提供用于过继性细胞疗法的靶向共刺激的受体制造技术

本发明专利技术涉及一种可用于过继性细胞疗法(ACT)的嵌合共刺激抗原受体(CoStAR)以及包括所述CoStAR的细胞。所述CoStAR可以起到增强对限定抗原的应答的细胞活性调节剂的作用。本发明专利技术还提供了CoStAR蛋白、编码所述CoStAR的核酸和其治疗用途。和其治疗用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】提供用于过继性细胞疗法的靶向共刺激的受体
[0001]相关申请和援引加入
[0002]本申请要求于2020年7月17日提交的美国专利申请序列号63/053,494号的优先权权益，所述美国专利申请的内容通过引用以其整体并入本文。
[0003]参考了于2019年1月22日提交的GB专利申请序列号1900858.0、于2019年12月20日提交的美国专利申请序列号62/951,770、于2020年1月20日提交的国际申请PCT/GB2020/050120和于2020年7月17日提交的美国临时专利申请63/053,498。
[0004]前述申请以及其中引用或在其诉讼期间引用的所有文件(“申请引用文件”)和在申请引用文件中引用或参考的所有文件以及本文引用或参考的所有文件(“本文引用文件”)、本文引用文件中引用或参考的所有文件连同任何制造商的说明书、描述、产品规格、本文或通过引用并入本文的任何文件中提到的任何产物的产物表在此通过引用并入本文，并且可以用于本专利技术的实践中。更具体地，所有引用的文件通过引用并入，其程度如同每个单独的文件专门地且单独地指示为通过引用并入。


[0005]本专利技术涉及一种可用于过继性细胞疗法(ACT)的嵌合共刺激抗原受体(CoStAR)以及包括所述CoStAR的细胞。所述CoStAR可以起到增强对限定抗原的应答的细胞活性调节剂的作用。本专利技术还提供了CoStAR蛋白、编码所述CoStAR的核酸和其治疗用途。

技术介绍

[0006]使用自体T细胞来介导癌症消退的过继性细胞疗法(ACT)在早期临床试验中显示出很大前景。已经采用了几种常用方法，如使用离体扩增的天然存在的肿瘤反应性淋巴细胞或肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)。另外，T细胞可以被基因修饰为将其再靶向到限定肿瘤抗原。这可以通过肽(p)
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主要组织相容性复合体(MHC)特异性T细胞受体(TCR)或肿瘤特异性单链抗体片段(scFv)与T细胞信号传导结构域(例如，CD3ζ)之间的合成融合物的基因转移来完成，后者被称为嵌合抗原受体(CAR)。
[0007]TIL和TCR转移被证明在靶向黑色素瘤时特别好(Rosenberg等人2011；Morgan 2006)，而CAR疗法在治疗某些B细胞恶性肿瘤方面显示出很大前景(Grupp等人2013)。
[0008]共刺激信号可用于实现强大的CAR T细胞扩增、功能、持久性和抗肿瘤活性。CAR疗法在白血病中的成功部分地归因于共刺激结构域(例如CD28或CD137)并入到CAR构建体中，来自所述CAR构建体的信号与由CD3ζ提供的信号协同作用以增强抗肿瘤活性。此观察的基础涉及T细胞激活的经典信号1/信号2范式。此处由TCR复合体提供的信号1与由如CD28、CD137或CD134等共刺激受体提供的信号2协同作用以允许细胞在没有与单独的信号1相关的激活诱导的细胞死亡(AICD)的情况下进行克隆扩增、IL
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2产生和长期存活。此外，信号2的参与增强了通过信号1生成的信号，从而允许细胞对低亲合力相互作用，如在抗肿瘤应答期间遇到的那些相互作用更好地做出应答。
[0009]靶向的共刺激对非基于CAR的T细胞疗法将具有有益影响。例如，将共刺激结构域
掺入到嵌合TCR中已显示出增强T细胞对pMHC(Govers公司(Govers)2014)的应答。虽然肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)利用其内源性TCR来介导肿瘤识别，但其尚不可能对内源性TCR进行工程化。因此，TIL由于肿瘤细胞表达非常少的共刺激配体而受到显著限制。诱导TIL或实际上任何其它过继性T细胞疗法产物的靶向共刺激的能力将是有益的。
[0010]本申请中对任何文件的引用或鉴定并非承认这些文件可用作本专利技术的现有技术。

