抗人CD38双特异性抗体及其用途制造技术

本申请提供了抗人CD38的双特异性抗体及其用途，所述双特异性抗体包含结合人CD38不同表位的两个抗原结合片段。表位的两个抗原结合片段。

【技术实现步骤摘要】
抗人CD38双特异性抗体及其用途
专利

[0001]本专利技术通常涉及基因工程和抗体药物领域；具体而言，本申请涉及抗人CD38的双特异性抗体及其用途。
[0002]专利技术背景
[0003]CD38是一种分子量大小为46KD的II型跨膜蛋白，包括一个长的C端胞外区(258个氨基酸)、一个跨膜区(21个氨基酸)和一个短的N端(21个氨基酸)。CD38的功能体现在两方面，首先，CD38胞外区是具有ADP
‑
核糖环化酶、环ADP
‑
核糖水解酶、NAD多糖水解酶活性的一种胞外酶，涉及cADPR的形成和水解。当CD38作为一种ADP核糖基环化酶存在时，可以将烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)转化为烟酰胺、腺苷二磷酸核糖(ADPR)，还可以将NAD+环化为环腺苷二磷酸核糖(cADPR)
[1]。CD38的这个活性对维持体内NAD、烟酰胺等物质的动态平衡非常重要。CD38的底物主要为β
‑
NAD以及β
‑
NAD的衍生物(如β
‑
NMN)，而对α
‑
NAD、NADH等物质没有催化活性。催化反应的产物ADPR、cADPR等物质作为细胞中重要的第二信使，可以通过调控细胞钙离子的方式来影响细胞生长、胰岛素释放、T细胞激活等功能
[2]。CD38催化生成的ADPR/cADPR可以继续被CD203、CD73等酶的作用下生成腺苷，而腺苷则是发挥免疫抑制功能的小分子代谢物。
[0004]另外，CD38介导跨膜信号传递。CD38与配体作用诱导白细胞介素1(IL
‑
1)、肿瘤坏死因子α(TNFα)和粒
‑
巨噬细胞集落刺激因子(GMCSF)的转录，其表达水平与刺激T细胞受体CD3的效应相似。在Jurkat细胞系中CD38启动信号传递导致一系列离散的蛋白的磷酸化，原癌基因p120c
‑
cbl的产物是主要的蛋白，在这条信号通路中其酪氨酸被磷酸化。CD38还可以通过T细胞受体(TCR)传导信号并参与细胞应答，启动免疫蛋白的转换分泌
[3]。CD38与配体结合可抑制在骨髓微环境培养的未成熟B淋巴细胞的生长。
[0005]CD38的表达和多种疾病有关，如HIV感染
[4]、系统红斑狼疮
[5]和肿瘤。CD38在多种血液肿瘤中的表达量上调，如多发性骨髓瘤(MM)
[6]、急性淋巴性白血病(ALL)
[7]、慢性淋巴性白血病(CLL)
[8]等。目前对CD38与肿瘤的研究基本可以确定CD38在促进肿瘤细胞生长及免疫逃逸方面具有重要的功能。CD38与肿瘤的关系基本可以概括为两点:
[0006]CD38在非实体瘤，尤其是多发性骨髓瘤(multiple myeloma，MM)中表达量很高，且与多发性骨髓瘤预后负相关，这使得CD38成为了多发性骨髓瘤、CLL等非实体瘤靶向治疗的良好靶点之一。多发性骨髓瘤是一种浆细胞异常增生导致的恶性血液肿瘤，在血液肿瘤中占比约为10％，在所有肿瘤中的比率约为1％
[9]。统计显示：在2012年，全球共有114,252例新增病例和80,119例死亡病例
[10]。多发性骨髓瘤的发病率有一定的人种差异性，具体来说东亚地区的发病率要低于欧美，GLOBOCAN 2012的统计数据显示美国的发病率为3.6/10万，中国的发病率为0.6/10万
[11]。
[0007]此外，CD38在某些实体瘤中也存在较高的表达。由于CD38及后续的CD203、CD73等酶共同作用生成腺苷这个具有免疫抑制活性的分子，CD38在实体瘤的肿瘤微环境中发挥了重要的免疫抑制功能，因此靶向CD38的实体瘤治疗将有望解除CD38对免疫细胞的抑制作用，使免疫治疗更好发挥作用。
[0008]2015年底，FDA批准强生靶向CD38的抗体药物Darzalex上市，用于既已接受至少3种疗法治疗的多发性骨髓瘤患者(四线疗法)。Darzalex是全球首个获批治疗多发性骨髓瘤的CD38单克隆抗体。Darzalex可以通过抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用(ADCC)、补体依赖的细胞毒性(CDC)、抗体依赖的细胞介导的吞噬作用(ADCP)等机制杀死CD38
+
骨髓瘤细胞
[12]。2020年3月，美国FDA宣布批准赛诺菲(Sanofi)公司开发的CD38抗体Sarclisa(isatuximab
‑
