一种仁术健胃颗粒中黄芪甲苷含量测定方法技术

本发明专利技术公开了仁术健胃颗粒中黄芪甲苷的检测方法，仁术健胃颗粒中黄芪甲苷的测定包括以下步骤：步骤1、对照品溶液的制备；步骤2、供试品溶液的制备；步骤3、分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液，注入液相色谱仪，蒸发光散射检测器测定。本发明专利技术建立的检测方法，分析快速、准确，阴性样品没有干扰，有较强的的专属性，良好的重现性和稳定性，所得到的色谱图色谱峰峰型较好，能客观评价仁术健胃颗粒的质量。能客观评价仁术健胃颗粒的质量。能客观评价仁术健胃颗粒的质量。

【技术实现步骤摘要】
一种仁术健胃颗粒中黄芪甲苷含量测定方法


[0001]本专利技术涉及一种中药制剂中有效成分的含量测定方法，具体涉及仁术健胃颗粒中黄芪甲苷的含量测定方法。

技术介绍

[0002]仁术健胃颗粒由全国名中医、江苏省中医院(国家中医脾胃病临床研究基地)脾胃病科学术带头人单兆伟教授研究开发，四十余年来单兆伟教授通过系列临床及基础研究总结提出萎缩性胃炎胃黏膜癌前病变的主要病机特点是“气虚血瘀热郁”，制定“益气活血清热”为主要治疗法则，研究开发仁术健胃颗粒，该方由黄芪、白术、薏苡仁、黄芩、仙鹤草、莪术、半边莲、白花蛇舌草制成。
[0003]黄芪为处方中君药，具有益气健脾，治疗脾虚之本。现代研究表明黄芪含有多种化学成分，如皂苷类、黄酮类、多糖类等，其所含的三萜皂苷类化合物
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黄芪甲苷，是黄芪的主要的有效成分，也是仁术健胃颗粒的主要有效成分。因此，检测黄芪甲苷的含量能有效的控制仁术健胃颗粒的质量。现有技术中黄芪甲苷的测定方法一般为药典提供黄芪药材中黄芪甲苷的测定方法，但由于仁术健胃颗粒处方化学成分复杂，活性成分众多，采用药典方法测定时存在阴性干扰，因此在测定黄芪甲苷时，如何除去干扰因素，精准的测定含量是亟待解决的问题。

