一种醋酸阿托西班的纯化方法技术

本发明专利技术属于化合物制备技术领域，具体涉及一种醋酸阿托西班的纯化方法。该方法包括以下步骤：醋酸阿托西班粗品进行阳离子交换层析

【技术实现步骤摘要】
一种醋酸阿托西班的纯化方法


[0001]本专利技术属于化合物制备
，具体涉及一种醋酸阿托西班的纯化方法。

技术介绍

[0002]醋酸阿托西班为肽类物质，一般作为妇产科药物应用，可在受体水平对人催产素产生竞争性抑制作用，直接与催产素竞争催产素受体，抑制催产素和催产素受体结合，从而直接抑制催产素作用于子宫，抑制子宫收缩；也可以抑制磷脂酰肌醇的水解作用，间接抑制子宫对催产素的反应，使子宫收缩得到抑制，从而达到保胎的目的。目前阿托西班在临床上有很好的应用前景，具有很高的开发价值。
[0003]醋酸阿托西班药物生产过程以及药品质量及疗效，取决于其纯度以及纯化工艺，目前的纯化工艺还存在以下缺陷：步骤繁琐，时间长，成本较高，分离效果不够理想，纯度偏低，收率较低，现有的纯化过程中使用的有机试剂多，污染严重。醋酸阿托西班的纯化方法还有待进一步改进。

技术实现思路

[0004]有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种醋酸阿托西班的纯化方法，该方法得到的醋酸阿托西班的纯度提高、收率提高。
[0005]本专利技术所采用的技术方案为：
[0006]一种醋酸阿托西班的纯化方法，包括以下步骤：醋酸阿托西班粗品进行阳离子交换层析
→
洗脱液沉淀
→
沉淀物凝胶过滤层析
→
环化
→
反相层析
→
旋蒸及纳滤
→
冻干。
[0007]所述阳离子交换层析的具体条件为：采用SP Sephadex
‑<br/>C25柱1.4L填料，洗涤为0.05M HAc，pH＝5.5
±
0.10，电导约0.5ms/cm，5CV，洗脱为0.5M NaAc，pH＝6.0
±
0.10。
[0008]所述沉淀时采用乙醚，浓度≥85％(V/V％)。
[0009]所述凝胶过滤层析的具体条件为：采用Sephadex G
‑
15柱1.2L填料，沉淀物用纯化水溶解，用HCl调节pH至4.00
±
0.10后上样，上样结束后用流动相进行洗脱，流动相：1％(wt％)氯化钠，用HCl调节pH至4.00
±
0.10；220nm下吸光度上升时收集，低于0.2时停止收集。重复上样与洗脱收集：用流动相继续平衡至流出液pH一致时，即可继续上样，并重复洗脱收集操作。
[0010]所述环化的具体步骤为：上步收集溶液用NaOH调为pH＝4.5
±
0.10，用纯化水调到线性粗品1mg/ml，加入5％(V/V％)的DMSO，控温25℃
±
1℃搅拌10h。
[0011]所述反相层析的具体步骤为：
[0012]采用柱子为DAC150，填料为SMB 200
‑
10的C18，流速为400ml/min，上样液为环化后的溶液，上样时A泵上样，上样后先用平衡液(0.5％(V/V％)的冰乙酸+7％(V/V％)的乙腈)冲洗5个柱体积冲去DMSO，然后再洗脱，检测波长为220nm。收集结束后50％(V/V％)甲醇冲柱，随后更换为平衡液，检测波长为220nm，直到基线走平，即可开始下批的上样。
[0013]继续采用DAC150，填料为SMB 200
‑
10的C18，上一步纯化后的收集液加纯化水稀释
1倍上样，上样量≤100g，检测波长为220nm，洗涤1，5CV；洗涤2，7CV；洗涤1为0.1M乙酸铵，用冰醋酸调pH＝4.5
±
0.10；洗涤2为0.5％(V/V％)的乙酸+5％(V/V％)的乙腈；洗脱为0.5％(V/V％)的乙酸+60％(V/V％)的乙腈；收集结束后，洗脱液再走12min，随后洗涤2再走20min，直至基线走平，即可开始下一循环上样。
[0014]所述旋蒸时的温度为30℃，除去大部分乙腈，纳滤时膜的孔径为100Da，待乙腈所占产品重量＜1％，且HAc占产品重量＜5.0％，可停止纳滤，赶出产品，然后0.22um过滤。
[0015]所述冻干时的步骤为：
[0016]1)1h内降温至
‑
45℃维持2h；
[0017]2)0.5h内升温至
‑
38℃维持2h，真空度0.15mbar；
[0018]3)0.5h内升温至
‑
20℃维持8h，真空度0.15mbar；
[0019]4)1h内升温至
‑
10℃维持10h，真空度0.15mbar；
[0020]5)1h内升温至0℃维持10h，真空度0.15mbar；
[0021]6)1h内升温至10℃维持10h，真空度0.15mbar；
[0022]7)1h内升温至30℃维持2h，真空度0.15mbar。
[0023]与现有技术相比，采用本专利技术的纯化方法对阿托西班粗品纯化后，得到的阿托西班成品的纯度提高到99.7％，收率由原来改进前的78％提高到本专利技术的89％以上。
[0024]本专利技术的纯化方法在操作过程中操作步骤简便，不需要高温高压容器，生产过程更为安全。
[0025]本专利技术的纯化方法在操作时使用的有机试剂不多，对环境的污染小。
附图说明
[0026]图1为阿托西班纯品的图谱。
具体实施方式
[0027]下面结合实施例来说明本专利技术的具体实施方式，但以下实施例只是用来详细说明本专利技术，并不以任何方式限制本专利技术的范围。
[0028]实施例1：
[0029]醋酸阿托西班的纯化方法，包括以下步骤：
[0030]1)取阿托西班粗品48g，用适量纯化水溶解，上样，采用SP Sephadex
‑
C25柱1.4L填料，洗涤为0.05M HAc，pH＝5.5
±
0.10,电导约0.5ms/cm，洗涤5CV，洗涤结束后进行洗脱，洗脱为0.5M NaAc，pH＝6.0
±
0.10。
[0031]2)向上一步收集的洗脱液中加入乙醚(乙醚浓度≥85V/V％)进行沉淀，对沉淀离心脱水，然后在真空下干燥48h得到沉淀物；
[0032]3)将步骤2)干燥后的沉淀物用纯化水溶解，用HCl调节pH至4.00
±
0.10后上样，采用Sephadex
‑
G15柱1.2L填料，上样结束后开始测定220nm下吸光度，流动相为1％(wt％)氯化钠，用HCl调节pH至4.00
±
0.10，220nm下吸光度上升时收集，低于0.200时停止收集。重复上样与洗脱收集：用流动相继续平衡至流出液pH一致时，即可继续上样，并重复以上操作；
[0033]4)将上一步洗脱收集液用NaOH调为pH＝4.5
±
0.10，用纯化水调到线性粗品1mg/ml，加入5％(V/V％)的DMSO，抽到密封良好的反应釜中，用高纯氮气把反应釜上方的空气隔
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种醋酸阿托西班的纯化方法，其特征在于包括以下步骤：醋酸阿托西班粗品进行阳离子交换层析
→
洗脱液沉淀
→
沉淀物凝胶过滤层析
→
环化
→
反相层析
→
旋蒸及纳滤
→
冻干。2.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于：所述阳离子交换层析的具体条件为：采用SP Sephadex
‑
C25柱，洗涤为0.05M HAc，pH=5.5
±
0.10，电导约0.5ms/cm，5CV，洗脱为0.5M NaAc，pH=6.0
±
0.10。3.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于：所述沉淀时采用乙醚，浓度≥85%。4.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于：所述凝胶过滤层析的具体条件为：采用Sephadex G
‑
15柱，沉淀物用纯化水溶解，用HCl调节 pH至4.00
±
0.10后上样，上样结束后用流动相进行洗脱，流动相：1%氯化钠，用HCl调节 pH至4.00
±
0.10；220nm下吸光度上升时收集，低于0.200时停止收集。5.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于：所述环化的具体步骤为：上步收集溶液调pH=4.5
±
0.10，...

【专利技术属性】
技术研发人员：余彬，郑扶桑，王萍，赵文蒙，张富源，王峰，杜丽娟，钟友华，
申请(专利权)人：河南美森药业有限公司，
类型：发明
国别省市：