irfc)上市，与泊马度胺(pomalidomide)和地塞米松(dexamethasone)联用，治疗成年多发性骨髓瘤患者。这些患者至少接受过两种前期疗法，包括来那度胺(lenalidomide)和蛋白酶体抑制剂。
[0009]双特异性抗体(bispecific antibody，BsAb)是一类人工抗体，其包含两个不同的抗原结合位点，可以桥接两种细胞类型，或者结合一个细胞的两个分子以及结合一个分子的两个表位，产生不同于单抗的或者较单抗更强的功能，现已成为抗体工程领域的研究热点，在疾病的免疫治疗中具有广阔的应用前景。
[0010]新的抗人CD38双特异性抗体的开发和应用是本领域所需要的。因此，鉴于抗人CD38双特异性抗体具有广泛的适用性，基于临床需求，探索和研发新的抗人CD38双特异性抗体具有重要的生物学和医学意义。
[0011]专利技术概述
[0012]第一方面，本申请提供了双特异性抗体，其包含结合人CD38不同表位的第一抗原结合片段和第二抗原结合片段。
[0013]在第一方面的一些实施方案中，所述第一抗原结合片段包含:
[0014]如SEQ ID NO:23所示的HCDR1，
[0015]如SEQ ID NO:24所示的HCDR2，
[0016]如SEQ ID NO:25所示的HCDR3，
[0017]如SEQ ID NO:26所示的LCDR1，
[0018]如SEQ ID NO:27所示的LCDR2，和
[0019]如SEQ ID NO:28所示的LCDR3；
[0020]其中HCDR和LCDR的氨基酸序列根据Kabat定义。
[0021]在第一方面的一些实施方案中，所述第二抗原结合片段包含:
[0022]如SEQ ID NO:29所示的HCDR1，
[0023]如SEQ ID NO:30所示的HCDR2，
[0024]如SEQ ID NO:31所示的HCDR3，
[0025]如SEQ ID NO:32所示的LCDR1，
[0026]如SEQ ID NO:33所示的LCDR2，和
[0027]如SEQ ID NO:34所示的LCDR3；
[0028]其中HCDR和LCDR的氨基酸序列根据Kabat定义。
[0029]在第一方面的一些实施方案中，所述第一抗原结合片段的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:10所示，轻链可变区的氨基酸序列如SEQ 本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.双特异性抗体，其包含结合人CD38不同表位的第一抗原结合片段和第二抗原结合片段。2.如权利要求1所述的双特异性抗体，其中所述第一抗原结合片段包含:如SEQ ID NO:23所示的HCDR1，如SEQ ID NO:24所示的HCDR2，如SEQ ID NO:25所示的HCDR3，如SEQ ID NO:26所示的LCDR1，如SEQ ID NO:27所示的LCDR2，和如SEQ ID NO:28所示的LCDR3；其中HCDR和LCDR的氨基酸序列根据Kabat定义。3.如权利要求1所述的双特异性抗体，其中所述第二抗原结合片段包含:如SEQ ID NO:29所示的HCDR1，如SEQ ID NO:30所示的HCDR2，如SEQ ID NO:31所示的HCDR3，如SEQ ID NO:32所示的LCDR1，如SEQ ID NO:33所示的LCDR2，和如SEQ ID NO:34所示的LCDR3；其中HCDR和LCDR的氨基酸序列根据Kabat定义。4.如权利要求1或2所述的双特异性抗体，其中所述第一抗原结合片段的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:10所示，轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:11所示。5.如权利要求1或3所述的双特异性抗体，其中所述第二抗原结合片段的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:12所示，轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:13所示。6.如权利要求1

【专利技术属性】
技术研发人员：万姝南，刘志刚，周晓巍，刘玉兰，胡俊杰，郝小勃，
申请(专利权)人：北京智仁美博生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：