卡贝缩宫素的制备方法技术

本发明专利技术提出了一种卡贝缩宫素的制备方法，所述方法包括将卡贝缩宫素粗肽与乙腈溶液进行第一混合处理；将第一混合处理产物进行聚合物填料吸附处理；将吸附有第一混合处理产物的聚合物填料进行洗脱处理，以便获得洗脱液；以及将所述洗脱液进行纯化处理，以便获得所述卡贝缩宫素。采用此方法能够有效的避免使用乙醚或甲基叔丁基醚等易燃易爆试剂的使用，降低了安全风险，同时减少了粗肽沉淀，离心及真空干燥的步骤，节省了生产时间，提高了生产效率。提高了生产效率。

【技术实现步骤摘要】
卡贝缩宫素的制备方法


[0001]本专利技术涉及多肽药物合成
，具体地，本专利技术涉及一种卡贝缩宫素的制备方法。

技术介绍

[0002]卡贝缩宫素是一种合成的具有激动剂性质的长效催产素九肽类似物。硬膜外或腰麻下剖腹产术后可以立即单剂量静脉给药，以预防子宫张力不足和产后出血。卡贝缩宫素的临床和药理特性与天然产生的催产素类似。像缩宫素一样，卡贝缩宫素与子宫平滑肌的缩宫素受体结合，引起子宫的节律性收缩，在原有的收缩基础上，增加其频率和增加子宫张力。
[0003]目前，开发一种新的合成卡贝缩宫素的方法有待研究。

