抗CTLA4单克隆抗体和嵌合抗原受体制造技术

提出了组合物和方法，其中选择的多肽化合物与CTLA

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗CTLA4单克隆抗体和嵌合抗原受体
[0001]本申请要求序列号为63/038,111的我们共同未决的美国临时专利申请的优先权，该美国临时专利申请于2020年6月11日提交并且通过引用以其全文并入。
[0002]序列表
[0003]文件名称为102719.0032PCT_REV005_ST25.txt、大小为110KB的序列表的ASCII文本文件的内容创建于2021年06月01日并且经由EFS
‑
Web与本申请一起以电子方式提交，将其通过引用以其全文并入。


[0004]本专利技术的领域是用于与细胞毒性T淋巴细胞相关抗原
‑
4(CTLA
‑
4)结合的化合物的组合物和方法，并且尤其是如本文提出的抗体、抗体片段、scFv和包含VH和VL结构域的融合分子。

技术介绍

[0005]背景描述包括可用于理解本专利技术的信息。并不承认本文提供的任何信息是现有技术或与当前要求保护的专利技术相关，也不承认特别地或隐含地引用的任何出版物是现有技术。
[0006]本文中的所有出版物和专利申请都通过引用并入，其程度如同每个单独的出版物或专利申请被特别地且单独地指明通过引用并入一样。在并入的参考文献中的术语的定义或用法与本文提供的该术语的定义不一致或相反时，适用本文提供的该术语的定义，而不适用该术语在该参考文献中的定义。
[0007]针对多种癌症，免疫疗法已逐渐成为有希望的治疗性策略。在其他选择中，典型地与免疫刺激性药物组合的癌症疫苗组合物在至少一些方法中已显示出显著的治疗性效果。遗憾的是，肿瘤微环境通常具有T细胞和NK细胞的免疫抑制作用，免疫疗法的效果通常受到减弱。细胞毒性T淋巴细胞相关抗原
‑
4(CTLA
‑
4，CD152)是由激活的效应T细胞(T
效应
)表达的膜糖蛋白，参与阻遏T细胞增殖、细胞周期进程和细胞因子(IL
‑
2、IFN
‑
γ)的产生。CTLA
‑
4被认为通过多种机制发挥其抑制性功能，这些机制包括与CD28阳性共刺激竞争结合抗原呈递细胞(APC)上它们共享的B7配体(CD80/CD86)，以及通过与信号传导分子相关的胞质尾区的直接抑制性作用。
[0008]为了克服由于CTLA
‑
4活性引起的免疫抑制，可以使用抗CTLA
‑
4抗体作为治疗性效应物。目前已知的抗CTLA
‑
4抗体包括伊匹木单抗和曲美木单抗，这些抗体已单独或与化疗、癌症疫苗或其他抗体(抗PD
‑
1或抗OX40)组合用于治疗多种癌症，包括黑色素瘤、非小细胞肺癌(NSCLC)、乳腺癌、前列腺癌、胰腺癌、肝细胞癌和间皮瘤。伊匹木单抗以10mg/kg剂量在黑色素瘤的情况下提高长期生存率，并在B细胞淋巴瘤患者中具有抗肿瘤活性。然而，伊匹木单抗在转移性去势抵抗性前列腺癌患者中没有显示出有效性。尽管没有显示出与伊匹木单抗相似的益处，但曲美木单抗在黑色素瘤、难治性转移性结直肠癌、肝细胞癌和恶性间皮瘤患者中的临床试验显示出可接受的耐受性和临床上有意义的活性。
[0009]遗憾的是，伊匹木单抗和曲美木单抗具有显著的有害作用，且并不总是有效降低免疫抑制。因此，尽管在本领域中已知干扰CTRLA
‑
4信号传导的各种系统和方法，但所有或几乎所有这些系统和方法都有几个缺点。因此，仍然需要用于与CTLA
‑
4结合的改善的化合物的组合物和方法。

