一种醋酸布舍瑞林的纯化方法技术

本发明专利技术属于化合物制备技术领域，具体涉及一种醋酸布舍瑞林的纯化方法。该方法的步骤是：布舍瑞林粗品进行阳离子交换层析

【技术实现步骤摘要】
一种醋酸布舍瑞林的纯化方法


[0001]本专利技术属于化合物制备
，具体涉及一种醋酸布舍瑞林的纯化方法。

技术介绍

[0002]布舍瑞林是一种GnRH类似物，在使用初期可促使LH、FSH和性激素分泌增加，经1～2周开始产生相反作用，性激素分泌可降低到去势水平，临床主要用于前列腺癌、乳腺癌等。
[0003]布舍瑞林的合成方法已经比较成熟，但是在对布舍瑞林的纯化时，普遍采用的是反相层析的方法，例如2018106941628。在实际的生产中，专利技术人发现采用这种反相层析的纯化方法，得到的布舍瑞林的纯度基本满足要求，但是收率一直不够理想。

技术实现思路

[0004]有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种醋酸布舍瑞林的纯化方法，该方法得到的布舍瑞林的纯度提高、收率提高。
[0005]本专利技术所采用的技术方案为：
[0006]一种醋酸布舍瑞林的纯化方法，包括以下步骤：布舍瑞林粗品进行阳离子交换层析
‑
洗脱液沉淀
‑
沉淀物凝胶过滤层析
‑
反相层析
‑
旋蒸及纳滤
‑
冻干。
[0007]所述阳离子交换层析的具体条件为：采用SP Sephadex
‑
C25柱，上样液调pH＝6.0
±
0.10，电导约0.5ms/cm；洗涤为0.05M NaAc，pH＝6.0
±
0.10，电导约0.5ms/cm；洗脱为0.5M NaAc，pH＝9.0
>±
0.10。
[0008]所述沉淀时采用乙醚，浓度≥85％(V/V％)。
[0009]所述凝胶过滤层析的具体条件为：采用Sephadex
‑
G15柱，上样液用HAc调节pH至4.00
±
0.10；流动相：0.5％(wt％)氯化钠，用HAc调节pH至4.00
±
0.10，220nm下吸光度上升时收集，低于0.200时停止收集。
[0010]所述反相层析的具体步骤为：
[0011]a柱子为DAC150，填料为SMB 200
‑
10的C18，上样液为上步洗脱液用HCl调pH＝4.0
±
0.10，流动相：12％(V/V％)乙腈，用HAc调pH＝4.0
±
0.10；
[0012]b继续采用柱子为DAC150，填料为SMB 200
‑
10的C18，上一步产品用纯化水稀释1倍，上样量为10g左右，检测波长为220nm，流动相：13％(V/V％)乙腈，用磷酸调pH＝5.0
±
0.10；
[0013]c继续采用柱子为DAC150，填料为SMB 200
‑
10的C18，上一步产品用纯化水稀释1倍，上样量为100g左右，检测波长为220nm，一次洗涤为0.1M乙酸铵，pH＝6.0
±
0.10，醋酸调pH；二次洗涤为0.5％(V/V％)的乙酸+7％(V/V％)的乙腈，洗脱为0.5％(V/V％)的乙酸+50％(V/V％)的乙腈。
[0014]所述旋蒸时的温度为40℃，纳滤时膜的孔径为100Da。
[0015]所述冻干时的步骤为：
[0016]1)1h内降温至
‑
45℃维持2h；
[0017]2)0.5h内升温至
‑
38℃维持2h，真空度0.15mbar；
[0018]3)0.5h内升温至
‑
20℃维持8h，真空度0.15mbar；
[0019]4)1h内升温至
‑
10℃维持10h，真空度0.15mbar；
[0020]5)1h内升温至0℃维持10h，真空度0.15mbar；
[0021]6)1h内升温至10℃维持10h，真空度0.15mbar；
[0022]7)1h内升温至30℃维持2h，真空度0.15mbar。
[0023]与现有技术相比，采用本专利技术的纯化方法对布舍瑞林粗品纯化后，得到的布舍瑞林成品的纯度提高到99.8％以上，收率由原来改进前的80％提高到本专利技术的85％以上。
[0024]本专利技术的纯化方法在操作过程中不需强酸强碱，生产过程的安全性提到提高。
[0025]本专利技术的纯化方法在操作时使用的有机试剂不多，对环境的污染小。
