结合至钙网蛋白的多功能性分子及其用途制造技术

公开了多功能性分子，其包括i)结合至钙网蛋白的抗原结合结构域；以及以下中的一种、两种或全部：(ii)免疫细胞接合物(例如，选自NK细胞接合物、T细胞接合物、B细胞接合物、树突细胞接合物或巨噬细胞接合物)；(iii)细胞因子分子；和/或(iv)基质修饰部分。另外公开了编码多功能性分子的核酸、产生上述分子的方法以及使用上述分子治疗癌症的方法。用上述分子治疗癌症的方法。用上述分子治疗癌症的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】结合至钙网蛋白的多功能性分子及其用途
相关申请
[0001]本申请要求于2020年8月26日提交的美国临时申请第63/070,769号的权益，其全部内容在此通过引用并入。

技术介绍

[0002]骨髓增生性赘生物(MPN)是一组导致骨髓中血细胞异常生长的病况。常见的骨髓增生性赘生物包括原发性或特发性骨髓纤维化(MF)、原发性血小板增多症(ET)、真性红细胞增多症(PV)和慢性髓性白血病(CML)。原发性骨髓纤维化是一种慢性血癌，其中过多的瘢痕组织在骨髓中形成并损害骨髓产生正常血细胞的能力。考虑到对改进骨髓增生性赘生物(例如骨髓纤维化)治疗的持续需求，高度期望靶向骨髓增生性赘生物的新组合物和治疗。

技术实现思路

[0003]在一方面，本文尤其提供了一种包含多肽分子的组合物，其包含：(i)结合至钙网蛋白(例如，野生型或突变型钙网蛋白)的第一抗原结合结构域，例如，表4、表5、表6、表24、表25、表16、表17、表18或表19的任一者中公开的钙网蛋白靶向性抗原结合结构域，以及(ii)结合至TCRβV的第二抗原结合结构域，例如，表30、表31、表32、表10、表11、表12或表13的任一者中公开的抗TCRβV抗原结合结构域，或结合至NKp30的第二抗原结合结构域，例如，表7、表8、表35、表36、表9、表10或表34中公开的抗NKp30抗原结合结构域。
[0004]在一些实施方案中，多肽分子是多功能性多肽分子。
[0005]在一些实施方案中，多肽分子是多特异性多肽分子。
[0006]在一些实施方案中，第二抗原结合结构域结合至TCRβV。
[0007]在一些实施方案中，第二抗原结合结构域激活T细胞，或第二抗原结合结构域不激活T细胞。
[0008]在一些实施方案中，第二抗原结合结构域结合至TCRβV12或TCRβV6(例如，包含SEQ ID NO:1044的氨基酸序列)。
[0009]在一些实施方案中，第二抗原结合结构域包含如表30、表31、表32、表10、表11、表12或表13中所列的一个或多个氨基酸序列。
[0010]在一些实施方案中，第二抗原结合结构域包含：(a)重链可变区(VH)和/或轻链可变区(VL)，其中：(i)VH包含具有表30、表31、表10、表11、表12或表13中重链互补决定区1(VHCDR1)的氨基酸序列(或具有不超过1、2、3或4个突变(例如，置换、添加或缺失)的序列)的VHCDR1、具有表30、表31、表10、表11、表12或表13中VHCDR2的氨基酸序列(或具有不超过1、2、3或4个突变(例如，置换、添加或缺失)的序列)的VHCDR2，和/或具有表30、表31、表10、表11、表12或表13中VHCDR3的氨基酸序列(或具有不超过1、2、3或4个突变(例如，置换、添加或缺失)的序列)的VHCDR3，(ii)VL包含具有表30、表31、表10、表11、表12或表13中轻链互补决定区1(VLCDR1)的氨基酸序列(或具有不超过1、2、3或4个突变(例如，置换、添加或缺失)的序列)的VLCDR1、具有表30、表31、表10、表11、表12或表13中VLCDR2的氨基酸序列(或具有
不超过1、2、3或4个突变(例如，置换、添加或缺失)的序列)的VLCDR2，和/或具有表30、表31、表10、表11、表12或表13中VLCDR3的氨基酸序列(或具有不超过1、2、3或4个突变(例如，置换、添加或缺失)的序列)的VLCDR3；(b)重链可变区(VH)和/或轻链可变区(VL)，其中：(i)VH包含SEQ ID NO:3A的重链互补决定区1(VHCDR1)氨基酸序列(或具有不超过1、2、3或4个突变(例如，置换、添加或缺失)的序列)、SEQ ID NO:4A的VHCDR2氨基酸序列(或具有不超过1、2、3或4个突变(例如，置换、添加或缺失)的序列)，和/或SEQ ID NO:5A的VHCDR3氨基酸序列(或具有不超过1、2、3或4个突变(例如，置换、添加或缺失)的序列)，和/或(ii)VL包含SEQ ID NO:6A的轻链互补决定区1(VLCDR1)氨基酸序列(或具有不超过1、2、3或4个突变(例如，置换、添加或缺失)的序列)、SEQ ID NO:7A的VLCDR2氨基酸序列(或具有不超过1、2、3或4个突变(例如，置换、添加或缺失)的序列)，和/或SEQ ID NO:8A的VLCDR3氨基酸序列(或具有不超过1、2、3或4个突变(例如，置换、添加或缺失)的序列)；(c)重链可变区(VH)和/或轻链可变区(VL)，其中：(i)VH包含SEQ ID NO:45A的重链互补决定区1(VHCDR1)氨基酸序列(或具有不超过1、2、3或4个突变(例如，置换、添加或缺失)的序列)、SEQ ID NO:46A的VHCDR2氨基酸序列(或具有不超过1、2、3或4个突变(例如，置换、添加或缺失)的序列)，和/或SEQ ID NO:47A的VHCDR3氨基酸序列(或具有不超过1、2、3或4个突变(例如，置换、添加或缺失)的序列)，和/或(ii)VL包含SEQ ID NO:51A的轻链互补决定区1(VLCDR1)氨基酸序列(或具有不超过1、2、3或4个突变(例如，置换、添加或缺失)的序列)、SEQ ID NO:52A的VLCDR2氨基酸序列(或具有不超过1、2、3或4个突变(例如，置换、添加或缺失)的序列)，和/或SEQ ID NO:53A的VLCDR3氨基酸序列(或具有不超过1、2、3或4个突变(例如，置换、添加或缺失)的序列)；和/或(d)重链可变区(VH)和/或轻链可变区(VL)，其中：(i)VH包含SEQ ID NO:48A的重链互补决定区1(VHCDR1)氨基酸序列(或具有不超过1、2、3或4个突变(例如，置换、添加或缺失)的序列)、SEQ ID NO:49A的VHCDR2氨基酸序列(或具有不超过1、2、3或4个突变(例如，置换、添加或缺失)的序列)，和/或SEQ ID NO:50A的VHCDR3氨基酸序列(或具有不超过1、2、3或4个突变(例如，置换、添加或缺失)的序列)，和/或(ii)VL包含SEQ ID NO:54A的轻链互补决定区1(VLCDR1)氨基酸序列(或具有不超过1、2、3或4个突变(例如，置换、添加或缺失)的序列)、SEQ ID NO:55A的VLCDR2氨基酸序列(或具有不超过1、2、3或4个突变(例如，置换、添加或缺失)的序列)，和/或SEQ ID NO:56A的VLCDR3氨基酸序列(或具有不超过1、2、3或4个突变(例如，置换、添加或缺失)的序列)。
[0011]在一些实施方案中，第二抗原结合结构域包含：(a)重链可变区(VH)和/或轻链可变区(VL)，其中：(i)VH包含表30、表31、表10、表11、表12或表13中VH的氨基酸序列(或与其具有至少约77％、80％、85％、90％、95％或99％序列同一性的氨基酸序列)，和/或(ii)VL包含表30、表31、表10、表11、表12或表13中VL的氨基酸序列(或与其具有至少约77％、80％、85％、90％、本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种包含多肽分子的组合物，其包含：(i)结合至野生型或突变型钙网蛋白的第一抗原结合结构域，以及(ii)结合至TCRβV或NKp30的第二抗原结合结构域；其中：(A)所述第一抗原结合结构域包含：(i)重链可变区(VH)，所述重链可变区(VH)包含分别具有表4、表24、表25或表17中重链互补决定区1(VHCDR1)、VHCDR2和VHCDR3的氨基酸序列的VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3；和/或(ii)轻链可变区(VL)，所述轻链可变区(VL)包含分别具有表5、表24、表25或表18中轻链互补决定区1(VHCDR1)、VLCDR2和VLCDR3的氨基酸序列的VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3；(B)所述第二抗原结合结构域包含：(i)VH，所述VH包含分别具有表30、表31、表10、表11、表12或表13中VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3的氨基酸序列的VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3；和/或(ii)VL，所述VL包含分别具有表30、表31、表10、表11、表12或表13中VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3的氨基酸序列的VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3；或(C)所述第二抗原结合结构域包含：(i)VH，所述VH包含分别具有表7、表35、表9、表10或表34中VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3的氨基酸序列的VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3；以及(ii)VL，所述VL包含分别具有表8、表36、表9、表10或表34中的VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3的氨基酸序列的VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3。2.根据权利要求1所述的组合物，其中所述多肽分子是多功能性多肽分子。3.根据权利要求1或2所述的组合物，其中所述多肽分子是多特异性多肽分子。4.根据权利要求1
‑
3中任一项所述的组合物，其中所述第二抗原结合结构域结合至TCRβV。5.根据权利要求4所述的组合物，其中所述第二抗原结合结构域激活T细胞，或所述第二抗原结合结构域不激活T细胞。6.根据权利要求4或5所述的组合物，其中所述第二抗原结合结构域结合至TCRβV12或TCRβV6。7.根据权利要求4
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6中任一项所述的组合物，其中所述第二抗原结合结构域包含如表30、表31、表32、表10、表11、表12或表13中所列的一个或多个氨基酸序列。8.根据权利要求4
