一种噻托溴铵喷雾剂的UPLC测定方法技术

本发明专利技术提供了一种测定噻托溴铵吸入喷雾剂超高效液相(UPLC)测定方法，尤其是针对噻托溴铵吸入喷雾剂的微细粒子。该方法能够以明显短的时间内准确测定噻托溴铵的含量，同时不使用离子对试剂，可以更好的缩短流动相和色谱柱之间的平衡时间，同时也可延长色谱柱寿命。同时也可延长色谱柱寿命。同时也可延长色谱柱寿命。

【技术实现步骤摘要】
一种噻托溴铵喷雾剂的UPLC测定方法


[0001]本专利技术涉及一种测定噻托溴铵吸入喷雾剂超高效液相(UPLC)测定方法，尤其是针对噻托溴铵吸入喷雾剂的微细粒子，属于医药


技术介绍

[0002]噻托溴铵(Tiotropium bromide,1)化学名为(1α,2β,4β,5α,7β)
‑7‑
[(羟基
‑2‑
噻吩乙酰)氧基]‑
9,9
‑
二甲基
‑3‑
氧杂
‑9‑
氮氧离子三环[3.3.1.0
2,4
]壬烷溴化盐,是由勃林格殷格翰公司研发,与辉瑞公司共同销售,2002年6月在荷兰和菲律宾首次上市。
[0003]对比文献1方通等人(《药学与临床研究》，2007年第002期，124
‑
126)介绍了测定噻托溴铵含量及有关物质的以下HPLC方法：色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，DiamonsilC 18(250mm
×
4.6mm,5μm)；流动相：甲醇
‑
磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钾2.72g,加水1000mL溶解,加三乙胺10mL,用磷酸调节pH值至6.0,再加入0.21g辛烷基硫酸钠)(57∶43)；检测波长237nm；流速1mLmin
‑
1；进样量20μL。在上述色谱条件下，理论塔板数大于3000,与各杂质峰均可基线分离,分离度大于1.5。
[0004]对比文献2周一萌等人报道(中国医药工业杂志，2015，46(12)，1327
‑
132:9)测定噻托溴铵含量及有关物质的以下HPLC方法：色谱柱Diam onsil
‑
C 18柱(4.6m m x 150m m，5um)；流动相0.03mol/L辛烷磺酸钠溶液(含0.5％三乙胺，用磷酸调至pH 3.3)：甲醇：乙腈(50：20：30)；流速1.0m l/min；柱温40℃；检测波长238nm；进样量15ul。
[0005]另外还有我们了解到的的对照方法3的检测方法：色谱柱：辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱(LiChrospher 60RP Select B，125
×
4mm，5.0μm)；流动相：0.18％庚烷磺酸钠溶液(取庚烷磺酸钠1.64g，加水1000ml使溶解，用磷酸调pH至3.0)：乙腈(700:300)。检测波长：240nm，柱温：25℃，流速：2.0ml/min，进样量：100μl。
[0006]上述方法均使用了离子对试剂辛烷磺酸钠，它起改善待测物质的保留和峰形等，更换后保留时间会变化，同时离子对试剂的浓度的选择也会影响保留和峰形。当然类似的离子对试剂还有三氟乙酸、四丁基氢氧化铵、四丁基溴化铵、戊烷磺酸钠、己烷磺酸钠、庚烷磺酸钠等等。
[0007]对比文献2中的方法还采用了二极管阵列检测器(DAD)，与目前常规使用的紫外检测器相比，成本更高，生产厂家普及度较低，不利于方法的推广。
[0008]但使用离子对试剂存在一些问题，例如离子对试剂和固定相结合产生不可逆吸附，难以被冲洗下来，导致柱子的死体积增加，同时也会出现保留时间提前，理论塔板数降低，分离度变差的情况。这个吸附过程是不可逆的，即便冲洗色谱柱再充分，也只是能部分恢复色谱柱的性能，延缓色谱柱报废的时间。同时离子对试剂在流动相和色谱柱之间的平衡时间较长，使得工作效率下降。
[0009]有鉴于此，特提出本专利技术。