技术实现思路

[0011]本专利技术提供了新型嵌合共刺激抗原受体(CoStAR)和包括或表达所述CoStAR的细胞，这些对于基于CAR和非基于CAR的T细胞疗法等均是有益的。本专利技术使用表达新型嵌合共刺激受体的细胞以在与限定疾病相关，例如肿瘤相关抗原接合时向T细胞提供共刺激信号。
[0012]已有几个使用分割信号1和信号2以驱动经工程化的T细胞中的抗原特异性应答的报告(Alvarez
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Vallina&Hawkins 1996)。然而，没有人利用全长CD28分子。与截短形式相反，使用如CD28等全长受体具有特定优点。全长受体能够二聚化，使受体能够以其天然形式起作用，实际上嵌合抗原受体未能在以单体形式表达时最佳地起作用(Bridgeman等人2010)。
[0013]在一实施例中，本专利技术的CoStAR在与如疾病相关抗原或肿瘤相关抗原等限定抗原接合时诱导信号2。全长CD28分子含有对于其在结合B7受体家族的成员方面的天然功能至关重要的基序；尽管从串联携带CD28受体和CD3ζ受体的CAR的角度来看，这是潜在危险的，其中CAR通过B7的连接可以触发T细胞激活，但对于携带单独的信号2受体的受体是有益的。一方面，本专利技术提供了一种靶向嵌合共刺激受体(CoStAR)，其包括：与跨膜结构域操作性地连接的胞外抗原结合结构域、第一信号传导结构域和CD40信号传导结构域或其信号传导片段。专利技术人已发现包括CD40信号传导结构域的共刺激受体显示出新颖且经改进的活性谱。
[0014]在本专利技术的某些实施例中，所述CD40信号传导结构域包括SEQID NO:23、SEQ ID NO:24或SEQ ID NO:25。在某些实施例中，所述CD40信号传导片段包括以下、由以下组成或基本上由以下组成：SH3基序(KPTNKAPH(SEQ ID NO:26)、PTNKAPHP(SEQ ID NO:118)或PTNKAPH(SEQ ID NO:119)、TRAF2基序(PKQE(SEQ ID NO:27)、PKQET(SEQ ID NO:120)、PVQE(SEQ ID NO:28)、PVQET(SEQ ID NO:121)、SVQE(SEQ ID NO:29)、SVQET(SEQ ID NO:122))、TRAF6基序(QEPQEINFP(SEQ ID NO:30)或QEPQEINFP(SEQ ID NO:123))、PKA基序(KKPTNKA(SEQ ID NO:31)、SRISVQE(SEQ ID NO:32)或其组合，或者为全长CD40胞内结构域。在某些实施例中，所述CD40信号传导结构域的所述SH3基序、所述TRAF2基序、所述TRAF6基序或所述PKA基序中的一者或多者发生突变。在某些实施例中，所述CD40信号传导结构域的所述SH3基序、所述TRAF2基序、所述TRAF6基序或所述PKA基序中的一者或多者以多个拷贝存在。
[0015]在某些实施例中，所述CoStAR的所述第一信号传导结构域包括受体的信号传导结构域或信号传导片段，例如肿瘤坏死因子受体超家族(TNFRSF)受体，包含但不限于CD2、CD9、CD26、CD27、CD28、CD29、CD38、CD40、CD4本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种嵌合共刺激抗原受体(CoStAR)，其包括：与跨膜结构域操作性地连接的对肿瘤相关抗原(TAA)具有特异性的胞外结合结构域、CD28信号传导结构域和CD40信号传导结构域或其信号传导片段。2.根据权利要求1所述的CoStAR，其中所述CoStAR对FOLR1具有特异性。3.根据权利要求2所述的CoStAR，其中所述胞外结合结构域包括MOV19 scFv。4.一种靶向受试者的表达FOLR1的癌症的方法，所述方法包括施用表达根据权利要求1至3所述的CoStAR的经工程化的免疫细胞。