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7中任一项所述的组合物，其中所述第二抗原结合结构域包含：(a)VH，所述VH包含分别具有表30、表31、表10、表11、表12或表13中VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3的氨基酸序列的VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3；和/或(ii)VL，所述VL包含分别具有表30、表31、表10、表11、表12或表13中VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3的氨基酸序列的VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3；(b)重链可变区(VH)和/或轻链可变区(VL)，其中：(i)所述VH包含SEQ ID NO:3A的重链互补决定区1(VHCDR1)氨基酸序列、SEQ ID NO:4A的VHCDR2氨基酸序列，以及SEQ ID NO:5A的VHCDR3氨基酸序列，和/或(ii)所述VL包含SEQ ID NO:6A的轻链互补决定区1(VLCDR1)氨基酸序列、SEQ ID NO:7A的VLCDR2氨基酸序列，以及SEQ ID NO:8A的VLCDR3氨基酸序列；(c)重链可变区(VH)和/或轻链可变区(VL)，其中：(i)所述VH包含SEQ ID NO:45A的重链互补决定区1(VHCDR1)氨基酸序列、SEQ ID NO:
46A的VHCDR2氨基酸序列，以及SEQ ID NO:47A的VHCDR3氨基酸序列，和/或(ii)所述VL包含SEQ ID NO:51A的轻链互补决定区1(VLCDR1)氨基酸序列、SEQ ID NO:52A的VLCDR2氨基酸序列，以及SEQ ID NO:53A的VLCDR3氨基酸序列；和/或(d)重链可变区(VH)和/或轻链可变区(VL)，其中：(i)所述VH包含SEQ ID NO:48A的重链互补决定区1(VHCDR1)氨基酸序列(或具有不超过1、2、3或4个置换、添加或缺失的序列)、SEQ ID NO:49A的VHCDR2氨基酸序列(或具有不超过1、2、3或4个置换、添加或缺失的序列)，以及SEQ ID NO:50A的VHCDR3氨基酸序列，和/或(ii)所述VL包含SEQ ID NO:54A的轻链互补决定区1(VLCDR1)氨基酸序列、SEQ ID NO:55A的VLCDR2氨基酸序列，以及SEQ ID NO:56A的VLCDR3氨基酸序列。9.根据权利要求4
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7中任一项所述的组合物，其中所述第二抗原结合结构域包含：(a)重链可变区(VH)和/或轻链可变区(VL)，其中：(i)所述VH包含表30、表31、表10、表11、表12或表13中VH的氨基酸序列(或与其具有至少约77％、80％、85％、90％、95％或99％序列同一性的氨基酸序列)，和/或(ii)所述VL包含表30、表31、表10、表11、表12或表13中VL的氨基酸序列(或与其具有至少约77％、80％、85％、90％、95％或99％序列同一性的氨基酸序列)；(iii)所述VH包含SEQ ID NO:9A的氨基酸序列(或与其具有至少约77％、80％、85％、90％、95％或99％序列同一性的氨基酸序列)，和/或(iv)所述VL包含SEQ ID NO:10A的氨基酸序列(或与其具有至少约77％、80％、85％、90％、95％或99％序列同一性的氨基酸序列)；(b)重链可变区(VH)和/或轻链可变区(VL)，其中：(i)所述VH包含SEQ ID NO:9A的氨基酸序列(或与其具有至少约77％、80％、85％、90％、95％或99％序列同一性的氨基酸序列)，和/或(ii)所述VL包含SEQ ID NO:11A的氨基酸序列(或与其具有至少约77％、80％、85％、90％、95％或99％序列同一性的氨基酸序列)；和/或(c)重链可变区(VH)和/或轻链可变区(VL)，其中：(i)所述VH包含SEQ ID NO:1312A的氨基酸序列(或与其具有至少约77％、80％、85％、90％、95％或99％序列同一性的氨基酸序列)，和/或(ii)所述VL包含SEQ ID NO:1314A的氨基酸序列(或与其具有至少约77％、80％、85％、90％、95％或99％序列同一性的氨基酸序列)。10.根据权利要求4
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7中任一项所述的组合物，其中所述第二抗原结合结构域包含：(a)重链可变区(VH)和/或轻链可变区(VL)，其中：(i)所述VH包含SEQ ID NO:17A的重链互补决定区1(VHCDR1)氨基酸序列、SEQ ID NO:18A的VHCDR2氨基酸序列，以及SEQ ID NO:19A的VHCDR3氨基酸序列，和/或(ii)所述VL包含SEQ ID NO:20A的轻链互补决定区1(VLCDR1)氨基酸序列、SEQ ID NO:21A的VLCDR2氨基酸序列，以及SEQ ID NO:22A的VLCDR3氨基酸序列；(b)重链可变区(VH)和/或轻链可变区(VL)，其中：
