一种同步高效检测污泥中36种抗抑郁药物残留量的方法技术

本发明专利技术公开了一种同步高效检测污泥中36种抗抑郁药物残留量的方法。包括目标药物粗提、提取液净化、采用高效液相色谱串联质谱技术进行检测、以及抗抑郁药物的定性及定量分析。本发明专利技术基于高效液相色谱串联质谱检测技术，采用UPLC/QTOF

【技术实现步骤摘要】
一种同步高效检测污泥中36种抗抑郁药物残留量的方法


[0001]本专利技术属于痕量环境污染物检测
，具体涉及一种同步高效检测污泥中36种抗抑郁药物残留量的方法。

技术介绍

[0002]抗抑郁药物是一类治疗重度抑郁症、焦虑症、强迫症、饮食失调、慢性疼痛、神经性疼痛的药物，同时也被用于辅助治疗痛经、打鼾、偏头痛、多动症、药物滥用和失眠的症状。根据统计数据，由于精神障碍患者人数的激增，抗抑郁药物的生产和消费量迅速攀升。未经人体转化吸收的抗抑郁药及其代谢物随排泄物进入环境，这使得该类药物向环境的排放量及环境浓度持续增加。环境生物长期暴露于存在抗抑郁药物的环境介质将导致生物累积，进而引起生物的行为异常及生殖毒性，并可能造成生态环境风险。
[0003]污水处理厂作为城市污水和城镇污水的主要收纳处理系统，是阻断新污染物向环境中排放的关键屏障。根据现有研究，污泥吸附是污水中抗抑郁药物的主要去除方式，因此在污泥中存在不同程度的抗抑郁药物及其代谢产物残留。剩余污泥经过浓缩、脱水和稳定化后会被直接填埋或利用于建材、土壤改良等，而其中残留的抗抑郁药物可能会向土壤或地下水迁移，造成二次污染。为评估二次污染的风险程度，需充分了解污泥中抗抑郁药物的残留水平。因此，建立一种同时测定污泥中多种抗抑郁药残留量的分析方法十分必要。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种能够同时检测污泥中多种抗抑郁药的方法，能够快速高效地检测污泥中36种抗抑郁药，其检测限低，灵敏度高且检测速度快。
[0005]本专利技术的技术方案：一种同步高效检测污泥中36种抗抑郁药物残留量的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一，目标药物粗提：称取污泥样品后用溶剂提取出含抗抑郁药物的提取液；步骤二，提取液净化：净化提取液；步骤三，对净化后的提取液采用高效液相色谱串联质谱技术进行检测；步骤四，抗抑郁药物的定性及定量分析；所述的36种抗抑郁药物是阿戈美拉汀、阿普唑仑、阿米替林、安非他酮、丁螺环酮、卡马西平、利眠宁、氧异安定、氯硝西泮、氯氮平、去甲文拉法辛、地西泮、多虑平、度洛西汀、艾司西酞普兰、艾司唑仑、氟硝西泮、氟西汀、氟拉西泮、丙咪嗪、拉莫三嗪、米安色林、咪达唑仑、米氮平、吗氯贝胺、硝西泮、去甲地西泮、去甲替林、普拉西泮、奎硫平、瑞波西汀、罗哌卡因、舍曲林、坦度螺酮、曲唑酮和文拉法辛；所述净化提取液包括：将步骤一收集的提取液通过含Carbon S的直通式EMR
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LPD小柱，收集净化流出液，在室温下氮气吹干后复溶于甲醇，混匀后过滤，收集滤液避光保存，待上机检测；
所述用溶剂提取出含抗抑郁药物的提取液，包括以下步骤：冷冻干燥污泥样品，研磨冻干污泥过筛；称取污泥样品，向样品中先后加入无机提取剂及有机提取剂，混合均匀，其后超声并离心提取、收集上清液；所述的无机提取剂为pH为11的氨水溶液；有机提取剂为甲醇、乙酸乙酯和正己烷中的一种或多种。
[0006]优选，所述高效液相色谱串联质谱技术的检测条件为：液相色谱条件：ACQUITY UPLC BEH C18柱，2.1 mm
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100 mm，柱温40℃，流速为：0.35 mL/min，进样体积2 μL，流动相A为0.1%甲酸水溶液，B为乙腈；梯度洗脱条件为：0~28 min，90%~10% A；28~30, 10%~90% A，保持2 min；各个阶段洗脱剂中流动相A与流动相B合计100%；质谱检测条件：采用电喷雾离子源，在正离子模式下，使用MS