技术实现思路

[0010]针对噻托溴铵测定存在的问题，本专利技术提供了一个全新超高效液相的分析方法，该方法能够以明显短的时间内准确测定噻托溴铵的含量，同时不使用离子对试剂，可以更好的缩短流动相和色谱柱之间的平衡时间，同时也可延长色谱柱寿命。
[0011]本专利技术提供的分析方法，根据中国药典2015年版，目前已经做完了方法学验证，包括系统适用性试验、线性试验、回收试验以及专属性试验。经过这些验证，证明本专利技术提供的分析方法实用可靠，稳定性较好。
[0012]一种采用超高效液相色谱仪测定噻托溴铵喷雾剂的方法：
[0013]a.色谱柱选用键合十八烷基硅胶为填充剂的反向超高效液相色谱柱；
[0014]b.以甲醇和磷酸二氢钾缓冲液为流动相，所述的磷酸二氢钾溶液浓度为0.2～0.4％，流动相体积配比为磷酸二氢钾溶液:甲醇＝65～75:35～25；
[0015]c.检测波长选自230
‑
240nm范围内。
[0016]上述的采用超高效液相色谱仪测定噻托溴铵喷雾剂的方法，其特征在于所述流动相中磷酸二氢钾溶液浓度为0.23～0.27％。
[0017]上述的采用超高效液相色谱仪测定噻托溴铵喷雾剂的方法，其特征在于所述流动相中磷酸二氢钾溶液浓度为0.25％。
[0018]上述的采用超高效液相色谱仪测定噻托溴铵喷雾剂的方法，其特征在于所述流动相中磷酸二氢钾溶液PH值为2.5
‑
4。
[0019]上述的采用超高效液相色谱仪测定噻托溴铵喷雾剂的方法，其特征在于所述流动相体积配比为磷酸二氢钾溶液:甲醇＝68～72:32～28。
[0020]上述的采用超高效液相色谱仪测定噻托溴铵喷雾剂的方法，其特征在于所述流动相体积配比为磷酸二氢钾溶液:甲醇＝70:30。
[0021]上述的采用超高效液相色谱仪测定噻托溴铵喷雾剂的方法，其特征在于所述的检测波长选自234
‑
236nm范围内。
[0022]上述的采用超高效液相色谱仪测定噻托溴铵喷雾剂的方法，其特征在于所述的流动相流速为0.5ml/min。
[0023]上述的采用超高效液相色谱仪测定噻托溴铵喷雾剂的方法，其特征在于所述的柱温为25
‑
30℃。
[0024]上述的采用超高效液相色谱仪测定噻托溴铵喷雾剂的方法，其特征在于所述的噻托溴铵定量限浓度为4
‑
5ng
·
mL
‑
1。
[0025]上述的采用超高效液相色谱仪测定噻托溴铵喷雾剂的方法，其特征在于所述的反向色谱柱采用的是1.7μm的填料，具有亚乙基桥杂化颗粒技术。
[0026]上述的采用超高效液相色谱仪测定噻托溴铵喷雾剂的方法，其特征在于所述的反向色谱柱ACQUITYBEH C18柱。
[0027]与报道文献方法相比，本专利技术提供的噻托溴铵的超高效液相方法，具有如下优点：
[0028]1、有效缩短检测时间，提高了检测效率；
[0029]2、增强了系统的分离能力，提高样品检测结果的准确度；
[0030]3、不使用离子对试剂，减少对色谱柱的污染，延长耗材使用寿命；
[0031]4、大幅减少了与检测相关的有机溶媒用量，节约成本，环境友好。
附图说明
[0032]为了更清楚地说明本专利技术具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种采用超高效液相色谱仪测定噻托溴铵喷雾剂的方法：a.色谱柱选用键合十八烷基硅胶为填充剂的反向超高效液相色谱柱；b.以甲醇和磷酸二氢钾缓冲液为流动相，所述的磷酸二氢钾溶液浓度为0.2～0.4％，流动相体积配比为磷酸二氢钾溶液:甲醇＝65～75:35～25；c.检测波长选自230
‑
240nm范围内。2.如权利要求书1所述的采用超高效液相色谱仪测定噻托溴铵喷雾剂的方法，其特征在于所述流动相中磷酸二氢钾溶液浓度为0.23～0.27％。3.如权利要求书1所述的采用超高效液相色谱仪测定噻托溴铵喷雾剂的方法，其特征在于所述流动相中磷酸二氢钾溶液浓度为0.25％。4.如权利要求书1所述的采用超高效液相色谱仪测定噻托溴铵喷雾剂的方法，其特征在于所述流动相中磷酸二氢钾溶液PH值为2.5
‑
4。5.如权利要求书1所述的采用超高效液相色谱仪测定噻托溴铵喷雾剂的方法，其特征在于所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨敏，陈立营，朱赛楠，苏春红，徐跃，杨曦，
申请(专利权)人：天津药业研究院股份有限公司，
类型：发明
国别省市：