(i)所述VH包含SEQ ID NO:57A的重链互补决定区1(VHCDR1)氨基酸序列、SEQ ID NO:58A的VHCDR2氨基酸序列，以及SEQ ID NO:59A的VHCDR3氨基酸序列，和/或(ii)所述VL包含SEQ ID NO:63A的轻链互补决定区1(VLCDR1)氨基酸序列、SEQ ID NO:64A的VLCDR2氨基酸序列，以及SEQ ID NO:65A的VLCDR3氨基酸序列；和/或(c)重链可变区(VH)和/或轻链可变区(VL)，其中：(i)所述VH包含SEQ ID NO:60A的重链互补决定区1(VHCDR1)氨基酸序列、SEQ ID NO:61A的VHCDR2氨基酸序列，以及SEQ ID NO:62A的VHCDR3氨基酸序列，和/或(ii)所述VL包含SEQ ID NO:66A的轻链互补决定区1(VLCDR1)氨基酸序列、SEQ ID NO:67A的VLCDR2氨基酸序列，以及SEQ ID NO:68A的VLCDR3氨基酸序列。11.根据权利要求4
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7中任一项所述的组合物，其中所述第二抗原结合结构域包含：(a)重链可变区(VH)和/或轻链可变区(VL)，其中：(i)所述VH包含SEQ ID NO:15A的氨基酸序列(或与其具有至少约77％、80％、85％、90％、95％或99％序列同一性的氨基酸序列)，和/或(ii)所述VL包含SEQ ID NO:16A的氨基酸序列(或与其具有至少约77％、80％、85％、90％、95％或99％序列同一性的氨基酸序列)；和/或(b)重链可变区(VH)和/或轻链可变区(VL)，其中：(i)所述VH包含：SEQ ID NO:23A的氨基酸序列(或与其具有至少约77％、80％、85％、90％、95％或99％序列同一性的氨基酸序列)，SEQ ID NO:24A的氨基酸序列(或与其具有至少约77％、80％、85％、90％、95％或99％序列同一性的氨基酸序列)，或SEQ ID NO:25A的氨基酸序列(或与其具有至少约77％、80％、85％、90％、95％或99％序列同一性的氨基酸序列)；和/或(ii)所述VL包含：SEQ ID NO:26A的氨基酸序列(或与其具有至少约77％、80％、85％、90％、95％或99％序列同一性的氨基酸序列)，SEQ ID NO:27A的氨基酸序列(或与其具有至少约77％、80％、85％、90％、95％或99％序列同一性的氨基酸序列)，SEQ ID NO:28A的氨基酸序列(或与其具有至少约77％、80％、85％、90％、95％或99％序列同一性的氨基酸序列)，SEQ ID NO:29A的氨基酸序列(或与其具有至少约77％、80％、85％、90％、95％或99％序列同一性的氨基酸序列)，或SEQ ID NO:30A的氨基酸序列(或与其具有至少约77％、80％、85％、90％、95％或99％序列同一性的氨基酸序列)。12.根据权利要求4
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11中任一项所述的组合物，其包含：第一多肽，其包含第一VL和第一CL，
第二多肽，其包含第一VH、第一CH1、第一二聚化结构域和结合至TCRVβ的第一部分，第三多肽，其包含第二VH、第二CH1、第二二聚化结构域和结合至TCRVβ的任选第二部分，第四多肽，其包含第二VL和第二CL，其中：所述第一VL和所述第一VH形成结合至第一钙网蛋白的第一抗原结合结构域，并且所述第二VL和所述第二VH形成结合至第二钙网蛋白的第三抗原结合结构域，任选地其中所述第一和第二钙网蛋白包含SEQ ID NO:6285、D1001或6286的氨基酸序列，任选地其中所述第一和第二钙网蛋白突变型蛋白各自独立地选自：包含SEQ ID NO:6313的氨基酸序列的分子，或包含SEQ ID NO:6314的氨基酸序列的分子，任选地其中所述多功能性分子包含图3A或3B的构型。13.根据权利要求1
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3中任一项所述的组合物，其中所述第二抗原结合结构域结合至NKp30。14.根据权利要求13所述的组合物，其中所述第二抗原结合结构域选自结合至NKp30的抗体分子或配体。15.根据权利要求13或14所述的组合物，其中所述第二抗原结合结构域包含：(i)VH，所述VH包含分别具有表7、表35、表9、表10或表34中VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3的氨基酸序列的VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3；以及(ii)VL，所述VL包含分别具有表8、表36、表9、表10或表34中VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3的氨基酸序列的VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3。16.根据权利要求15所述的组合物，其中所述第二抗原结合结构域包含：(i)重链可变区(VH)，所述重链可变区(VH)包含SEQ ID NO:7313的重链互补决定区1(VHCDR1)氨基酸序列、SEQ ID NO:6001的VHCDR2氨基酸序列，以及SEQ ID NO:7315的VHCDR3氨基酸序列；和/或(ii)轻链可变区(VL)，所述轻链可变区(VL)包含SEQ ID NO:7326的轻链互补决定区1(VLCDR1)氨基酸序列、SEQ ID NO:7327的VLCDR2氨基酸序列，以及SEQ ID NO:7329的VLCDR3氨基酸序列。17.根据权利要求15或16所述的组合物，其中所述第二抗原结合结构域包含：(i)VH，所述VH包含SEQ ID NO:7298或7300