技术实现思路

[0004]为解决现有技术中存在的上述技术问题，本专利技术的目的在于提供一种用高效液相
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蒸发光散射检测器检测仁术健胃颗粒中黄芪甲苷含量的方法。
[0005]本专利技术的技术方案如下：
[0006]一种仁术健胃颗粒中黄芪甲苷含量测定方法，包括以下步骤：
[0007]步骤1、对照品溶液的制备：
[0008]精密称取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成在浓度范围内设置梯度浓度的多个对照品溶液；
[0009]步骤2、供试品溶液的制备：
[0010]取质量为M1的待测仁术健胃颗粒，置索氏提取器中，加甲醇浸泡、回流，得到提取液，取提取液回收甲醇并浓缩至干，残渣加水溶解后，用水饱和的正丁醇提取，合并正丁醇提取液，用氨试液提取，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水溶解后，通过D101型大孔吸附树脂柱，以水洗脱，弃去水液，再用40％乙醇洗脱，弃去40％乙醇洗脱液，再用70％乙醇洗脱，收集洗脱液，蒸干，用甲醇溶解并转移至体积为V1的量瓶内，加甲醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液；
[0011]步骤3、高效液相
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蒸发光散射检测器检测：
[0012]分别精密吸取步骤1制备的各对照品溶液和步骤2制备的供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，蒸发光散射检测器测定，以峰面积的自然对数值为纵坐标，以进样量的自然对
数值为横坐标，外标两点法计算，即得供试品中黄芪甲苷的浓度C1，按照公式C＝C1
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V1/M1计算出待测仁术健胃颗粒中黄芪甲苷的含量，
[0013]液相色谱条件为：
[0014]色谱柱填充剂：辛烷基硅烷键合硅胶；
[0015]流动相：体积比为76：24的甲醇
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水；
[0016]柱温：30℃；
[0017]流速：1.0mL/min；
[0018]蒸发光散射检测器条件：
[0019]漂移管温度82℃；
[0020]载气流量1.95SLPM。
[0021]进一步的，步骤1所述浓度范围为0.09～0.98mg/ml。
[0022]进一步的，步骤2中待测仁术健胃颗粒研细后加甲醇浸泡10～12小时，所述待测仁术健胃颗粒与甲醇的用量比为1g：7.5ml～10ml；优选的，将步骤2中待测仁术健胃颗粒研细过三号筛后加甲醇浸泡。
[0023]进一步的，步骤2中回流时间为4～6小时。
[0024]进一步的，步骤2中提取液回收甲醇并浓缩至干后，残渣加水10ml溶解，水饱和的正丁醇提取3次，每次20ml；氨试液提取2次，每次20ml。
[0025]进一步的，步骤2中正丁醇液蒸干后，残渣加水3～5ml溶解；所述D101型大孔吸附树脂柱内径1.5cm，长12cm；以水50ml洗脱，弃去水液，再用40％乙醇30ml洗脱，弃去40％乙醇洗脱液，再用70％乙醇50ml洗脱，收集洗脱液。
[0026]本专利技术的有益效果
[0027]本专利技术建立的样品检测方法，分析快速、准确，阴性样品没有干扰，有较强的的专属性，良好的重现性和稳定性，所得到的色谱图色谱峰峰型较好，可更有效地控制仁术健胃颗粒的黄芪甲苷含量。
附图说明
[0028]图1为黄芪甲苷专属性实验结果图，其中，A是黄芪甲苷对照品，B是阴性样品，C是供试品。
[0029]图2为仁术健胃颗粒样品液相色谱图。
具体实施方式
[0030]下面将结合实施例对本专利技术的实施方案进行详细描述，实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
[0031]实施例用到的仪器与试药如下：
[0032]仪器：日本岛津公司高液相色谱仪，包括四元泵系统LC
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20AT，全自动进样系统SIL
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20A，自动温控柱温箱CTO
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20AC；蒸发光散射检测器ELSD
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16；ML104/02电子分析天平(Mettler Toledo)；XPR2电子分析天平(Mettler Toledo)；DK
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98
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IIA电热恒温水浴锅(天津市泰斯特仪器有限公司)。
[0033]试药：仁术健胃颗粒样品来源见表1；阴性样品按照处方成分，除去黄芪药材自制；黄芪甲苷对照品购自于中国食品药品检定研究院；甲醇(分析纯)；浓氨水(分析纯)；甲醇(色谱纯)；超纯水。
[0034]表1仁术健胃颗粒样品信息表
[0035][0036]实施例1仁术健胃颗粒中黄芪甲苷含量测定
[0037]步骤1、对照品溶液的制备：
[0038]精密称取黄芪甲苷对照品，置于容量瓶中，加甲醇配制成浓度为1.4617mg/ml的对照品溶液，按照逐级稀释法制成浓度分别为0.0974、0.1949、0.3898、0.5847、0.7796、0.9745mg/ml的梯度浓度的对照品溶液。
[0039]步骤2、供试品溶液的制备：
[0040]取以上6个批次的仁术健胃颗粒和阴性样品，研细(过三号筛)，分别精密称取仁术健胃颗粒样品和阴性样品4g(M1＝4g)，置索氏提取器中，加甲醇40ml，冷浸过夜(10小时)，再加甲醇适量，回流4小时，提取液回收甲醇并浓缩至干，残渣加水10ml，微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20ml，合并正丁醇提取液，用氨试液提取2次，每次20ml，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水3～5ml使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱(内径1.5cm，长12cm)，以水50ml洗脱，弃去水液，再用40％乙醇30ml洗脱，弃去40％乙醇洗脱液，再用70％本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种仁术健胃颗粒中黄芪甲苷含量测定方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1、对照品溶液的制备：精密称取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成在浓度范围内设置梯度浓度的多个对照品溶液；步骤2、供试品溶液的制备：取质量为M1的待测仁术健胃颗粒，置索氏提取器中，加甲醇浸泡、回流，得到提取液，取提取液回收甲醇并浓缩至干，残渣加水溶解后，用水饱和的正丁醇提取，合并正丁醇提取液，用氨试液提取，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水溶解后，通过D101型大孔吸附树脂柱，以水洗脱，弃去水液，再用40％乙醇洗脱，弃去40％乙醇洗脱液，再用70％乙醇洗脱，收集洗脱液，蒸干，用甲醇溶解并转移至体积为V1的量瓶内，加甲醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液；步骤3、高效液相
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蒸发光散射检测器检测：分别精密吸取步骤1制备的各对照品溶液和步骤2制备的供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，蒸发光散射检测器测定，以峰面积的自然对数值为纵坐标，以进样量的自然对数值为横坐标，外标两点法计算，即得供试品中黄芪甲苷的浓度C1，按照公式C＝C1
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V1/M1计算出待测仁术健胃颗粒中黄芪甲苷的含量，液相色谱条件为：色谱柱填充剂：辛烷基硅烷键合硅胶；流动相：体积比为76：24的甲醇
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【专利技术属性】
技术研发人员：赵开军，彭雲，王海丽，郭健，徐董欣，
申请(专利权)人：江苏弘典中药产业研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：