【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】人血细胞的选择性裂解
技术介绍
[0001]由血流感染(BSI)引起的败血症是一种危及生命的疾病,伴随着住院率增加。由于诊断延迟会导致多器官衰竭和死亡率增加,因此适当和及时地检测败血症至关重要。聚合酶链反应(PCR)提供了一种快速检测由BSI诱导的败血症中细菌病原体的方法。在基于PCR的败血症诊断中最重要的因素之一是可靠地扩增和检测血液中由病原体产生的低水平核酸拷贝。这就要求PCR达到高的检测灵敏度。
[0002]分子诊断旨在快速检测样品(诸如血液)中的微量病原体(通常是细菌)。然而,血液是一种复杂的基质,并且包括用于适应性免疫系统的白细胞(白血球)、用于氧气运输的红细胞(红血球)和用于伤口愈合的血小板(凝血细胞)。这使得在含有大量细胞物质的样品(诸如全血)中直接检测病原体变得复杂。
[0003]对于基于PCR的方法,新鲜血液样品中的细菌数量理论上足够高,无需进一步培养此类样品内存在的细菌即可检测到。然而,为了及早检测到微量细菌,需要大量血液。尤其是白细胞中的大量DNA显著增加了基于DNA的检测方法的背景。血红蛋白中血红素的存在也会强 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于选择性裂解含有或疑似含有微生物的样品内的真核细胞的方法,所述方法包括以下步骤:a)提供含有或疑似含有微生物的具有真核细胞的样品,b)向所述样品添加非离子型洗涤剂和缓冲剂以获得pH为约9.0或略低的溶液,其中添加的洗涤剂和缓冲剂的体积与样品的体积之间的比率在2∶1与1∶10之间,c)将所述溶液孵育足够长的时间段以裂解所述真核细胞。2.根据权利要求1所述的方法,其中所述非离子型洗涤剂以在0.1%与5%(w/v%或v/v%)之间的范围内的浓度存在。3.根据权利要求2所述的方法,其中所述非离子型洗涤剂以约1%v/v%的浓度存在。4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法,其中所述非离子型洗涤剂为聚多卡醇。5.根据权利要求1至...
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。