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7304中任一者的氨基酸序列(或与SEQ ID NO:7298或7300
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7304中任一者具有至少约75％、80％、85％、90％、95％或99％序列同一性的氨基酸序列)；和/或(ii)VL，所述VL包含SEQ ID NO:7299或7305
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7309中任一者的氨基酸序列(或与SEQ ID NO:7299或7305
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7309中任一者具有至少约93％、95％或99％序列同一性的氨基酸序列)。18.根据权利要求15
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17所述的组合物，其中所述第二抗原结合结构域包含：(i)VH和VL，所述VH包含SEQ ID NO:7302的氨基酸序列(或与7302具有至少约75％、80％、85％、90％、95％或99％序列同一性的氨基酸序列)，所述VL包含SEQ ID NO:7305的氨基酸序列(或与7305具有至少约75％、80％、85％、90％、95％或99％序列同一性的氨基酸序列)；或(ii)VH和VL，所述VH包含SEQ ID NO:7302的氨基酸序列(或与7302具有至少约75％、
80％、85％、90％、95％或99％序列同一性的氨基酸序列)，所述VL包含SEQ ID NO:7309的氨基酸序列(或与7309具有至少约75％、80％、85％、90％、95％或99％序列同一性的氨基酸序列)。19.根据权利要求15
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18所述的组合物，其中所述第二抗原结合结构域包含：(i)SEQ ID NO:7310的氨基酸序列(或与7310具有至少约75％、80％、85％、90％、95％或99％序列同一性的氨基酸序列)；或(ii)SEQ ID NO:7311的氨基酸序列(或与7311具有至少约75％、80％、85％、90％、95％或99％序列同一性的氨基酸序列)。20.根据权利要求13或14所述的组合物，其中所述第二抗原结合结构域包含：(i)重链可变区(VH)，所述重链可变区(VH)包含SEQ ID NO:6000的重链互补决定区1(VHCDR1)氨基酸序列、SEQ ID NO:6001的VHCDR2氨基酸序列，以及SEQ ID NO:6002的VHCDR3氨基酸序列，以及(ii)轻链可变区(VL)，所述轻链可变区(VL)包含SEQ ID NO:6063的轻链互补决定区1(VLCDR1)氨基酸序列、SEQ ID NO:6064的VLCDR2氨基酸序列，以及SEQ ID NO:7293的VLCDR3氨基酸序列。21.根据权利要求13、14和20中任一项所述的组合物，其中所述第二抗原结合结构域包含：(1)重链可变区(VH)，所述重链可变区(VH)包含具有表7、表35、表9、表10或表34的重链框架区1(VHFWR1)的氨基酸序列(或较其具有不超过1、2、3、4、5或6个置换、添加或缺失的序列)的VHFWR1、具有表7、表35、表9、表10或表34的VHFWR2的氨基酸序列(或较其具有不超过1、2、3、4、5或6个置换、添加或缺失的序列)的VHFWR2、具有表7、表35、表9、表10或表34的VHFWR3的氨基酸序列(或较其具有不超过1、2、3、4、5或6个置换、添加或缺失的序列)的VHFWR3，或具有表7、表35、表9、表10或表34的VHFWR4的氨基酸序列(或较其具有不超过1、2、3、4、5或6个置换、添加或缺失的序列)的VHFWR4，和/或(2)轻链可变区(VL)，所述轻链可变区(VL)包含具有表8、表36、表9、表10或表34的轻链框架区1(VLFWR1)的氨基酸序列(或较其具有不超过1、2、3、4、5或6个置换、添加或缺失的序列)的VLFWR1、具有表8、表36、表9、表10或表34的VLFWR2的氨基酸序列(或较其具有不超过1、2、3、4、5或6个置换、添加或缺失的序列)的VLFWR2、具有表8、表36、表9、表10或表34的VLFWR3的氨基酸序列(或较其具有不超过1、2、3、4、5或6个置换、添加或缺失的序列)的VLFWR3，或具有表8、表36、表9、表10或表34的VLFWR4的氨基酸序列(或较其具有不超过1、2、3、4、5或6个置换、添加或缺失的序列)的VLFWR4。22.根据权利要求21所述的组合物，其中所述第二抗原结合结构域包含：(1)重链可变区(VH)，所述重链可变区(VH)包含SEQ ID NO:6003的重链框架区1(VHFWR1)氨基酸序列、SEQ ID NO:6004的VHFWR2氨基酸序列、SEQ ID NO:6005的VHFWR3氨基酸序列，或SEQ ID NO:6006的VHFWR4氨基酸序列，以及(3)轻链可变区(VL)，所述轻链可变区(VL)包含SEQ ID NO:6066的轻链框架区1(VLFWR1)氨基酸序列、SEQ ID NO:6067的VLFWR2氨基酸序列、SEQ ID NO:7292的VLFWR3氨基酸序列，或SEQ ID NO:6069的VLFWR4氨基酸序列。23.根据权利要求13、14和20
‑
22中任一项所述的组合物，其中所述第二抗原结合结构
