玄七通痹胶囊指纹图谱的检测方法技术

本发明专利技术公开了玄七通痹胶囊指纹图谱的检测方法，包括以下步骤：1、对照品溶液的制备；2、供试品溶液的制备；3、分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液注入高效液相色谱仪，记录色谱图；4，将步骤3中获得的供试品溶液指纹图谱导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统，选择不同批次玄七通痹胶囊的色谱图中均存在的色谱峰作为共有峰；用平均值计算法生成玄七通痹胶囊的对照指纹图谱，计算各共有峰的相对保留时间、相对峰面积；并根据对照品溶液色谱图的保留时间标注对照指纹图谱中峰的化学成分。本发明专利技术提供的玄七通痹胶囊指纹图谱的检测方法具有稳定性好、精密度高、重现性好等优点，能全面、客观、准确的检测和评价玄七通痹胶囊的质量。量。量。

【技术实现步骤摘要】
玄七通痹胶囊指纹图谱的检测方法


[0001]本专利技术涉及一种中药制剂的检测方法，具体涉及玄七通痹胶囊指纹图谱的检测方法。

技术介绍

[0002]玄七通痹胶囊是中国蚂蚁疗法开拓者吴志成教授六十年临床验方，该方是由蚂蚁、三七、黄芪、重楼、老鹳草、千年健制成，具有活血化瘀、滋补肝肾、消肿止痛的功效，用于风寒湿痹引起的关节疼痛、肿胀、手足不温、四肢麻木、肩臂腰腿疼痛。
[0003]玄七通痹胶囊由多种中药制成，化学成分复杂，对其进行质量控制是保证临床用药有效性的基础。现有技术中，关于玄七通痹胶囊的研究报道较少，缺少全面反映玄七通痹胶囊所含有效成分的特征图谱。中药指纹图谱是一种综合的、可量化的鉴定手段，能较为全面地反映中药及其制剂中所含化学成分的种类与数量，进而对药品质量进行整体描述和评价。因此，亟需提供一种针对玄七通痹胶囊的指纹图谱检测方法，以更好的控制产品质量。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是解决现有技术的不足，提供一种玄七通痹胶囊的指纹图谱检测方法，该检测方法可以客观、全面、准确的评价玄七通痹胶囊的质量，对控制玄七通痹胶囊的质量和保证临床疗效具有重要意义。
[0005]为了实现上述目的，本专利技术采取的技术方案为：
[0006]本专利技术的第一个目的是提供一种玄七通痹胶囊指纹图谱的检测方法，包括以下步骤：
[0007]步骤1、标准品溶液的制备：
[0008](1)混标溶液配制：精密称定柯里拉京、重楼皂苷Ⅰ、重楼皂苷Ⅱ、重楼皂苷
Ⅶ
、毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、三七皂苷R1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1和黄芪甲苷标准品，置于容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，制成混标溶液；
[0009](2)单标溶液配制：精密称定人参皂苷Re于容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，制成单标溶液；
[0010]由于混标溶液中人参皂苷Rg1和单标人参皂苷Re的保留时间接近，因此将人参皂苷Re与其余标准品分开来配制。
[0011]步骤2、玄七通痹胶囊供试品溶液的制备：
[0012]取不同批次的玄七通痹胶囊，分别精密称取玄七通痹胶囊内容物，加甲醇，回流或超声处理，过滤，取滤液，过微孔滤膜，得供试品溶液；
[0013]步骤3、分别精密吸取步骤1制备的混标溶液、单标溶液和步骤2制备的各批次供试品溶液，注入高效液相色谱仪，采用高效液相色谱
‑
紫外和/或蒸发光散射检测，记录色谱图；
[0014]液相色谱条件为：
[0015]色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱；
[0016]流动相：A相为乙腈，B相为水，
[0017]洗脱程序：采用体积分数5
‑
95％A相，95
‑
5％B相，梯度洗脱；
[0018]柱温：30～40℃；
[0019]流速：0.8～1.2mL/min；
[0020]进样体积：10μL；
[0021]紫外检测器和/或蒸发光散射检测器，
[0022]紫外检测波长：203nm，
[0023]蒸发光散射条件：
[0024]漂移管温度：90℃；
[0025]载气流量：1.4SLPM；
[0026]步骤4、将步骤3中获得的玄七通痹胶囊供试品溶液的色谱图导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统；选择不同批次玄七通痹胶囊的色谱图中均存在的色谱峰作为共有峰；用平均值计算法生成玄七通痹胶囊的对照指纹图谱，计算各共有峰的相对保留时间和相对峰面积；并根据标准品溶液色谱图的保留时间标注玄七通痹胶囊的对照指纹图谱中峰的化学成分，得到玄七通痹胶囊的指纹图谱。
[0027]进一步的，步骤1所述混标溶液的浓度为200
±
20μg/mL的柯里拉京、200
±
20μg/mL的重楼皂苷Ⅰ、90
±
20μg/mL的重楼皂苷Ⅱ、120
±
20μg/mL的重楼皂苷
Ⅶ
、40
±
20μg/mL的毛蕊异黄酮、50
±
20g/mL的毛蕊异黄酮葡萄糖苷、100
±
20μg/mL的三七皂苷R1、120
±
20μg/mL的人参皂苷Rb1、140
±
20μg/mL的人参皂苷Rg1、130
±
20μg/mL的黄芪甲苷。
[0028]优选的，步骤1所述混标溶液的浓度为200μg/mL的柯里拉京、200μg/mL的重楼皂苷Ⅰ、90μg/mL的重楼皂苷Ⅱ、120μg/mL的重楼皂苷
Ⅶ
、40μg/mL的毛蕊异黄酮、50g/mL的毛蕊异黄酮葡萄糖苷、100μg/mL的三七皂苷R1、120μg/mL的人参皂苷Rb1、140μg/mL的人参皂苷Rg1、130μg/mL的黄芪甲苷。