5.根据权利要求4所述的方法，其中所述癌症包括肾癌、肺癌或卵巢癌。6.根据权利要求4或5所述的方法，其中所述经工程化的免疫细胞包括肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)、αβT细胞、γδT细胞或NK T细胞。7.一种嵌合共刺激抗原受体(CoStAR)，其包括：与跨膜结构域操作性地连接的胞外结合结构域、第一信号传导结构域和CD40信号传导结构域或其信号传导片段。8.根据权利要求7所述的CoStAR，其中所述CoStAR不包括信号1信号传导结构域。9.根据权利要求7所述的CoStAR，其中所述第一信号传导结构域包括CD2、CD9、CD26、CD27、CD28、CD29、CD38、CD40、CD43、CD46、CD49d、CD55、CD73、CD81、CD82、CD99、CD100、CD134(OX40)、CD137(41BB)、CD150(SLAM)、CD270(HVEM)、CD278(ICOS)、CD357(GITR)或EphB6的信号传导结构域或信号传导片段。10.根据权利要求7所述的CoStAR，其中所述CD40信号传导片段由以下组成、基本上由以下组成或包括以下：SH3基序(KPTNKAPH，SEQ ID NO:26)、TRAF2基序(PKQE，SEQ ID NO:27；PVQE，SEQ ID NO:28；SVQE，SEQ ID NO:29)、TRAF6基序(QEPQEINFP，SEQ ID NO:30)、PKA基序(KKPTNKA，SEQ ID NO:31；SRISVQE，SEQ ID NO:32)或其组合，或者为全长CD40胞内结构域。11.根据权利要求7所述的CoStAR，其中所述CD40信号传导片段由以下组成、基本上由以下组成或包括以下：PVQET。12.根据权利要求7所述的CoStAR，其中所述CoStAR包括第一信号传导结构域、第二信号传导结构域和CD40信号传导结构域或其信号传导片段。13.根据权利要求12所述的CoStAR，其中所述第二信号传导结构域包括CD2、CD9、CD26、CD27、CD28、CD29、CD38、CD40、CD43、CD46、CD49d、CD55、CD73、CD81、CD82、CD99、CD100、CD134(OX40)、CD137(41BB)、CD150(SLAM)、CD270(HVEM)、CD278(ICOS)、CD357(GITR)或EphB6的信号传导结构域或信号传导片段。14.根据权利要求9所述的CoStAR，其中所述第一信号传导结构域包括全长共刺激结构域。15.根据权利要求7所述的CoStAR，其中所述第一信号传导结构域包括CD28信号传导结构域。16.根据权利要求7所述的CoStAR，其中所述CD40信号传导结构域包括SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:24或SEQ ID NO:25。17.根据权利要求7所述的CoStAR，其中所述胞外结合结构域通过接头和/或间隔子与所述跨膜结构域操作性地连接。
18.根据权利要求16所述的CoStAR，其中所述接头包括约5个至约20个氨基酸。19.根据权利要求16所述的CoStAR，其中所述接头包括AAAGSGGSG(SEQ ID NO:8)。20.根据权利要求16所述的CoStAR，其中所述间隔子包括约10个至约250个氨基酸。21.根据权利要求7所述的CoStAR，其中所述CoStAR包括第二胞外结合结构域。22.根据权利要求21所述的CoStAR，其中所述第二胞外结合结构域包括来自CD8或CD28的配体结合结构域。23.根据权利要求16所述的CoStAR，其中所述间隔子包括一个或多个免疫球蛋白结构域或免疫球蛋白恒定...

【专利技术属性】
技术研发人员：约翰，
申请(专利权)人：英研生物英国有限公司，
类型：发明
国别省市：