域包含：(i)VH，所述VH包含表7、表35、表9、表10或表34的VH的氨基酸序列(或与其具有至少约75％、80％、85％、90％、95％或99％序列同一性的氨基酸序列)，和/或(ii)VL，所述VL包含表8、表36、表9、表10或表34的VL的氨基酸序列(或与其具有至少约93％、95％或99％序列同一性的氨基酸序列)。24.根据权利要求13、14和20
‑
23中任一项所述的组合物，其中所述第二抗原结合结构域包含重链，所述重链包含表10的重链的氨基酸序列(或与其具有至少约75％、80％、85％、90％、95％或99％序列同一性的氨基酸序列)。25.根据权利要求13、14和20
‑
24中任一项所述的组合物，其中所述第二抗原结合结构域包含轻链，所述轻链包含表10的轻链的氨基酸序列(或与其具有至少约75％、80％、85％、90％、95％或99％序列同一性的氨基酸序列)。26.根据权利要求13、14和20
‑
25中任一项所述的组合物，其中所述第二抗原结合结构域包含重链和轻链，所述重链包含表10的重链的氨基酸序列(或与其具有至少约75％、80％、85％、90％、95％或99％序列同一性的氨基酸序列)，所述轻链包含表10的轻链的氨基酸序列(或与其具有至少约75％、80％、85％、90％、95％或99％序列同一性的氨基酸序列)。27.根据权利要求13
‑
26中任一项所述的组合物，其包含：第一多肽，其包含第一VL和第一CL，第二多肽，其包含第一VH、第一CH1、第一二聚化结构域和结合至NKp30的第一部分，第三多肽，其包含第二VH、第二CH1、第二二聚化结构域和结合至NKp30的任选第二部分，第四多肽，其包含第二VL和第二CL，其中：所述第一VL和所述第一VH形成结合至第一钙网蛋白的第一抗原结合结构域，并且所述第二VL和所述第二VH形成结合至第二钙网蛋白的第三抗原结合结构域，任选地其中所述第一和第二钙网蛋白包含SEQ ID NO:6285、D1001或6286的氨基酸序列，任选地其中所述第一和第二钙网蛋白突变型蛋白各自独立地选自：包含SEQ ID NO:6313的氨基酸序列的分子，或包含SEQ ID NO:6314的氨基酸序列的分子，任选地其中所述多功能性分子包含图3A或3B的构型。28.根据权利要求1
‑
27中任一项所述的组合物，其中所述钙网蛋白包含选自SEQ ID NO:6285
‑
6312或D1001的氨基酸序列，任选地其中所述钙网蛋白包含选自SEQ ID NO:6313
‑
6346或D1002
‑
D1003的氨基酸序列。29.根据权利要求1
‑
28中任一项所述的组合物，其中所述钙网蛋白包含SEQ ID NO:6285或D1001的氨基酸序列。30.根据权利要求1
‑
29中任一项所述的组合物，其中所述钙网蛋白包含SEQ ID NO:6286的氨基酸序列。31.根据权利要求1
‑
30中任一项所述的组合物，其中所述第一抗原结合结构域结合至位于所述钙网蛋白的C
‑
末端内的表位，任选地其中所述第一抗原结合结构域结合至位于SEQ ID NO:6285、D1001或6286的氨基酸序列内的表位。
32.根据权利要求1
‑
31中任一项所述的组合物，其进一步包含结合至第二钙网蛋白的第三抗原结合结构域，任选地其中：(i)所述第三抗原结合结构域不同于所述第一抗原结合结构域，或(ii)所述第三抗原结合结构域与所述第一抗原结合结构域相同。33.根据权利要求32所述的组合物，其中所述第二钙网蛋白分子与由所述第一抗原结合结构域结合的所述钙网蛋白分子相同。34.根据权利要求32所述的组合物，其中所述第二钙网蛋白分子不同于由所述第一抗原结合结构域结合的所述钙网蛋白分子。35.根据权利要求32
‑
34中任一项所述的组合物，其中所述第二钙网蛋白包含选自SEQ ID NO:6285
‑
6312或D1001的氨基酸序列，任选地其中所述第二钙网蛋白包含选自SEQ ID NO:6313
‑
6346或D1002
‑
D1003的氨基酸序列。36.根据权利要求35所述的组合物，其中由所述第一抗原结合结构域结合的所述钙网蛋白包含SEQ ID NO:6285或D1001的氨基酸序列，并且所述第二钙网蛋白包含SEQ ID NO:6286的氨基酸序列。37.根据权利要求32
‑
36中任一项所述的组合物，其中所述第三抗原结合结构域结合至位于所述第二钙网蛋白的C
‑
末端内的表位，任选地其中所述第三抗原结合结构域结合至位于SEQ ID NO:6285、D1001或6286的氨基酸序列内的表位。38.根据权利要求1
‑
37中任一项所述的组合物，其中所述第一抗原结合结构域包含：(i)重链可变区(VH)，所述重链可变区(VH)包含具有表4、表24、表25或表17中重链互补决定区1(VHCDR1)的氨基酸序列的VHCDR1、具有表4、表24、表25或表17中VHCDR2的氨基酸序列的VHCDR2，以及具有表4、表24、表25或表17中VHCDR3的氨基酸序列的VHCDR3；(ii)轻链可变区(VL)，所述轻链可变区(VL)包含具有表5、表24、表25或表18中轻链互补决定区1(VLCDR1)的氨基酸序列的VLCDR1、具有表5、表24、表25或表18中VLCDR2的氨基酸序列的VLCDR2，以及具有表5、表24、表25或表18中VLCDR3的氨基酸序列的VLCDR3；(iii)VH，所述VH包含表24、表25或表16中VH的氨基酸序列(或与其具有至少约77％、80％、85％、90％、95％或99％序列同一性的氨基酸序列)；(ii)VL，所述VL包含表24、表25或表16中VL的氨基酸序列(或与其具有至少约93％、95