附图说明
[0026]图1为布舍瑞林纯品的图谱。
具体实施方式
[0027]下面结合实施例来说明本专利技术的具体实施方式，但以下实施例只是用来详细说明本专利技术，并不以任何方式限制本专利技术的范围。
[0028]实施例1：
[0029]1、取42g的布舍瑞林粗品，用适量纯化水溶解，调pH＝6.0
±
0.10，电导约0.5ms/cm，然后0.2um过滤，后将过滤后溶液上样，采用SP Sephadex
‑
C25柱1L填料，洗涤为0.05M NaAc，洗涤约5CV，上样结束后进行洗脱，洗脱为0.5M NaAc，pH＝9.0
±
0.10。
[0030]2、向上一步收集的洗脱液中加入乙醚(乙醚浓度≥85V/V％)进行沉淀，对沉淀进行离心脱水，然后在真空下干燥48h得到沉淀物；
[0031]3、将步骤2干燥后的沉淀物用纯化水溶解，用HAc调节pH至4.00
±
0.10后上样，采用Sephadex
‑
G15柱1.2L填料，上样结束后开始测定220nm下吸光度，流动相为0.5％(wt％)氯化钠，用HAc调节pH至4.00
±
0.10，220nm下吸光度上升时收集，低于0.200时停止收集。重复上样与洗脱收集：用流动相继续平衡至流出液pH一致时，即可继续上样，并重复以上操作。
[0032]4、C18粗品纯化，流速为400ml/min。
[0033]上一步的洗脱液收集用HCl调pH＝4.0
±
0.10作为上样液，流动相为12％(V/V％)乙腈，用HAc调pH＝4.0
±
0.10，上柱前需超声。
[0034]上样时用A泵上样(柱子为DAC150，填料为SMB 200
‑
10的C18)，上样约10g，上样结束后，用纯化水冲洗A泵泵头，然后放到流动相中，B泵放到纯化水中，然后50％的B冲洗30min，然后用流动相等度纯化。检测波长为220nm。主要除RRT＝0.83的杂质。收集结束后用50％甲醇(V/V％)走1CV(柱体积)，后更换为正常流动相，检测波长为220nm，走到基线走平，即可开始下批的进样。
[0035]5、C18纯化，流速为400ml/min。
[0036]上样液为上一步纯化出来的产品。上样液加水稀释一倍，上样结束后，再用0.02％(V/V％)的磷酸水冲洗30min，然后再正常纯化。
[0037]流动相：1本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种醋酸布舍瑞林的纯化方法，其特征在于包括以下步骤：布舍瑞林粗品进行阳离子交换层析
‑
洗脱液沉淀
‑
沉淀物凝胶过滤层析
‑
反相层析
‑
旋蒸及纳滤
‑
冻干。2.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于：所述阳离子交换层析的具体条件为：采用SP Sephadex
‑
C25柱，上样液调pH=6.0
±
0.10，电导约0.5ms/cm；洗涤为0.05M NaAc，pH=6.0
±
0.10，电导约0.5ms/cm；洗脱为0.5M NaAc，pH=9.0
±
0.10。3.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于：所述沉淀时采用乙醚，浓度≥85%。4.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于：所述凝胶过滤层析的具体条件为：采用Sephadex
‑
G15柱，上样液用HAc调节 pH至4.00
±
0.10；流动相：0.5%氯化钠，用HAc调节 pH至4.00
±
0.10，220nm下吸光度上升时收集，低于0.200时停止收集。5.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于：所述反相层析的具体步骤为：a柱子为DAC150，填料为SMB 200
‑
10的C18，上样液为上步洗脱液用HCl调pH=4.0
±...

【专利技术属性】
技术研发人员：余彬，郑扶桑，王萍，赵文蒙，王峰，杜丽娟，张富源，李志伟，
申请(专利权)人：河南美森药业有限公司，
类型：发明
国别省市：