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扫描模式在单次进样中并行采集高低碰撞能的MS数据，其中低能通道采集化合物母离子，高能通道采集碎片离子；碰撞电压：低能6 V，高能10 V
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40 V；扫描范围：m/z 50
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1000；离子源温度120℃；毛细管电压2.5 kV；锥孔电压40 V；锥孔气流量50 L/Hr；干燥气为氮气，干燥气温度500℃，干燥气流量600 L/Hr。
[0007]优选，所述用溶剂提取出含抗抑郁药物的提取液的具体步骤为：（1）冷冻干燥：使用冻干机，将污泥样品在真空条件下于
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60℃冷冻干燥48小时，研磨过100目筛，获得均质污泥颗粒，
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20℃冷藏保存；（2）超声离心提取：称取0.5 g污泥样品，置于50 mL离心管，进行以下步骤：A. 向样品管中加入4 mL由HPLC级25%氨水调至pH为11的氨水溶液与1 mL甲醇，涡旋样品5 min；B. 向样品管中加入5 mL乙酸乙酯，涡旋使之充分混合均匀后将其置于超声波浴中萃取10 min，然后在4500 rpm条件下离心5 min，收集上清液，重复此超声离心步骤1次，合并上清液；C. 向样品管中加入4 mL正己烷，涡旋使之充分混合后将其置于超声波浴中萃取10 min，然后在4500 rpm条件下离心5 min，收集并合并上清液，获得提取液。
[0008]优选，所述抗抑郁药物的定性及定量分析为：通过精确质量数、保留时间或特征离子进行定性分析；采用外标法进行定量分析。
[0009]优选，所述定性及定量分析具体为：定性方法：目标物的定性分析在UNIFI科学信息系统中进行，在进行定性分析之前，先绘制出目标抗抑郁药物的化学结构式构建出目标物数据库，导入UNIFI科学信息系统中；随后创建分析方法，选择所需的离子化模式后将目标物数据库导入为分析方法的关注组分列表，完成对应筛选参数的设置，具体为化合物母离子的精确质量误差小于3 ppm，碎片离子的精确质量误差小于10 ppm；使用步骤三中的检测方法采集100 μg/L各目标抗抑郁药物标准品的MS
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数据，随后在UNIFI科学信息系统中进行数据分析，逐一匹配后获得各目标抗抑郁药在仪器方法下的实测精确质量、保留时间及高低能量下的质谱信息；将用标准品获得的上述信息分配给数据库中的各目标化合物，再次利用含有各目标抗抑郁药物实测精确质量、保留时间及碎片离子信息的数据库创建样品的定性方法；实际样品中目标抗抑郁药的匹配原则为：精确质量误差小于2 ppm，保留时间误差小于0.1 min，能匹配到预期的碎片离子；
定量方法：在UNIFI中创建基于外标法的定量分析方法，在定性方法的关注组分列表中设置标准曲线的默认浓度级别，具体为1、5、10、20、50、100及200 ng/g混合标准品工作液，标曲的拟合模式为线性；采集系列浓度的混合标准品工作液的MS
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数据导入UNIFI后，用建好的分析方法创建分析，数据分析完毕后软件自动给出标准工作曲线，将实际环境污泥样品的MSE数据添加到上述标准品的定量分析中，运行分析，分析完毕后将获得样品中目标抗抑郁药的含量。