技术实现思路

[0010]本专利技术主题涉及以高特异性和亲和力与CTLA
‑
4结合的多肽的多种组合物和方法。在优选的实施例中，多肽被配置为scFv、抗体或其部分、或嵌合分子，如CAR、N
‑
803或TxM衍生物。在另外的优选实施例中，多肽包含VH和/或VL结构域并且具有如SEQ ID NO.1
‑
59中所述的氨基酸序列、或包含如SEQ ID NO：60
‑
71中所述的抗体的重链或轻链。如将容易理解的，这些多肽可用于多种诊断性和治疗性用途，并且尤其是用于降低免疫抑制和治疗癌症。
[0011]在本专利技术主题的一个方面，诸位专利技术人考虑了单链可变片段(scFv)肽，该单链可变片段肽包括含有第一氨基酸序列的V
H
区段和/或含有第二氨基酸序列的V
L
区段，该第一氨基酸序列选自由SEQ ID NO.1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、36、38、40、42、44、46、48、49、51、54、56和58组成的组，该第二氨基酸序列选自由SEQ ID NO.2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、37、39、41、43、45、47、50、53、55、57和59组成的组。最典型地，V
H
区段和V
L
区段用接头肽(例如，富含甘氨酸的肽)偶联。此外，考虑单链可变片段(scFv)肽可进一步包含至少两对V
H
区段和V
L
区段，其中该至少两对经连接形成多价scFv。有需要时，该肽可存在于药理学上可接受的载体中。
[0012]在本专利技术主题的另一方面，诸位专利技术人考虑了抗体，该抗体包含含有第一氨基酸序列的重链和/或含有第二氨基酸序列的轻链，该第一氨基酸序列选自由SEQ ID NO.60、61、62、64、65、66、68和70组成的组，该第二氨基酸序列选自由SEQ ID NO.63、67、69和71组成的组。例如，合适的抗体包括具有含有SEQ ID NO.68的第一氨基酸序列的重链和含有SEQ ID NO.69的第二氨基酸序列的轻链、或含有SEQ ID NO.70的第一氨基酸序列的重链和含有SEQ ID NO.71的第二氨基酸序列的轻链的那些抗体。
[0013]在本专利技术主题的另外的方面，诸位专利技术人考虑了用于治疗患有癌症的患者的药物组合物，该药物组合物包括如本文提出的单链可变片段(scFv)肽或抗体，其中该单链可变片段(scFv)肽或抗体存在于药理学上可接受的载体中。
[0014]在本专利技术主题的仍另一方面，诸位专利技术人考虑了诊断组合物，该诊断组合物包含如本文提出的单链可变片段(scFv)肽或抗体，其中该单链可变片段(scFv)肽或抗体进一步包含可检测标记。
[0015]此外，诸位专利技术人还考虑了重组核酸，该重组核酸包含：编码第一氨基酸序列和/或第二氨基酸序列的第一核酸区段，该第一氨基酸序列选自由SEQ ID NO.1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、36、38、40、42、44、46、48、49、51、54、56和58组成的组，该第二氨基酸序列选自由SEQ ID NO.2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、2本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】NO.63、67、69和71组成的组；并且其中该第一区段和第二区段任选地以双顺反子排列。13.一种重组核酸，该重组核酸包含：编码SEQ ID NO.68的第一氨基酸序列的第一核酸区段和编码SEQ ID NO.69的第二氨基酸序列的第二核酸区段、或编码SEQ ID NO.70的第一氨基酸序列的第一核酸区段和编码SEQ ID NO.71的第二氨基酸序列的第二核酸区段。14.如权利要求11所述的重组核酸，该重组核酸进一步包含编码嵌合抗原受体(CAR)的至少一部分的编码多肽的第三区段，其中当在细胞中表达时，该CAR具有包含该第一核酸区段和/或第二核酸区段的抗原结合胞外域。15.如权利要求11所述的重组核酸，该重组核酸进一步包含编码N
‑
803或TxM的至少一部分的编码多肽的第三区段，其中当在细胞中表达时，该N
‑
803或TxM具有包含该第一核酸区段和/或第二核酸区段的抗原结合结构域。16.一种重组细胞，该重组细胞包含如权利要求11
‑
15中任一项所述的重组核酸。17.如权利要求16所述的重组细胞，其中该细胞是T细胞、NK细胞、NKT细胞、单核细胞、巨噬细胞或树突状细胞。18.如权利要求16所述的重组细胞，其中该细胞是CHO细胞或EC7细胞。19.一种减少细胞或组织中CTLA
‑
4介导的效应的方法，该方法包括：使该细胞或组织与如权利要求1
‑
5中任一项所述的单链可变片段(scFv)肽或如权利要求6
‑
8中任一项所述的抗体以减少该细胞或组织中CTALA
‑
4介导的效应的量...

【专利技术属性】
技术研发人员：克利福德，
申请(专利权)人：南特生物科学公司，
类型：发明
国别省市：