一种多酶协同表达重组基因工程菌及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种多酶协同表达重组基因工程菌，以及其在生物催化制备L

【技术实现步骤摘要】
一种多酶协同表达重组基因工程菌及其应用
(一)

[0001]本专利技术涉及一种多酶协同表达重组基因工程菌，以及其在生物催化制备L
‑2‑
氨基丁酸中的应用。
(二)
技术介绍

[0002]L
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氨基丁酸(L
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aminobutyricacid，L
‑
ABA)是一种非天然氨基酸，可以提高葡萄糖磷酸酯酶活性，促进脑细胞新陈代谢，医学临床用于无痛去龋和脑血管病后遗症，并且具有降压功效。此外，L
‑2‑
氨基丁酸还是一种重要的化工原料和医药中间体，可通过酰胺化制备(S)
‑2‑
氨基丁酰胺盐，是合成抗癫痫药左乙拉西坦的关键中间体，也可通过还原末端羧基用于制备(S)
‑2‑
氨基丁醇，并被用来合成乙胺丁醇。L
‑2‑
氨基丁酸的工业化生产技术已成为制药工程研究的热点。
[0003]L
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氨基丁酸的制备方法主要包括化学合成法、生物合成法两种。其中化学法包括脱硫反应、氨化水解反应、丁酮酸还原法本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种多酶协同表达重组基因工程菌，由如下方法构建获得：采用单质粒双基因表达载体，在其多克隆位点插入甲酸脱氢酶基因和亮氨酸脱氢酶基因，并将其限制性酶位点前的RBS序列替换为CTACCCCCAAGGTTGATAAGGAGGTATTTT，转化宿主细胞，得到所述多酶协同表达重组基因工程菌；所述亮氨酸脱氢酶基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述甲酸脱氢酶基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。2.如权利要求1所述的重组基因工程菌，其特征在于所述单质粒双基因表达载体为pACYCDuet、pCDFDuet、pETDuet或pRSFDuet之一。3.如权利要求1所述的重组基因工程菌，其特征在于所述单质粒双基因表达载体为pRSFDuet，在其MCS1和MCS2中插入甲酸脱氢酶基因和亮氨酸脱氢酶基因，获得pRSFDuet
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fdh
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Leudh，并将其MCS1的RBS序列替换为CTACCCCCAAGGTTGATAAGGAGGTATTTT。4...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐建妙，马弋锋，郑裕国，柳志强，
申请(专利权)人：浙江工业大学，
类型：发明
国别省市：