％或99％序列同一性的氨基酸序列)；(v)VH，所述VH包含具有表4或表6中重链框架区1(VHFWR1)的氨基酸序列(或具有不超过1、2、3、4、5、6、7、8或9个置换、添加或缺失的序列)的VHFWR1、具有表4或表6中VHFWR2的氨基酸序列(或具有不超过1、2、3、4、5、6、7、8或9个置换、添加或缺失的序列)的VHFWR2、具有表4或表6中VHFWR3的氨基酸序列(或具有不超过1、2、3、4、5、6、7、8或9个置换、添加或缺失的序列)的VHFWR3，和/或具有表4或表6中VHFWR4的氨基酸序列(或具有不超过1、2、3、4、5、6、7、8或9个置换、添加或缺失的序列)的VHFWR4，和/或(vi)VL，所述VL包含具有表5或表6中轻链框架区1(VLFWR1)的氨基酸序列(或具有不超过1、2、3、4、5、6、7、8或9个置换、添加或缺失的序列)的VLFWR1、具有表5或表6中VLFWR2的氨基酸序列(或具有不超过1、2、3、4、5、6、7、8或9个置换、添加或缺失的序列)的VLFWR2、具有表5或表6中VLFWR3的氨基酸序列(或具有不超过1、2、3、4、5、6、7、8或9个置换、添加或缺失的序列)的VLFWR3，和/或具有表5或表6中VLFWR4的氨基酸序列(或具有不超过1、2、3、4、5、
6、7、8或9个置换、添加或缺失的序列)的VLFWR4。39.根据权利要求1
‑
38中任一项所述的组合物，其中所述多功能性分子进一步包含肿瘤靶向部分。40.根据权利要求39所述的组合物，其中所述肿瘤靶向部分结合至肿瘤抗原。41.根据权利要求40所述的组合物，其中所述肿瘤抗原选自G6B、CD34、CD41、P
‑
选择素、Clec2、cKIT、FLT3、MPL、ITGB3、ITGB2、GP5、GP6、GP9、GP1BA、DSC2、FCGR2A、TNFRSF10A、TNFRSF10B或TM4SF1。42.根据权利要求39所述的组合物，其中所述肿瘤靶向部分包含例如结合至选自G6B、CD34、CD41、P
‑
选择素、Clec2、cKIT、FLT3、MPL、ITGB3、ITGB2、GP5、GP6、GP9、GP1BA、DSC2、FCGR2A、TNFRSF10A、TNFRSF10B或TM4SF1的肿瘤抗原的抗体分子。43.根据权利要求42所述的组合物，其中所述肿瘤靶向部分包含VH和/或VL序列，例如，如表38或表20中所列的。44.根据权利要求1
‑
43中任一项所述的组合物，其中所述多功能性分子优先结合至骨髓增生性赘生物细胞而不是非肿瘤细胞，任选地其中所述多功能性分子与所述骨髓增生性赘生物细胞之间的结合是所述多功能性分子与非肿瘤细胞之间的结合的超过10、20、30、40、50倍。45.根据权利要求44所述的组合物，其中所述骨髓增生性赘生物细胞选自骨髓纤维化细胞、原发性血小板增多症细胞、真性红细胞增多症细胞或慢性髓性癌细胞，任选地其中：所述骨髓增生性赘生物细胞不包含JAK2 V617F突变，或所述骨髓增生性赘生物细胞不包含MPL突变。46.根据权利要求1
‑
45中任一项所述的组合物，其进一步包含接头，例如，所述第一抗原结合结构域和所述第二抗原结合结构域之间的接头。47.根据权利要求46所述的组合物，其中所述接头选自：可切割接头、不可切割接头、肽接头、柔性接头、刚性接头、螺旋接头或非螺旋接头。48.根据权利要求46或47所述的组合物，其中所述接头是肽接头。49.根据权利要求48所述的组合物，其中所述肽接头包含Gly和Ser。50.根据权利要求48所述的组合物，其中所述肽接头包含选自SEQ ID NO:6214
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6217或6220
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6221和77
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78的氨基酸序列。51.一种多功能性分子，其包含：(i)结合至钙网蛋白(例如，野生型或突变型钙网蛋白)的第一抗原结合结构域，例如，表4、表5、表6、表24、表25、表16、表17、表18或表19的任一者中公开的钙网蛋白靶向性抗原结合结构域，以及(ii)结合至TCRβV的第二抗原结合结构域，例如，表30、表31、表32、表10、表11、表12或表13的任一者中公开的抗TCRβV抗原结合结构域，或结合至NKp30的第二抗原结合结构域，例如，表7、表8、表35、表36、表9、表10或表34中公开的抗NKp30抗原结合结构域。52.根据权利要求51所述的多功能性分子，其中所述第二抗原结合结构域结合至TCRβV。
53.根据权利要求52所述的多功能性分子，其中所述第二抗原结合结构域激活T细胞，或所述第二抗原结合结构域不激活T细胞。54.根据权利要求52或53所述的多功能性分子，其中所述第二抗原结合结构域结合至TCRβV12或TCRβV6(例如，包含SEQ ID NO:1044的氨基酸序列)。55.根据权利要求52
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54中任一项所述的多功能性分子，其中所述第二抗原结合结构域包含如表30、表31、表32、表10、表11、表12或表13中所列的一个或多个氨基酸序列。56.根据权利要求52
