一种儿茶酚胺及儿茶酚胺代谢产物的检测方法及试剂盒技术

本发明专利技术公开了一种儿茶酚胺及儿茶酚胺代谢产物的检测方法及试剂盒，包括：采用肌酐Cre校正，利用丹磺酰氯衍生法将尿液样本中的8种儿茶酚胺及儿茶酚胺代谢产物转化为稳定的衍生物，利用高效液相色谱仪进行分离，经三重四级杆串联质谱仪同时测定尿液中肌酐和8种儿茶酚胺及儿茶酚胺代谢产物的浓度以及处理数据。本发明专利技术选择以随机尿液样本为检测对象，解决临床门诊患者依从度差，收样困难弊端，不增加肌酐检测实验，8种儿茶酚胺及儿茶酚胺代谢产物与丹磺酰氯反应后生成稳定的衍生物，再经三重四级杆串联质谱仪同时测定尿液中肌酐和8种儿茶酚胺及儿茶酚胺代谢产物的浓度，本发明专利技术的检测方法简单快捷、准确高效，临床应用价值高。临床应用价值高。临床应用价值高。

【技术实现步骤摘要】
一种儿茶酚胺及儿茶酚胺代谢产物的检测方法及试剂盒


[0001]本专利技术属于分析检测
，涉及儿茶酚胺及儿茶酚胺代谢产物的检测，尤其涉及一种随机尿液样本中儿茶酚胺及儿茶酚胺代谢产物的检测方法及试剂盒。

技术介绍

[0002]高血压可造成脑卒中、心肌梗死、心力衰竭、引发死亡等恶性事件，成为威胁人类健康的主要疾病；继发性高血压约占总高血压10％左右；高血压的诊断评估中需判断高血压的原因，区分原发性或继发性高血压，及时作出高血压病因的鉴别诊断并积极针对病因进行治疗：且新诊断高血压患者应该进行常见的继发性高血压筛查。
[0003]嗜铬细胞瘤和副神经节瘤(pheochromocytoma and paraganglioma,PPGL)是继发性高血压的主要原因之一，嗜铬细胞瘤约占总高血压人群1％，至少270万，即每1000个人里面就有1.7个人是嗜铬细胞瘤患者；另一方面，每年新发300万高血压，其中约3万人是嗜铬细胞瘤。嗜铬细胞瘤可引起患者血压升高，造成心、脑、肾等严重并发症，临床表现可为引起持续性(50％)、阵发性高血压(30％)、血压正常(本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种儿茶酚胺及儿茶酚胺代谢产物的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括：采用肌酐Cre校正，利用丹磺酰氯衍生法将尿液样本中的8种儿茶酚胺及儿茶酚胺代谢产物转化为稳定的衍生物，利用高效液相色谱仪将肌酐和8种儿茶酚胺及儿茶酚胺代谢产物进行分离后，经三重四级杆串联质谱仪同时测定尿液中肌酐和8种儿茶酚胺及儿茶酚胺代谢产物的浓度以及处理数据；其中，所述的8种儿茶酚胺及儿茶酚胺代谢产物为：香草扁桃酸VMA、高香草酸HVA、去甲变肾上腺素NMN、去甲变肾上腺素MN、3
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甲氧酪胺3
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MT、去肾上腺素NE、去甲变肾上腺素E以及多巴胺DA。2.根据权利要求1所述的一种儿茶酚胺及儿茶酚胺代谢产物的检测方法，其特征在于，所述检测方法的具体步骤为：1)定标曲线配制：配制六种浓度的校准品1
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6，每种浓度的校准品中均含所述的8种儿茶酚胺及儿茶酚胺代谢产物以及肌酐；2)混合内标工作液的配制：配制所述的8种儿茶酚胺及儿茶酚胺代谢产物的甲醇溶液混合母液以及肌酐母液，用释放剂A稀释至混合内标工作液；其中，混合内标工作液中8种儿茶酚胺及儿茶酚胺代谢产物的浓度为：8μg/mL的VMA
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d3，8μg/mL的HVA
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d3，100ng/mL的NMN
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d3，100ng/mL的MN
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d3，500ng/mL的3
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MT
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d4，100ng/mL的NE
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d3，100ng/mL的E
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d6与500ng/mL的DA
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13C6，混合内标液中肌醇的浓度为50μg/mL的Cre
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d3；3)质控品配制：将经过测试后的人工尿液基质，按照99mL人工尿液，加入1mL浓盐酸，混匀后作为质控基质，加入儿茶酚胺及儿茶酚胺代谢产物混合标准品，配制低浓度以及高浓度质控品；4)样品前处理：中段尿液样本采集；将中段尿液样本、步骤1)的标准品1
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6、步骤2)的混合内标工作液、步骤3)的低浓度以及高浓度质控品于离心管中，涡旋混匀，离心，取上清液；向上清液中加入释放剂B与衍生液，涡旋混匀，恒温震荡反应，加入释放剂C涡旋后，高速离心，取上清液；5)将步骤4)的上清液经相色谱三重四级杆串联质谱检测；6)数据处理：由仪器自带软件MassLynx采集分析物及其内标的色谱图并正确积分，采用同位素内标法定量，1/x为权重，以各化合物与其同位素内标峰面积之比为纵坐标，各化合物的浓度为横坐标绘制校准工作曲线，用校准曲线校准样本及质控品，得出各化合物的浓度。3.根据权利要求2所述的一种儿茶酚胺及儿茶酚胺代谢产物的检测方法，其特征在于，步骤2)中，所述的释放剂A为0.1％甲酸，50
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100％乙腈水溶液。4.根据权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：周兵，吴超超，高强，薛建有，
申请(专利权)人：杭州佰辰医疗器械有限公司，
类型：发明
国别省市：