[0029]进一步的，步骤1所述单标溶液中人参皂苷Re浓度为150
±
20μg/mL。
[0030]优选的，步骤1所述单标溶液中人参皂苷Re浓度为150μg/mL。
[0031]进一步的，步骤2中玄七通痹胶囊内容物质量M与甲醇体积V的比为M:V＝1g：(10:15)mL；所述超声时间不低于30min；所述微孔滤膜孔径为0.22μm；优选的，玄七通痹胶囊内容物质量M与甲醇体积V的比为M:V＝1g：10mL。
[0032]进一步的，步骤3所述色谱柱为Shim
‑
pack GIST(250mm
×
4.6mm，5μm)。
[0033]进一步的，步骤3所述梯度洗脱程序如下表：
[0034][0035]本专利技术的第二个目的是提供采用前述的建立方法得到的玄七通痹胶囊指纹图谱，所述玄七通痹胶囊指纹图谱为紫外检测指纹图谱和/或蒸发光散射检测指纹图谱。
[0036]进一步的，所述玄七通痹胶囊指纹图谱中紫外检测到28个共有峰，蒸发光散射检测到23个共有峰。
[0037]进一步的，紫外检测的28个共有峰中识别11个成分，其中5号峰为柯里拉京，保留时间为27.237min，6号峰为毛蕊异黄酮葡萄糖苷，保留时间为33.739min，8号峰为三七皂苷R1，保留时间为38.828min，9号峰为人参皂苷Re，保留时间为40.217min，10号峰为人参皂苷Rg1，保留时间为40.403min，13号峰为毛蕊异黄酮，保留时间为44.298min，14号峰为人参皂苷Rb1，保留时间为48.166min，15号峰为黄芪甲苷，保留时间为51.210min，20号峰为重楼皂苷VII，保留时间为57.933min，24号峰为重楼皂苷II，保留时间为67.670min，25号峰为重楼皂苷I，保留时间为70.239min；蒸发光散射的23个共有峰中识别9个成分，其中1号峰为毛蕊异黄酮葡萄糖苷，保留时间为33.946min，3号峰为三七皂苷R1，保留时间为39.041min，4号峰为人参皂苷Re，保留时间为40.395本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种玄七通痹胶囊指纹图谱的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1、标准品溶液的制备：(1)混标溶液配制：精密称定柯里拉京、重楼皂苷Ⅰ、重楼皂苷Ⅱ、重楼皂苷
Ⅶ
、毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、三七皂苷R1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1和黄芪甲苷标准品，置于容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，制成混标溶液；(2)单标溶液配制：精密称定人参皂苷Re于容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，制成单标溶液；步骤2、玄七通痹胶囊供试品溶液的制备：取不同批次的玄七通痹胶囊，分别精密称取玄七通痹胶囊内容物，加甲醇，回流或超声处理，过滤，取滤液，过微孔滤膜，得供试品溶液；步骤3、分别精密吸取步骤1制备的混标溶液、单标溶液和步骤2制备的各批次供试品溶液，注入高效液相色谱仪，采用高效液相色谱
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紫外和/或蒸发光散射检测，记录色谱图；液相色谱条件为：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱；流动相：A相为乙腈，B相为水，洗脱程序：采用体积分数5
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95％A相，95
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5％B相，梯度洗脱；柱温：30～40℃；流速：0.8～1.2mL/min；进样体积：10μL；紫外检测器和/或蒸发光散射检测器检测，紫外检测波长：203nm，蒸发光散射条件：漂移管温度：90℃；载气流量：1.4SLPM；步骤4、将步骤3中获得的玄七通痹胶囊供试品溶液的色谱图导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统；选择不同批次玄七通痹胶囊的色谱图中均存在的色谱峰作为共有峰；用平均值计算法生成玄七通痹胶囊的对照指纹图谱，计算各共有峰的相对保留时间和相对峰面积；并根据标准品溶液色谱图的保留时间标注玄七通痹胶囊的对照指纹图谱中峰的化学成分，得到玄七通痹胶囊的指纹图谱。2.根据权利要求1所述的玄七通痹胶囊指纹图谱的检测方法，其特征在于，步骤1所述混标溶液的浓度为200
±
20μg/mL的柯里拉京、200
±
20μg/mL的重楼皂苷Ⅰ、90
±
20μg/mL的重楼皂苷Ⅱ、120
±
20μg/mL的重楼皂苷
Ⅶ
、40
±
20μg/mL的毛蕊异黄酮、50
±
20g/mL的毛蕊异黄酮葡萄糖苷、100
±
20μg/mL的三七皂苷R1、120
±
20μg/mL的人参皂苷Rb1、140
±
20μg/mL的人参皂苷Rg1、130
±
20μg/mL的黄芪甲苷。3.根据权利要求1所述的玄...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵开军，王海丽，彭雲，袁梓倚，丁勇，
申请(专利权)人：江苏弘典中药产业研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：