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55中任一项所述的多功能性分子，其中所述第二抗原结合结构域包含：(a)重链可变区(VH)和/或轻链可变区(VL)，其中：(i)所述VH包含具有表30、表31、表10、表11、表12或表13中重链互补决定区1(VHCDR1)的氨基酸序列(或具有不超过1、2、3或4个突变(例如，置换、添加或缺失)的序列)的VHCDR1、具有表30、表31、表10、表11、表12或表13中VHCDR2的氨基酸序列(或具有不超过1、2、3或4个突变(例如，置换、添加或缺失)的序列)的VHCDR2，和/或具有表30、表31、表10、表11、表12或表13中VHCDR3的氨基酸序列(或具有不超过1、2、3或4个突变(例如，置换、添加或缺失)的序列)的VHCDR3，(ii)所述VL包含具有表30、表31、表10、表11、表12或表13中轻链互补决定区1(VLCDR1)的氨基酸序列(或具有不超过1、2、3或4个突变(例如，置换、添加或缺失)的序列)的VLCDR1、具有表30、表31、表10、表11、表12或表13中VLCDR2的氨基酸序列(或具有不超过1、2、3或4个突变(例如，置换、添加或缺失)的序列)的VLCDR2，和/或具有表30、表31、表10、表11、表12或表13中VLCDR3的氨基酸序列(或具有不超过1、2、3或4个突变(例如，置换、添加或缺失)的序列)的VLCDR3；(b)重链可变区(VH)和/或轻链可变区(VL)，其中：(i)所述VH包含SEQ ID NO:3A的重链互补决定区1(VHCDR1)氨基酸序列(或具有不超过1、2、3或4个突变(例如，置换、添加或缺失)的序列)、SEQ ID NO:4A的VHCDR2氨基酸序列(或具有不超过1、2、3或4个突变(例如，置换、添加或缺失)的序列)，和/或SEQID NO:5A的VHCDR3氨基酸序列(或具有不超过1、2、3或4个突变(例如，置换、添加或缺失)的序列)，和/或(ii)所述VL包含SEQ ID NO:6A的轻链互补决定区1(VHCDR1)氨基酸序列(或具有不超过1、2、3或4个突变(例如，置换、添加或缺失)的序列)、SEQ ID NO:7A的VHCDR2氨基酸序列(或具有不超过1、2、3或4个突变(例如，置换、添加或缺失)的序列)，和/或SEQID NO:8A的VHCDR3氨基酸序列(或具有不超过1、2、3或4个突变(例如，置换、添加或缺失)的序列)；(c)重链可变区(VH)和/或轻链可变区(VL)，其中：(i)所述VH包含SEQ ID NO:45A的重链互补决定区1(VHCDR1)氨基酸序列(或具有不超过1、2、3或4个突变(例如，置换、添加或缺失)的序列)、SEQ ID NO:46A的VHCDR2氨基酸序列(或具有不超过1、2、3或4个突变(例如，置换、添加或缺失)的序列)，和/或SEQID NO:47A的VHCDR3氨基酸序列(或具有不超过1、2、3或4个突变(例如，置换、添加或缺失)的序列)，和/或(ii)所述VL包含SEQ ID NO:51A的轻链互补决定区1(VHCDR1)氨基酸序列(或具有不超
过1、2、3或4个突变(例如，置换、添加或缺失)的序列)、SEQ ID NO:52A的VHCDR2氨基酸序列(或具有不超过1、2、3或4个突变(例如，置换、添加或缺失)的序列)，和/或SEQID NO:53A的VHCDR3氨基酸序列(或具有不超过1、2、3或4个突变(例如，置换、添加或缺失)的序列)；和/或(d)重链可变区(VH)和/或轻链可变区(VL)，其中：(i)所述VH包含SEQ ID NO:48A的重链互补决定区1(VHCDR1)氨基酸序列(或具有不超过1、2、3或4个突变(例如，置换、添加或缺失)的序列)、SEQ ID NO:49A的VHCDR2氨基酸序列(或具有不超过1、2、3或4个突变(例如，置换、添加或缺失)的序列)，和/或SEQID NO:50A的VHCDR3氨基酸序列(或具有不超过1、2、3或4个突变(例如，置换、添加或缺失)的序列)，和/或(ii)所述VL包含SEQ ID NO:54A的轻链互补决定区1(VHCDR1)氨基酸序列(或具有不超过1、2、3或4个突变(例如，置换、添加或缺失)的序列)、SEQ ID NO:55A的VHCDR2氨基酸序列(或具有不超过1、2、3或4个突变(例如，置换、添加或缺失)的序列)，和/或SEQID NO:56A的VHCDR3氨基酸序列(或具有不超过1、2、3或4个突变(例如，置换、添加或缺失)的序列)。57.根据权利要求52
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55中任一项所述的多功能性分子，其中所述第二抗原结合结构域包含：(a)重链可变区(VH)和/或轻链可变区(VL)，其中：(i)所述VH包含表30、表31、表10、表11、表12或表13中VH的氨基酸序列(或与其具有至少约77％、80％、85％、90％、95％或99％序列同一性的氨基酸序列)，和/或(ii)所述VL包含表30、表31、表10、表11、表12或表13中VL的氨基酸序列(或与其具有至少约77％、80％、85％、90％、95％或99％序列同一性的氨基酸序列)(iii)所述VH包含SEQ ID NO:9A的氨基酸序列(或与其具有至少约77％、80％、85％、90％、95％或99％序列同一性的氨基酸序列)，和/或(iv)所述VL包含SEQ ID NO:10A的氨基酸序列(或与其具有至少约77％、80％、85％、90％、95％或99％序列同一性的氨基酸序列)；(b)重链可变区(VH)和/或轻链可变区...

【专利技术属性】
技术研发人员：A，
申请(专利权)人：马伦戈治疗公司，
类型：发明
国别省市：