细胞提取和RT
‑
qPCR检测，并将房颤患者外周血白细胞中的ALDH1A1和AMIGO2基因的mRNA水平与正常人进行对比。
[0010]进一步的，与正常人进行对比，房颤患者外周血白细胞中的ALDH1A1和AMIGO2基因的mRNA水平显著降低。
[0011]一种诊断房颤的产品，所述的产品包括检测ALDH1A1和AMIGO2基因及其表达产物的表达水平的检测试剂盒。
[0012]进一步的，所述检测试剂盒包括ALDH1A1或AMIGO2的蛋白抗体。
[0013]进一步的，所述检测试剂盒包括带有可检测标记的核酸探针，所述可检测标记包括生色基团、化学发光基团、荧光基团、同位素或酶。
[0014]一种治疗房颤的产药物，包括能够促进ALDH1A1或AMIGO2基因表达或改变ALDH1A1或AMIGO2表达功能的试剂。
[0015]本专利技术的有益效果为：
[0016]本专利技术ALDH1A1和AMIGO2基因在制备房颤诊断和干预产品中的应用，采集房颤患者外周血白细胞，同时收集不同年龄段无房颤人群外周血白细胞作为对照，RT
‑
qPCR检测ALDH1A1和AMIGO2基因表达，发现房颤患者组AMIGO2和ALDH1A1的表达水平显著低于对照，提示ALDH1A1和AMIGO2可能是房颤的保护因素或干预靶点，ALDH1A1和AMIGO2功能类似物有望用于制备预防或治疗房颤的药物；此外，ROC曲线分析显示AMIGO2和ALDH1A1基因的AUC面积均大于0.75，提示AMIGO2和ALDH1A1对房颤具有较高的诊断价值，单独或者联合可以用于房颤的诊断，有望成为房颤的生物标志物。
附图说明
[0017]图1为本专利技术ALDH1A1和AMIGO2基因在制备房颤诊断和干预产品中的应用外周血白细胞中ALDH1A1表达水平示意图及ROC曲线；
[0018]图2为本专利技术ALDH1A1和AMIGO2基因在制备房颤诊断和干预产品中的应用外周血白细胞中AMIGO2表达水平示意图及ROC曲线；
具体实施方式
[0019]根据图1至图2所示，ALDH1A1和AMIGO2基因在制备房颤诊断和干预产品中的应用，ALDH1A1和AMIGO2基因可作为房颤诊断的生物标志物。
[0020]诊断方法是提取房颤患者外周血白细胞进行RT
‑
qPCR检测，并将房颤患者外周血白细胞中ALDH1A1和AMIGO2基因的mRNA表达水平与正常人进行对比，发现房颤患者外周血白细胞中的ALDH1A1和AMIGO2基因表达水平显著降低，随后，对ALDH1A1和AMIGO2基因进行ROC曲线分析，发现AUC面积均大于0.75，提示对房颤有较高的诊断价值。
[0021]实验步骤如下：
[0022]外周血白细胞提取包括以下步骤：
[0023]步骤一：取静脉血3
‑
5ml，EDTA抗凝，2500rpm离心10min；
[0024]步骤二：小心吸取上层血浆，分装到3个0.5ml离心管中；
[0025]步骤三：在血细胞中加入3倍体积的溶血液，摇匀，冰浴15min；
[0026]步骤四：2500rpm离心10min，弃上清；
[0027]步骤五：加入10ml溶血液，摇匀，冰浴15min；
[0028]步骤六：3000rpm离心10min，弃上清；
[0029]步骤七：倒置离心管，去掉残液；
[0030]步骤八：得白细胞，
‑
80℃冻存，避免反复冻融。
[0031]采血至分离白细胞之间间隔时间在室温下放置不超过2h，4℃不超过5h，以防白细胞自溶。...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.ALDH1A1和AMIGO2基因在制备房颤诊断和干预产品中的应用，其特征在于，所述ALDH1A1和AMIGO2基因可作为房颤诊断的生物标志物。2.根据权利要求1所述的ALDH1A1和AMIGO2基因在制备房颤诊断和干预产品中的应用，其特征在于，诊断方法是通过提取房颤患者外周血白细胞进行RT
‑
qPCR检测，并将房颤患者外周血白细胞中的ALDH1A1和AMIGO2基因的mRNA水平与正常人进行对比。3.根据权利要求1所述的ALDH1A1和AMIGO2基因在制备房颤诊断和干预产品中的应用，其特征在于，与正常人进行对比，房颤患者外周血白...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘传斌，范皎，王俏，王静，包丽涛，
申请(专利权)人：中国人民解放军总医院，
类型：发明
国别省市：