一种血促性素提取纯化方法技术

本发明专利技术涉及生物制品和兽药技术领域，公开了一种血促性素提取纯化方法，步骤为：1）采用偏磷酸调节孕马血清的pH为4.5～5.0，进行固液分离，收集上清液；2）采用第一沉淀剂对上清液进行沉淀处理，收集滤液；3）采用第二沉淀剂对滤液进行沉淀处理，收集沉淀物，沉淀物经干燥处理，得到血促性素粗品；4）将血促性素粗品溶解依次进行第一超滤、亲和层析、第二超滤、阳离子交换层析处理，得到血促性素粗品过滤液；采用第三沉淀剂对血促性素粗品过滤液进行沉淀处理，收集沉淀物，沉淀物经干燥得到血促性素纯品。本发明专利技术提取纯化方法制备的血促性素纯度能够达到99.9%以上，总收率能够达到88.9%，效价能够达到11000 IU/mg。IU/mg。

【技术实现步骤摘要】
一种血促性素提取纯化方法


[0001]本专利技术涉及生物制品和兽药
，具体涉及一种血促性素提取纯化方法。

技术介绍

[0002]血促性素为孕马血清或血浆中提取的血清促性腺激素，是来自于妊娠40～120天怀孕母马血清(浆)加工纯化制品，具备用于繁殖中促卵泡素及黄体生成素的双重性质；对于雌性动物，可促进其卵巢中卵泡发育及黄体生成；对于雄性动物，可促进睾丸精细管中精子生成及睾丸间质细胞分泌。试验证明，PMSG在同期发情、超数排卵、胚胎移植、治疗不发情、弱发情、情期不孕等方面应用效果极佳。1992年，我国农业部首次将兽用血促性素纳入《中国兽药规范》(1992年版)中，至2011年又收至我国农业部药典中。
[0003]随着血促性素应用范围的扩大和规模化养殖的普及，导致市场对血促性素的需求量大幅上升。目前，孕马血清促性腺激素的提取纯化的方法主要有偏磷酸分离
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盐析
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乙醇沉淀
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透析法、偏磷酸分离
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离子交换法和硫酸铵盐析
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透析法等。但现有的血促性素提本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种血促性素提取纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）采用偏磷酸调节孕马血清的pH为4.5～5.0，然后进行固液分离，收集上清液；（2）采用第一沉淀剂对所述上清液进行沉淀处理，固液分离，收集滤液；（3）采用第二沉淀剂对所述滤液进行沉淀处理，固液分离，收集沉淀物，沉淀物经干燥处理，得到血促性素粗品；（4）将所述血促性素粗品溶解，得到血促性素粗品溶液；将血促性素粗品溶液依次进行第一超滤、亲和层析、第二超滤、阳离子交换层析处理，得到血促性素粗品过滤液；采用第三沉淀剂对血促性素粗品过滤液进行沉淀处理，收集沉淀物，沉淀物经干燥处理，得到血促性素纯品。2. 根据权利要求1所述的血促性素提取纯化方法，其特征在于，所述亲和层析采用的层析基质为Blue Sepharose 6 Fast Flow。3.根据权利要求2所述的血促性素提取纯化方法，其特征在于，亲和层析过程中上样后先采用洗涤液冲洗亲和层析柱，然后采用洗脱缓冲液进行洗脱；所述亲和层析采用的洗涤液为氯化钠和磷酸二氢钠的混合水溶液，洗涤液的电导率为10～15ms/cm，洗涤液中磷酸二氢钠的浓度为0.05mol/L，氯化钠的浓度为0.07mol/L；亲和层析采用的洗脱缓冲液为氯化钠溶液，氯化钠溶液的电导率为40～50ms/cm。4. 根据权利要求1～3任一所述的血促性素提取纯化方法，其特征在于，所述阳离子交换层析采用的层析基质为SP
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Sepharose Fast Flow。5.根据权利要求4所述的血促性素提取纯化方法，其特征在于，阳离子交换层析过程中上样后先采用洗涤液冲洗阳离子交换层析柱，然后采用洗脱缓冲液进行洗脱；所述阳离子交换层析采用的洗涤液为氯化钠和醋酸钠的混合水溶液，洗涤液的电导率为10～15ms/cm，洗涤液中醋酸钠的浓...

【专利技术属性】
技术研发人员：高伟，郑扶桑，赵文蒙，杜丽娟，宋祺，王萍，张富源，余彬，
申请(专利权)人：河南美森药业有限公司，
类型：发明
国别省市：