技术实现思路

[0004]本专利技术旨在至少在一定程度上解决现有技术中存在的技术问题至少之一。
[0005]目前，卡贝缩宫素的合成方案主要以Fmoc固相合成为主，环化主要分为液相环化和固相环化。肽树脂合成完后，一般采用TFA等试剂将肽从树脂载体上切落，然后用无水乙醚或甲基叔丁基醚等沉淀试剂进行沉淀，再通过离心或过滤的手段进行分离，洗涤以及真空干燥后，得到粗肽产品。
[0006]由于卡贝缩宫素没有明显的亲水基团，导致其在水中的溶解性较差，因此粗肽在纯化前的溶解需要使用大量的醋酸或TFA等酸进行助溶。鉴于卡贝缩宫素的这种性质，专利技术人提出了粗肽裂解后不采用沉淀方式获取固体粗肽，而通过选择合适的溶剂对裂解液进行稀释，然后采用聚合物填料进行吸附的方式富集卡贝缩宫素粗肽。
[0007]本专利技术通过固相合成法合成卡贝缩宫素树脂，采用特定的裂解液进行裂解得到，裂解液过滤，减压旋蒸到原体积的40％
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50％；浓缩后的裂解液加入到2～5倍体积的10％
‑
20％乙腈的水溶液中进行稀释，然后加入理论粗肽量8倍的聚合物填料(UNIPS、UNIPSN)进行粗肽吸附；过滤收集聚合物填料，然后用40％
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60％的乙腈水溶液进行浸泡洗脱，收集肽溶液；稀释后进行纯化，得到卡贝缩宫素精肽。
[0008]为此，在本专利技术的一个方面，本专利技术提出了一种制备卡贝缩宫素的方法。根据本专利技术的实施例，所述方法包括将卡贝缩宫素粗肽与乙腈溶液进行第一混合处理；将第一混合处理产物进行聚合物填料吸附处理；将吸附有第一混合处理产物的聚合物填料进行洗脱处理，以便获得洗脱液；以及将所述洗脱液进行纯化处理，以便获得所述卡贝缩宫素。通过采用此方法能够有效的避免使用乙醚或甲基叔丁基醚等易燃易爆试剂的使用，降低了安全风险，同时减少了粗肽沉淀，离心及真空干燥的步骤，节省了生产时间，提高了生产效率。
[0009]本专利技术的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本专利技术的实践了解到。
具体实施方式
[0010]在本专利技术的一个方面，本专利技术提出了一种制备卡贝缩宫素的方法。根据本专利技术的实施例，所述方法包括将卡贝缩宫素粗肽与乙腈溶液进行第一混合处理；将第一混合处理产物进行聚合物填料吸附处理；将吸附有第一混合处理产物的聚合物填料进行洗脱处理，以便获得洗脱液；以及将所述洗脱液进行纯化处理，以便获得所述卡贝缩宫素。通过采用此方法能够有效的避免使用乙醚或甲基叔丁基醚等易燃易爆试剂的使用，降低了安全风险，同时减少了粗肽沉淀，离心及真空干燥的步骤，节省了生产时间，提高了生产效率。
[0011]根据本专利技术的实施例，上述制备卡贝缩宫素的方法还可以进一步包括如下附加技术特征至少之一：
[0012]根据本专利技术的实施例，所述卡贝缩宫素粗肽是通过固相合成方法获得。
[0013]根据本专利技术的实施例，所述卡贝缩宫素粗肽是通过如下方式获得的：(1)将Fmoc
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Gly
‑
OH与氨基酸树脂载体进行第一连接处理，以便获得Fmoc
‑
Gly
‑
树脂；(2)将所述Fmoc
‑
Gly
‑
树脂依次与具有Fmoc保护基团的预定氨基酸进行连接处理，以便得到卡贝缩宫素肽
‑
树脂；以及(3)将所述卡贝缩宫素
‑
肽树脂进行裂解处理，以便获得裂解液，所述裂解液包括所述卡贝缩宫素粗肽。
[0014]需要说明的是，本方案中所述“预定氨基酸”是指将依次接入从Fmoc
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Gly
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树脂起算第1
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7个氨基酸相对应的保护氨基酸以及N末端的丁酸，其中，所述的保护氨基酸为：Fmoc
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Leu
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OH、Fmoc
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Pro
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OH、Fmoc
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Cys(Mmt)
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OH、Fmoc
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Asn(Trt)
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OH、Fmoc
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Gln(trt)
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OH、Fmoc
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Ile
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OH、Fmoc
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Tyr(Me)
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OH，N末端的丁酸为4
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氯基丁酸。
[0015]根据本专利技术的实施例，所述洗脱处理后进一步包括将所述洗脱液进行纯化处理和任选的浓缩处理。使得所制备的卡贝缩宫素具有较高的纯度。
[0016]根据本专利技术的实施例，所述纯化处理采用反相制备色谱进行。
[0017]根据本专利技术的具体实施例，所述第一混合处理中，所述裂解液与乙腈溶液的体积比为1：(2～4)，优选地，所述乙腈溶液中乙腈为体积分数为10％～20％。采用所述裂解液与乙腈溶液的体积比在此范围内，能够增加卡贝缩宫素的产率。
[0018]根据本专利技术的具体实施例，所述聚合物填料的质量是预定粗肽量的8倍。因此，聚合物填料能够将裂解液中的粗肽较完全的吸附出来。
[0019]需要说明的是，本方案中所述“预定粗肽量”是指卡贝缩宫素
‑
肽树脂在各种条件最优化时，忽略各种操作误差、损耗完全生成卡贝缩宫素粗肽的量。
[0020]根据本专利技术的实施例，所述聚合物填料为UNIPS或UNIPSN。采用此填料，能够将裂解液中的粗肽较完全的吸附出来。
[0021]根据本专利技术的实施例，所述吸附时间为30min～1h。
[0022]根据本专利技术的实施例，所述氨基酸树脂载体为Rink
‑
AM Amide Resin树脂。
[0023]根据本专利技术的实施例，进一步包括将所述裂解液进行过滤、浓缩处理，浓缩液为所述裂解液体积的40％～50％。
[0024]根据本专利技术的实施例，所述裂解处理是在TFA(三氟乙酸)水溶液中进行的。TFA水溶液能够有助于混合液中的粗肽溶解，进而提高卡贝缩宫素的产率。
[0025]根据本专利技术的实施例，所述TFA水溶液中TFA的体积分数为90％～95％。在所述TFA的体积分数范围内，能够使粗肽较完全的溶解，进而提高卡贝缩宫素的产率。
[0026]根据本专利技术的实施例，裂解时间为1～3h。在所述裂解时间范围内，能够使粗本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种制备卡贝缩宫素的方法，其特征在于，包括：将卡贝缩宫素粗肽与乙腈溶液进行第一混合处理；将第一混合处理产物进行聚合物填料吸附处理；将吸附有第一混合处理产物的聚合物填料进行洗脱处理，以便获得洗脱液；以及将所述洗脱液进行纯化处理，以便获得所述卡贝缩宫素。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述卡贝缩宫素粗肽是通过固相合成方法获得。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述卡贝缩宫素粗肽是通过如下方式获得的：(1)将Fmoc
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Gly
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OH与氨基酸树脂载体进行第一连接处理，以便获得Fmoc
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Gly
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树脂；(2)将所述Fmoc
‑
Gly
‑
树脂依次与具有Fmoc保护基团的预定氨基酸进行连接处理，以便得到卡贝缩宫素肽
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树脂；以及(3)将所述卡贝缩宫素肽
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树脂进行裂解处理，以便获得裂解液，所述裂解液包括所述卡贝缩宫素粗肽。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述洗脱处理后进一步包括将所述洗脱液进行纯化处理和任选的浓缩处理，任选地，所述纯化处理采用反相制备色谱进行。5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述第一混合处理中，所述裂解液与乙腈溶液的体积比为1：(2～4)，优选地，所述乙腈溶...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈永汉，莫孝伦，覃亮政，
申请(专利权)人：深圳新声药业有限公司，
类型：发明
国别省市：