[0010]本专利技术还提供了上述方法在检测污泥中36种抗抑郁药物残留量中的应用，所述的36种抗抑郁药物是阿戈美拉汀、阿普唑仑、阿米替林、安非他酮、丁螺环酮、卡马西平、利眠宁、氧异安定、氯硝西泮、氯氮平、去甲文拉法辛、地西泮、多虑平、度洛西汀、艾司西酞普兰、艾司唑仑、氟硝西泮、氟西汀、氟拉西泮本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种同步高效检测污泥中36种抗抑郁药物残留量的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一，目标药物粗提：称取污泥样品后用溶剂提取出含抗抑郁药物的提取液；步骤二，提取液净化：净化提取液；步骤三，对净化后的提取液采用高效液相色谱串联质谱技术进行检测；步骤四，抗抑郁药物的定性及定量分析；所述的36种抗抑郁药物是阿戈美拉汀、阿普唑仑、阿米替林、安非他酮、丁螺环酮、卡马西平、利眠宁、氧异安定、氯硝西泮、氯氮平、去甲文拉法辛、地西泮、多虑平、度洛西汀、艾司西酞普兰、艾司唑仑、氟硝西泮、氟西汀、氟拉西泮、丙咪嗪、拉莫三嗪、米安色林、咪达唑仑、米氮平、吗氯贝胺、硝西泮、去甲地西泮、去甲替林、普拉西泮、奎硫平、瑞波西汀、罗哌卡因、舍曲林、坦度螺酮、曲唑酮和文拉法辛；所述用溶剂提取出含抗抑郁药物的提取液，包括以下步骤：冷冻干燥污泥样品，研磨冻干污泥过筛；称取污泥样品，向样品中先后加入无机提取剂及有机提取剂，混合均匀，其后超声并离心提取、收集上清液；所述的无机提取剂为氨水溶液；有机提取剂为甲醇、乙酸乙酯和正己烷中的一种或多种；所述净化提取液包括：将步骤一收集的提取液通过含Carbon S的直通式EMR
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LPD小柱，收集净化流出液，在室温下氮气吹干后复溶于甲醇，混匀后过滤，收集滤液避光保存，待上机检测。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述高效液相色谱串联质谱技术的检测条件为：液相色谱条件：ACQUITY UPLC BEH C18柱，2.1 mm
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100 mm，柱温40℃，流速为：0.35 mL/min，进样体积2 μL，流动相A为0.1%甲酸水溶液，B为乙腈；梯度洗脱条件为：0~28 min，90%~10% A；28~30, 10%~90% A，保持2 min；各个阶段洗脱剂中流动相A与流动相B合计100%；质谱检测条件：采用电喷雾离子源，在正离子模式下，使用MS
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扫描模式在单次进样中并行采集高低碰撞能的MS数据，其中低能通道采集化合物母离子，高能通道采集碎片离子；碰撞电压：低能6 V，高能10 V
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40 V；扫描范围：m/z 50
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1000；离子源温度120℃；毛细管电压2.5 kV；锥孔电压40 V；锥孔气流量50 L/Hr；干燥气为氮气，干燥气温度500℃，干燥气流量600 L/Hr。3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述用溶剂提取出含抗抑郁药物的提取液的具体步骤为：（1）冷冻干燥：使用冻干机，将污泥样品在真空条件下于
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60℃冷冻干燥48小时，研磨过100目筛，获得均质污泥颗粒，
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20℃冷藏保存；（2）超声离心提取：称取0.5 g污泥样品，置于50 mL离心管，进行以下步骤：A. 向样品管中加入4 mL由HPLC级...

【专利技术属性】
技术研发人员：许玫英，张晋娜，王安国，赖思华，
申请(专利权)人：广东省科学院微生物研究所广东省微生物分析检测中心，
类型：发明
国别省市：